Акушерство и Гинекология №8-2 / 2012

Патогенез снижения фертильности при аутоиммунных реакциях против сперматозоидов

1 декабря 2012

Цель исследования. Показать связь между аутоиммунными реакциями против сперматозоидов, их функциональными характеристиками и реальной фертильностью.
Материал и методы. Выполнено клинико-лабораторное обследование 425 мужчин из бесплодных пар в возрасте 18–45 лет; фертильные мужчины, жены которых были беременны на сроке 8–16 нед, составили контрольную группу (n=82). Исследование спермы проводили в соответствии с требованиями ВОЗ, применяли компьютерный анализ спермы (CASA). Определение антиспермальных антител (АСАТ) в сперме – MAR и проточная цитофлуорометрия, в сыворотке крови – ELISA. Спонтанную и индуцированную ионофором А23187 акросомальную реакцию (АР) – с помощью двойного флуоресцентного окрашивания сперматозоидов с использованием флуоресцин-изотиоционат-меченного лектина P. sativum и тетраметилродамин-изотиоцианат-меченого лектина A. hypogaea. Оценку оксидативного стресса (ОС) проводили методом люминолзависимой хемилюминесценции. Повреждение хромосом апределяли по фрагментации ДНК методом дисперсии хроматина в геле инертной агарозы с визуальной оценкой под микроскопом образования ореола после кислотной денатурации ДНК и лизирования протеинов ядра.
Результаты исследования. Снижение реальной фертильности пропорционально проценту MAR-позитивных сперматозоидов. Аутоиммунные реакции против сперматозоидов сопровождаются гиперпродукцией активных форм кислорода. Имеется положительная корреляция между результатами MAR-теста и трековой скоростью сперматозоидов, амплитудой колебания головки, процентом сперматозоидов с преждевременной и отсутствующей АР, процентом сперматозоидов с фрагментацией ДНК и степенью такой фрагментации.
Заключение. Ведущими факторами снижения фертильности у мужчин с АСАТ являются функциональные нарушения сперматозоидов: преждевременная гиперактивация, повышенная и/или отсутствующая АР и повышенная фрагментация ДНК. Патогенез патоспермии при иммунном бесплодии связан с ОС.

Одной из причин мужского бесплодия являются аутоиммунные реакции против сперматозоидов, которые сопровождаются выработкой антиспермальных антител – АСАТ [1]. В присутствии АСАТ происходит агглютинация и снижение подвижности сперматозоидов, нарушается проникновение в цервикальную слизь и оплодотворение яйцеклетки; имеются данные, что АСАТ могут оказывать отрицательное влияние на раннее развитие эмбриона, имплантацию и течение беременности [2–7]. Однако патогенез снижения фертильности и невынашивания беременности при наличии АСАТ все еще не ясен.

Цель исследования: показать связь между аутоиммунными реакциями против сперматозоидов, их функциональными характеристиками и реальной фертильностью.

Материал и методы исследования

Выполнено клинико-лабораторное обследование 425 мужчин из бесплодных пар в возрасте 18–45 лет; фертильные мужчины, жены которых были беременны на сроке 8–16 нед, составили контрольную группу (n=82).

Исследование спермы проводили в соответствии с требованиями ВОЗ [8]. Вычисляли индекс качества спермы (ИКС) – количество сперматозоидов с нормальной морфологией и прогрессивной подвижностью в эякуляте (млн/эякулят). Дополнительно оценивали подвижность сперматозоидов с помощью компьютерного спермоанализатора «MTG» (Medical Technology Vertriebs Gmbh, Германия), программы «medeaLAB CASA»: вычисляли криволинейную (трековую) скорость (VCL, мкм/сек), прямолинейную скорость (VSL, мкм/сек), амплитуду горизонтального перемещения головки (ALH, мкм/сек) и линейность (LIN, %). Определение АСАТ IgG и IgA на сперматозоидах осуществляли методом MAR (mixed antiglobulin reaction) (Ferti Pro N.V., Бельгия) и с помощью проточной цитофлуорометрии (ПЦМ) с использованием приборов Facscan (Becton Dickinson, США) и Bryte (Bio-Rad, Италия); в сыворотке крови – с использованием набора «Spermatozoa antibody ELISA» (IBL, Германия). На основании результатов MAR-теста выделяли группу пациентов с умеренно выраженными иммунными реакциями (MAR%IgG=10–49%) и группу с аутоиммунным бесплодием по ВОЗ (MAR%IgG>50%).

Для оценки спонтанной и индуцированной ионофором А23187 акросомальной реакции (АР) применяли способ двойного флуоресцентного окрашивания сперматозоидов с использованием флуоресцин-изотиоционат-меченного лектина P. sativum (Sigma, США) и тетраметилродамин-изотиоцианат-меченного лектина A. hypogaea (Sigma, США) [9]. Оценку оксидативного стресса (ОС) осуществляли путем определения интенсивности свободно-радикальных процессов методом люминолзависимой хемилюминесценции [10] с использованием люминометра «LKB-Wallac 1256» (Финляндия) и «Хемилюминометра-003» (Россия). Об интенсивности хемилюми...

Божедомов В.А., Николаева М.А., Ушакова И.В., Спориш Е.А., Рохликов И.М., Липатова Н.А., Сухих Г.Т.
Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.