Применение аллокина-альфа в лечении хронической герпесвирусной инфекции

Цель исследования. Оценка влияния терапии аллокином-альфа на уровень выделения копий ДНК вируса Эпштейна–Барр (ВЭБ) и вируса герпеса 6-го типа (ВГЧ-6) в образцах слюны, динамику продукции IFN-α и IFN-γ и динамику клинических жалоб больных с синдромом хронической усталости на фоне хронической ВЭБ- и ВГЧ-6-инфекции.
Материалы и методы. Обследовано 53 больных с синдромом хронической усталости на фоне хронической герпесвирусной инфекции (средний возраст – 34,51 ± 1,74 года). У всех пациентов определяли количество ДНК ВЭБ и ВГЧ-6 в образцах слюны методом полимеразной цепной реакции (ПЦР), содержание IFN-α и IFN-γ в сыворотке крови, а также спонтанную и индуцированную продукцию этих цитокинов в культуре лимфоцитов крови. Все больные получали терапию аллокином-альфа: 9 инъекций подкожно по 1,0 мг через день. Больные были разделены на 3 группы: в 1-ю вошли 26 больных с хронической ВЭБ-инфекцией, во 2-ю – 18 больных с сочетанной инфекцией ВЭБ + ВГЧ-6, в 3-ю – 9 больных с ВГЧ-6-инфекцией.
Результаты. После терапии аллокином-альфа в 1-й группе отрицательный результат ПЦР на наличие ДНК ВЭБ был получен у 57,69% больных, в 3-й результат у всех больных был положительным. Во 2-й группе отсутствие ДНК ВЭБ выявлено у 44,44% больных, ДНК ВГЧ-6 – у 5,55%. Во всех группах сывороточная и спонтанная продукция IFN-α достоверно не изменялась через месяц после терапии. Уровень индуцированного IFN-α имел тенденцию к снижению. Продукция IFN-γ во всех группах так же имела тенденцию к снижению. После окончания терапии отмечено достоверное уменьшение количества клинических жалоб больных во всех группах.
Заключение. Эффективность терапии аллокином-альфа различается у пациентов с хронической герпес­вирусной инфекцией и зависит от типа вируса. Наибольшая эффективность препарата выявлена у больных ВЭБ-инфекцией.

