Экспрессия плацента-специфичных микроРНК при задержке роста плода

Цель. Проведение анализа экспрессии плацента-специфичных микроРНК у беременных с задержкой роста плода (ЗРП) и с физиологически протекающей беременностью.
Материалы и методы. В исследование включены 42 женщины в сроке гестации 30–34 недель
(27 с ЗРП и 15 с неосложненной беременностью), сопоставимые по возрасту, антропометрическим характеристикам, особенностям акушерско-гинекологического анамнеза и сопутствующим забо­леваниям. У всех беременных с ЗРП отмечались проявления фетоплацентарной недостаточности различной степени выраженности. Пациенткам был выполнен забор периферической венозной крови и определена экспрессия восьми микроРНК при помощи полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени (микроРНК-10b-5p, микроРНК-145-5р, микроРНК-122-5р, микроРНК-141-3р, микроРНК-125b-5р, микроРНК 205-5р, микроРНК-210-3р, микроРНК-517-5р). Оценку изменения уровня экспрессии микроРНК проводили с помощью ∆CТ метода.
Результаты. Установлено, что в крови беременных с ЗРП экспрессия микроРНК-125b-5p статистически значимо (р=0,011) ниже (12,3 (8,9; 3,8)), чем у женщин с физиологически протекающей беременностью (8,1 (6,6;9,1)). Степень изменения экспрессии (Fold change) для микроРНК-125b-5р составила 5,25.
Заключение. Полученные результаты свидетельствуют об изменении уровня экспрессии микроРНК-125b-5р у беременных с ЗРП по сравнению с женщинами, чья беременность протекает неосложненно. Роль микро РНК-125b-5р в генезе ЗРП можно объяснить способностью данной микроРНК влиять на эндотелий сосудов, включая сосудистую сеть плаценты, нарушая процессы эндотелий-зависимой релаксации, ангиогенеза, пролиферации эндотелиоцитов и другие функции, включая регуляцию адгезии и агрегации тромбоцитов.

Задержка роста плода (ЗРП) – это осложнение беременности, которое проявляется неспособностью плода достигнуть своего генетически детерминированного потенциала роста и сопряжено с риском неблагоприятных исходов для плода [1]. Этиологические факторы ЗРП можно разделить на причины, связанные со здоровьем матери (хронические экстрагенитальные заболевания, осложнения беременности, табакокурение и др.), с состоянием плода (хромосомные аберрации, внутриутробные инфекции, врожденные аномалии развития) и с нарушениями структуры и функции плаценты и пуповины. Именно на долю плацента-обусловленных состояний приходится наибольшее число случаев развития ЗРП [2].

МикроРНК относятся к семейству небольших некодирующих РНК (в среднем 18–25 нуклеотидов), которые регулируют экспрессию генов на посттранскрипционном уровне путем деградации или блокирования трансляции таргетной матриксной РНК (мРНК) [3]. Впервые описанные в 1993 г. как эндогенные медиаторы у C. elegans, сейчас микроРНК изучены более подробно; определена роль данного семейства РНК в клеточной дифференцировке, пролиферации, апоптозе, нормальном и патологическом развитии, поддержании гомеостаза [4].

Являясь модуляторами множества биологических процессов, микроРНК имеют широкий круг применения в клинической диагностике. Так, при многих заболеваниях и патологических состояниях достоверно установлено изменение активности микроРНК, играющее критическую роль в изменении экспрессии генов; особенно хорошо разработано это направление в онкологии [5]. МикроРНК могут служить ранними маркерами того или иного заболевания или осложнения, предикторами адекватного либо недостаточного ответа на лечебное воздействие, а в перспективе – могут получить применение в качестве самостоятельного терапевтического агента, действуя на причины заболевания на эпигенетическом уровне [6].

Ключевым моментом в понимании роли микроРНК является знание нормального профиля и уровня экспрессии этих биологических регуляторов в различных тканях. В основном микроРНК не обладают высоким уровнем тканеспецифичности; тем не менее, имеются данные о множестве различных микроРНК, экспрессия которых преобладает в определенных тканях [7, 8].

Вариабельность микроРНК в образцах различных тканей широко исследуется как в норме, так и при патологических изменениях.

Так как во многих случаях ЗРП обусловлена плацентарной недостаточностью, логично предположить, что те микроРНК, которые специфичны для плаценты, могут играть ключевую роль в развитии данного осложнения беременности, нарушая биологические процессы, необходимые для нормального развития и функционирования плаценты [9]. Плацента-специфичные микроРНК впервые были выделены в 2007 г. методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (ПЦР-РВ) [10, 11]. Они принимают участие в огромном числе необходимых функций, включая обеспечение иммунологической толерантности и ангиогенеза [12]. В настоящее время известно более 500 микроРНК, связанных с формированием и функционированием плаценты [13]. Предполагается, что изменение экспрессии микроРНК в трофобластах может быть ассоциировано с развитием плацентарной недостаточности и обусловленных ею осложнений беременности [11].

Итак, целью настоящего исследования было определение роли микроРНК в генезе ЗРП, вызван­ной плацентарной недостаточностью.

Материалы и методы

Формирование клинических групп пациентов

В исследование были включены беременные, наблюдающиеся в ГБУ Ростовской области «Перинатальный центр» (основная группа) и ООО «Клиника профессора Буштыревой» (контрольная группа) в 2017–2018 гг. Сформировано две группы: первую группу составили 27 пациенток, чья беременность осложнилась ЗРП, во вторую (контрольную) группу вошли 15 женщин с неосложненным течением беременности. Критериями исключения стали: наличие многоплодной беременности, врожденных пороков развития и хромосомных аберраций, индуцированная беременность (применение вспомогательных репродуктивных технологий).

Женщины, включенные в исследование, были сопоставимы по возрасту, исходному индексу массы тела, особенностям акушерско-гинекологического анамнеза и сопутствующим заболеваниям. Забор крови проводился с информированного добровольного согласия пациенток, однократно, в сопоставимые сроки: в первой группе анализ крови взят в 33,1 (32,4;33,6) недели беременности (Me (Q1;Q3)); во второй группе – в 32,9 (31,2...

Буштырева И.О., Кузнецова Н.Б., Забанова Е.А., Бутенко Е.В., Покудина И.О., Шкурат Т.П.