Герпесвирусы и вирус папилломы человека при раке предстательной железы: первые результаты

Введение. Доброкачественная гиперплазия предстательной железы (ДГПЖ) и рак предстательной железы (РПЖ) являются одними из самых распространенных урологических заболеваний у мужчин. Исследователями неоднократно высказывалось предположение о том, что не последнее место в канцерогенезе предстательной железы играет вирусная инфекция. Целью настоящей работы стала оценка взаимосвязи вирусной инфекции с РПЖ, а также клинико-морфологическими особенностями ДГПЖ и РПЖ.
Материалы и методы. В исследование были включены 98 пациентов, прооперированных по поводу ДГПЖ (n=48) или РПЖ (n=50) в период с 2019 по 2021 г. В полученных образцах операционного материала была проведена ПЦР в режиме реального времени на наличие вирусов папилломы человека (ВПЧ), вирусов простого герпеса 1-го и 2-го типов (HSV-1 и HSV-2), цитомегаловируса (CMV), вируса Эпштейна–Барр (EBV), вируса герпеса 6-го типа (HHV-6).
Результаты. Для пациентов с РПЖ была характерна большая частота выявляемости вирусов в ткани предстательной железы по сравнению с пациентами с ДГПЖ: 50,0 и 31,3% соответственно, р=0,046. Самым распространенным вирусом как при РПЖ, так и при ДГПЖ оказался EBV (22,0 и 16,7% соответственно). Вторым по частоте встречаемости вирусом у пациентов с РПЖ оказался HHV-6 (20,0%), который не был выявлен ни у одного пациента с ДГПЖ (р=0,003). Отмечалась тенденция более частого выявления CMV среди пациентов с РПЖ (16,0% для РПЖ и 4,2% для ДГПЖ), однако различия оказались статистически незначимыми при пограничных значениях р (р=0,09). Ассоциации вирусной инфекции с клинико-морфологическими особенностями выявлено не было.
Заключение. Полученная тенденция более частой встречаемости HHV-6 и CMV у пациентов с РПЖ по сравнению с пациентами с ДГПЖ создает предпосылки для дальнейшего исследования вирусов при заболеваниях предстательной железы с привлечением большей когорты пациентов, что позволит составлять представление о многоступенчатом процессе злокачественной трансформации и, возможно, откроет новые терапевтические возможности для профилактики и лечения.

Введение. Рак предстательной железы (РПЖ) является одним из наиболее часто встречающихся злокачественных новообразований у мужчин. Во всем мире РПЖ занимает второе место в структуре онкологической заболеваемости и шестое место в структуре онкологической смертности [1]. К факторам развития РПЖ относят естественное старение организма, генетическую предрасположенность, образ жизни и профессиональную вредность [2]. Учеными многократно высказывалось предположение о том, что не последнее место в канцерогенезе предстательной железы играет вирусная инфекция [3,4]. Наибольшую роль отводят таким вирусам, как вирус папилломы человека (ВПЧ, human papillomavirus – HPV), вирус простого герпеса 1-го и 2-го типов (Herpes simplex virus – HSV-1 и HSV-2), вирус герпеса 6-го типа (Human herpes virus – HHV-6), цитомегаловирус (Cytomegalovirus – CMV), вирус Эпштейна–Барр (Epstein–Barr virus – EBV) [5].

Герпесвирусы вовлечены в патогенез некоторых онкологических заболеваний, таких как рак шейки матки [6], рак желудка [7], рак мочевого пузыря [8,9], лимфопролиферативные заболевания [10]. Высказываются предположения относительно взаимосвязи герпесвирусов и РПЖ, однако данные, подтверждающие такую взаимосвязь, крайне ограниченны. Наличие HSV-2 ассоциировано с повышенным риском рака предстательной железы (ОШ=1,209; 95%ДИ=1,003–1,456), в то время как для HHV-8 аналогичной взаимосвязи обнаружено не было [11]. Наличие ВПЧ (без деления на типы) в ткани предстательной железы одними исследователями рассматривается как фактор, ассоциированный с повышенным риском канцерогенеза этого органа [12, 13], в то время как другие предполагают наличие такой взаимосвязи только для ВПЧ-16 [14, 15].

С учетом неоднозначности и ограниченности данных о взаимосвязи различных представителей семейства герпесвирусов и РПЖ нами было проведено собственное исследование, целью которого было оценить взаимосвязь вирусной инфекции с РПЖ, а также с клинико-морфологическими особенностями доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ДГПЖ) и РПЖ.

Материалы и методы. В настоящее исследование включены 98 пациентов, прооперированных по поводу ДГПЖ или РПЖ в период с 2019 по 2021 г. РПЖ на дооперационном этапе был подтвержден у всех пациентов путем патоморфологического исследования биопсийного материала. Пациентам с ДГПЖ (n=48) была выполнена трансуретральная резекция простаты (ТУРП), а пациентам из группы РПЖ (n=50) – лапароскопическая или робот-ассистированная радикальная простатэктомия. В полученных образцах операционного материала проведена ПЦР в режиме реального времени на наличие вирусов папилломы человека (ВПЧ), вирусов простого герпеса 1-го и 2-го типов (HSV-1 и HSV-2), цитомегаловируса (CMV), вируса Эпштейна–Барр (EBV), вируса герпеса 6-го типа (HHV-6).

Биологический материал

Для проведения ПЦР-исследования была использована нативная ткань предстательной железы, фрагменты которой размером 5х5х5 мм были отобраны в процессе патоморфологического исследования и помещены отдельно в криопробирки с 1 мл реагента IntactRNA (Евроген, Россия) –

фиксатор, предназначенный для быстрой стабилизации клеточных нуклеиновых кислот в тканях. Далее образцы были инкубированы в течение часа при комнатной температуре (согласно инструкции к реагенту), а затем были помещены в холодильник с температурой -70о по Цельсию. Непосредственно перед исследованием образцы ткани размораживались, фиксатор IntactRNA удалялся с помощью механического одноканального дозатора, после чего ткань гомогенизировалась в пробирках типа «Эппендорф» объемом 1,5мл с помощью одноразовых тефлоновых пестиков. Полученный гомогенизат незамедлительно использовался для выделения ДНК.

Выделение ДНК из образцов ткани

ДНК выделялась набором реагентов ExtractDNA Blood&Cells (Евроген, Россия) согласно инструкции к набору. Выявление ДНК ВПЧ проводилось с помощью набора для ПЦР «АмплиСенс® ВПЧ ВКР генотип-титр-FL» (ЦНИИ эпидемиологии, Россия); ДНК ВПГ1 и ВПГ2 проводилась с помощью набора для ПЦР «АмплиПрайм® HSV-I / HSV-II» (Некст Био, Россия); ДНК цитомегаловируса (ЦМВ), вируса Эпштейна–Барр (ЭБВ), вируса герпеса 6-го типа (ВГ-6) с помощью набора реагентов для ПЦР «АмплиПрайм® EBV/CMV/HHV6» (Некст Био, Россия).

Проводилась количественная ПЦР ДНК образцов тканей предстательной железы вместе с контрольными образцами. Несмотря на это, оценивалось присутствие и количество каждого из генотипо...

Михалева Л.М., Камалов А.А., Карпов В.К., Охоботов Д.А., Акопян Э.П., Шахпазян Н.К., Шапаров Б.М., Нестерова О.Ю., Мартиросян Л.К., Эхоян М.М., Османов О.А.