Герпесвирусы способны вызывать скрытые пожизненные инфекции. Механизм взаимодействия вирус–вирус при вирусной реактивации герпесвирусов или между ними представляет большой интерес. Вирус герпеса 6-го типа (ВГЧ-6) и вирус Эпштейна–Барр (ВЭБ) часто обнаруживаются одновременно. В L. Cuomo и соавт. показали, что ВГЧ-6, являясь преимущественно Т-лимфотропным вирусом, инфицирует некоторые ВЭБ-позитивные линии В-клеток и вызывает в них активацию литического цикла ВЭБ. Авторы продемонстрировали, что: к инфицированию способен вариант А ВГЧ-6, а инфицирование вариантом В ВГЧ-6 не индуцирует экспрессию антигенов ВЭБ; методом иммуноэлектронной микроскопии выявлено, что присутствие генома ВЭБ способствует восприимчивости линий B-клеток к инфекции ВГЧ-6, увеличивая участки связывания и процент инфицированных клеток; инфицированные ВГЧ-6 Т-клетки демонстрируют сильную трансактивацию промоторов ранних генов ВЭБ BZLF1 и BMRF1 [1]. ВГЧ-6 в 10 раз увеличивает экспрессию раннего гена Zebra, диффузных и ограниченных (85 кДа) ранних генов (EA-D и EA-R соответственно) в обеих ВЭБ-продуцирующих и непродуцирующих клеточных линиях (P3HR1, Akata и Raji). Экспрессия непосредственно раннего гена ВЭБ Zebra приводит к последующей репликации вируса. ВГЧ-6 активирует транскрипцию гена Zebra через циклический AMP-чувствительный элемент (CRE), расположенный в промоторе Zebra (Zp), а область ZII домена Zp является мишенью для трансактивации ВГЧ-6 [2]. Максимальная индукция раннего гена EA-D наблюдается через 72 ч после инфицирования ВГЧ-6. Также после инфицирования ВГЧ-6 в клетках-продуцентах ВЭБ (P3HR1 и Akata) увеличивается экспрессия поздних продуктов гена ВЭБ, а именно вирусного капсидного антигена (125 кДа) и гликопротеина вирусной мембраны gp350. Было обнаружено, что большинство клеток, экспрессирующих гликопротеин вирусной мембраны gp350, также являются положительными для антигенов ВГЧ-6. Это свидетельствует о прямом влиянии репликации ВГЧ-6 на индукцию репликативного цикла ВЭБ. После инфицирования клеток Raji ВГЧ-6 не было выявлено экспрессии поздних генов ВЭБ, что свидетельствует об отсутствии функциональной комплементации между удаленной формой ВЭБ и суперинфекцией ВГЧ-6. Ультрафиолетовое облучение или инактивация высокой температурой ВГЧ-6 приводят к тому, что вирус не активирует экспрессию гена Zebra или EA-D в клетках Raji. L. Flamand и соавт. [3], установили, что ВГЧ-6, являясь лимфотропным герпесвирусом человека, может активировать репликацию ВЭБ и таким образом способствует развитию патогенеза заболеваний, связанных с ВЭБ. После инфекционного мононуклеоза может развиваться синдром постинфекционной хронической усталости, который встречается более чем в 60% случаев, сопровождающихся постоянной активацией инфекции ВГЧ-6. При проведении серологического скрининга 215 случаев острого инфекционного мононуклеоза была выявлена инфекция ВГЧ-6: у 15,3% больных – первичная, у 29,3% – активная инфекция или реактивация ВГЧ-6 и у 33,9% – латентная. Двойная активная инфекция ВЭБ и ВГЧ-6, включая первичные и реактивированные формы, встречалась в 39,5% случаев [4]. Примерно в 1% случаев ДНК ВГЧ-6 ковалентно интегрирована в субтеломерную область клеточных хромосом [5].

Интерфероны (IFN) представляют собой мультигенное семейство индуцибельных цитокинов, обладающих противовирусной активностью. Фундаментальный компонент противовирусного ответа хозяина – активация IFN I типа (IFN-α и IFN-β), который является мощным противовирусным цитокином и модулятором адаптивного иммунитета. Продукция IFN I типа индуцируется вирусной инфекцией и приводит к продукции широкого спектра противовирусных белков и иммуноактивных цитокинов. IFN-α и IFN-β продуцируются вирус-инфицированными клетками и отвечают за инициацию первичного ответа на вирусную инфекцию. IFN-α продуцируется в основном плазмоцитоидными дендритными клетками (pDCs) [6], IFN-β – различными типами клеток, включая эпителиальные и эндотелиальные клетки, фибробласты, моноциты/макрофаги и B-клетки [7]. Индукция IFN – строго регулируемый процесс, который контролируют регулирующие факторы IFN (IRF – interferon regulatory factor). Наибольшую роль в индукции IFN I типа играют IRF3 и IRF7. IRF3 конститутивно экспрессируется всеми типами клеток, тогда как экспрессию IRF7 индуцируют IFN I типа. Для длительного эффективного сохранения инфекции внутри клеток хозяина вирусы разработали множество механизмов, которые специфически нацелены на клеточные IRF, индукцию IFN и пути передачи сигналов, индуцируемых IFN [8]. IFN-γ продуцируется клетками иммунной системы, которые участвуют в раннем иммунном ответе (натуральные киллеры T-клетки и γ/δ-клетки), а также клетками иммунной системы, активированными во время адаптивных реакций (Th1 и CD8+) [9]. IFN-γ стимулирует врожденный клеточный иммунитет через NK-клетки и специфический цитотоксический иммунитет на основе распознавания связанных с клеточной поверхностью вирусных антигенов, экспрессируемых в ассоциации с белками главного комплекса гистосовместимости. Также I...

Ракитянская И.А., Рябова Т.С., Калашникова А.А.