Эффективность программ криопереноса в зависимости от транскрипционного «портрета» генов рецептивности эндометрия

Цель. Оценить исходы программ переноса размороженных эмбрионов в зависимости от особенности экспрессии матричной рибонуклеиновой кислоты (мРНК) 15 генов в эндометрии в период «окна имплантации».
Материалы и методы. Были обследованы 36 пациенток с трубно-перитонеальным фактором бесплодия, которым была произведена пайпель-биопсия эндометрия на фоне циклической гормональной терапии на 5-й день назначения препаратов прогестерона (П+5) в цикле перед переносом эмбрионов. Проведено гистологическое и молекулярно-генетическое исследование экспрессии генов в образцах эндометрия методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией. После переноса размороженных эмбрионов в полость матки были проанализированы результаты исходов программ вспомогательных репродуктивных технологий.
Результаты. Установлены молекулярно-генетические особенности «окна имплантации» в зависимости от исходов программ криопереноса, на основании которых были выделены промежуточные этапы развития рецептивного эндометрия.
Заключение. На основании исследования профиля экспрессии мРНК генов LIF, GPX3, AQP3, NDRG1, GNLY, IMPA2, PAEP, IGFBP1, HABP2, DPP4, TAGLN, IL15, POSTN, HLA-DOB, MSX1 может быть определен наиболее благоприятный день для переноса эмбрионов.

Имплантация эмбриона в полость матки – это сложный многоуровневый процесс, физиология которого не исследована в полной мере. Успешная имплантация и развитие беременности в эндометрии возможны только в определенный период времени – «окно имплантации» [1]. Описаны случаи имплантации эмбриона в различные ткани организма женщины, за исключением нерецептивного эндометрия [2]. Изучение рецептивности эндометрия остается актуальным вопросом современной репродукции человека. Для того чтобы эндометрий «перешел» в состояние готовности к принятию бластоцисты, необходим гормональный прайминг эстрадиолом (Е2) и прогестероном (П), который осуществляется у женщин с регулярным менструальным циклом. Для повышения результативности в программах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) у бесплодных пациенток с повторными неудачными имплантациями зачастую используют дополнительное назначение циклической гормональной терапии (ЦГТ). Развитие технологий ВРТ позволило шагнуть далеко вперед в изучении качества эмбрионов, технологий витрификации, дозревания гамет, оптимизации протоколов стимуляции суперовуляции, подготовки эндометрия к переносу размороженных эмбрионов. Однако причина повторных неудачных имплантаций в ряде случаев кроется в нарушении рецептивности эндометрия.

Морфологические критерии созревания эндометрия не способны дать четкую дифференцировку признаков готовности эндометрия к имплантации эмбриона [3]. Считается, что период «окна фертильности» совпадает со средней стадией фазы секреции. В то же время ряд исследований показывают сомнительную диагностическую ценность данного метода для определения рецептивного статуса эндометрия [4]. Поэтому наиболее пристальное внимание современных исследователей обращено на поиски молекулярно-генетических биомаркеров рецептивности эндометрия [5–9]. Кроме того, молекулярно-генетическое исследование является более перспективным в определении «окна фертильности» в сравнении с [5]. Тест-система ERA (endometrial receptivity array) является одной из первых диагностических систем, разработанной на основании изучения особенности экспрессии 238 генов в эндометрии [9]. Разработчики данной системы установили, что у каждой 3-й женщины с безуспешными попытками ЭКО и переноса эмбриона существует риск сдвига «окна имплантации». На основании результатов данной системы предложен персонифицированный алгоритм лечения пациенток с повторными неудачными имплантациями [10]. Учитывая тот факт, что в нашей стране нет системы для выявления молекулярно-генетических предикторов «окна имплантации», разработка российского аналога является перспективным направлением.

Целью исследования было сопоставить исходы криопротоколов с результатами молекулярно-генетического исследования экспрессии матричной рибонуклеиновой кислоты (мРНК) генов в эндометрии на фоне ЦГТ.

Материалы и методы

В данное пилотное исследование были включены 36 бесплодных женщин, обратившихся для проведения программы переноса размороженных эмбрионов. Всем пациенткам со 2–3-го дня менструального цикла был назначен препарат эстрадиола валерата в дозировке 2 мг с постепенным увеличением дозировки до 6–8 мг в сутки на 10–12-й дни, с последующим добавлением препаратов микронизированного прогестерона (П+0) в дозировке 600 мг в сутки. На 5-й день назначения прогестерона всем пациенткам была произведена пайпель-биопсия эндометрия. Пайпель-биопсию эндометрия производили с помощью аспирационной кюретки Pipele de Corner (Laboratorie C.C.D., Франция). Биоптаты эндометрия были разделены на 2 части: для гистологического и молекулярно-генетического исследования.

Гистологическое исследование. Полученный материал помещали в парафин, после чего производили окрашивание срезов гематоксилин-эозином и исследовали с помощью светового микроскопа.

Молекулярно-генетическое исследование. Для выбора п...

Мирошкина М.И., Корнеева И.Е., Бурменская О.В., Мишина Н.Д.