Клинико-лабораторная диагностика и исходы неиммунной водянки плода парвовирусной этиологии

Цель исследования. Анализ лабораторных критериев и клинико-эпидемиолоогических особенностей неиммунной водянки плода (НИВП) парвовирусной этиологии в Республике Беларусь.
Материалы и методы. В период 2012–2018 гг. исследован 51 случай НИВП для установления роли эритропарвовируса приматов 1 (Primate erythroparvovirus 1 – В19Р), ранее известного как парвовирус В19, в возникновении заболевания, и проведен эпидемиологический анализ лабораторно верифицированных случаев парвовирусной этиологии.
Результаты. Парвовирусная инфекция подтверждена в 12 (23,5%) случаях НИВП, средняя многолетняя заболеваемость составила 1,5 на 100 тыс. новорожденных. Основным методом диагностики было выявление ДНК В19Р в сыворотке крови беременных и разных видах биологического материала плода. Специфические IgM были выявлены у 5 (41,6%) женщин и ни у одного новорожденного. Ни у одной женщины не было эпизодов острой экзантемы в период беременности. В 8 из 12 случаев водянка плода обнаружена при проведении скринингового УЗИ, в остальных 4 – УЗИ в связи с ухудшением самочувствия беременной или появлением аритмии у плода. Основными проявлениями водянки были подкожный отек (83,3%), асцит (75,0%), гидроторакс и гидроперикард (по 58,3%). В 7 (58,3%) случаях парвовирусная инфекция привела к внутриутробной гибели плода (5 случаев) или новорожденного (2 случая).
Заключение. Парвовирусная инфекция является значимой причиной формирования НИВП и требует использования молекулярных методов для верификации диагноза. В большинстве случаев парвовирусная водянка плода имеет неблагоприятный исход.

Парвовирусная инфекция человека широко распространена во всем мире. Первичное инфицирование преимущественно происходит в детском возрасте, однако от 30 до 60% лиц детородного возраста все еще остаются восприимчивыми к ее возбудителю – эритропарвовирусу приматов 1 (В19Р), ранее известному как парвовирус В19 [1]. В Республике Беларусь к 20-летнему возрасту иммунно лишь 55% населения, к 45 годам их доля возрастает до 85%, что свидетельствует об активном вовлечении взрослых в эпидемический процесс парвовирусной инфекции и высоком риске инфицирования женщин в период беременности [2]. По данным литературы, в межэпидемический период уровень сероконверсии среди беременных составляет 1–3% [3], во время подъема заболеваемости он может возрастать до 17–18% [4, 5].

Впервые связь парвовирусной инфекции с развитием неиммунной водянки плода (НИВП) была установлена в 1984 г. В дальнейшем было показано, что заболевание женщины в период беременности может приводить также к спонтанным абортам, преждевременным родам, внутриутробной гибели плода (ВУГП), развитию фетальной анемии, гепатоспленомегалии, кардиомиопатии, тромбоцитопении, гипоальбуминемии, неврологи­ческим нарушениям [6, 7]. Риск развития водянки плода считается наибольшим при инфицировании женщины с 9-й по 20-ю нед. гестации, в дальнейшем он снижается и является минимальным в последние 2 мес. беременности. Практически все случаи парвовирусной водянки плода были выявлены между 16-й и 32-й нед. гестации [8, 9].

В Республике Беларусь диагностика парвовирусной инфекции у пациентов с НИВП была начата в 2012 г. на базе Республиканского научно-практического центра эпидемиологии и микробиологии (Минск). Настоящее исследование посвящено анализу лабораторных критериев и исходов НИВП парвовирусной этиологии.

Материалы и методы

В период с 2012 по 2018 г. проведено лабораторное исследование 51 случая НИВП для подтверждения или исключения парвовирусной инфекции: в 24 случаях были обследованы мать и новорожденный или плод, в 21 – только мать и в 6 – только новорожденный. В 44 случаях основанием для исследования послужило выявление признаков водянки плода при скрининговом или внеочередном УЗИ, в 6 – рождение ребенка с признаками водянки плода или ВУГП. Во всех случаях изоиммунизация по антигенам резус-фактора (иммунная водянка) была исключена до проведения обследования на парвовирусную инфекцию.

Материалом для исследования послужили сыворотка крови матери и новорожденного/плода, пуповинная кровь, околоплодные воды, асцитическая жидкость, материал аутопсии плаценты и внутренних органов плода.

IgM- и IgG-антитела к В19Р в сыворотке крови выявляли методом иммуноферментного анализа с использованием коммерческих наборов производства Institut Virion/Serion GmbH (Германия) в соответствии с протоколом производителя. ДНК выделяли из 200 мкл клинического образца с помощью набора QIAamp DNA Blood Mini Kit (Нидерланды). Амплификацию фрагмента генома В19Р проводили методом ПЦР в режиме реального времени с использованием коммерческих наборов производства ФБУН Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора (Россия) (2012–2015 гг.) и РНПЦ эпидемиологии и микробиологии (Беларусь) (2016–2018 гг.) с качественной оценкой результатов.

Статистическую обработку полученных данных проводили на персональном компьютере с использованием программы STATISTICA 10.0. Для описательной статистики рассчитывали медиану (Ме), 25-й и 75-й квартили (Р25 и Р75). Для анализа количественных переменных использовали критерий Манна–Уитни (U). Статистически значимым считали результат при р < 0,05.

Результаты

Лабораторная верификация парвовирусной инфекции при НИВП

В течение 2012–2018 гг. при лабораторном исследовании 51 случая НИВП парвовирусная инфекция была подтверждена в 12 (23,5%) из них. Во всех случаях инфицирование беременных В19Р было заподозрено только после выявления патологии плода, и лабораторное обследование было проведено незамедлительно. Вирусная ДНК была обнаружена в сыворотке крови всех 12 пациенток. Специфические сывороточные IgM-антитела выявлены у 5 (41,7%) из них (рис. 1).

Поскольку ни в одном случае время инфицирования женщины не было достоверно установлено, нельзя исключить, что в 7 случаях, когда IgM отсутствовали, период от инфицирования до обследования был достаточно длительным (более 4 нед.), что и привело к получению отрицательного результата. Подтверждением этого может служить единственный случай, когда время инфицирования можно предполагать с большой долей вероятности (женщина перенесла ОРЗ с артралгиями за 14 нед. до выявления водянки плода), и противовирусные IgM-антитела на момент обнаружения патологии плода у беременной отсутствовали. У всех 12 женщин были выявлены специфические IgG-антитела в концентрации от 20 до 160 МЕ/мл, что подтверждало перенесенную инфекцию.

Ермолович М.А., Артюшевская М.В., Леонова Е.Ю., Самойлович Е.О., Белуга М.В., Козлякова О.В.