Эпидемиология и Инфекционные болезни. Актуальные вопросы №4 / 2014
Сравнительный анализ частоты встречаемости маркеров герпесвирусных инфекций в клинических материалах у детей с различными инфекционными патологиями
1 НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского Минздрава России, Москва; 2 Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова Минздрава России, Москва
Цель исследования. Определение частоты встречаемости маркеров инфекций, вызванных цитомегаловирусом (ЦМВ), вирусом Эпштейна–Барр (ВЭБ) и вирусом герпеса человека 6-го типа (ВГЧ-6), у часто и длительно болеющих детей, анализ вирусной нагрузки и оценка влияния герпесвирусов человека (ГВЧ) на тяжесть состояния детей.
Материалы и методы. Обследовано 108 детей, средний возраст – 2,8 ± 2,5 года. Антитела IgM и IgG определяли методом ИФА в плазме крови. ДНК ЦМВ, ВЭБ и ВГЧ-6 выявляли в цельной крови, моче и слюне. Для статистической обработки использовали программу STATISTICA 6,0.
Результаты. У 72,2% госпитализированных детей обнаружены маркеры герпесвирусных инфекций. Активная форма ЦМВ- и ВЭБ-инфекций и реактивация ВЭБ-инфекции встречались чаще, чем латенция. ДНК ГВЧ в моче обнаруживали реже, чем в слюне и крови (11% против 31,2 и 28,3% соответственно; р < 0,05). У детей с поражениями центральной нервной системы вирусная нагрузка ГВЧ была выше, чем у детей с ОРЗ и рецидивирующим обструктивным бронхитом. Осложнения основного заболевания в 95,8% наблюдений ассоциировались с обнаружением ДНК ГВЧ. При тяжелой форме основного заболевания частота и вирусная нагрузка ЦМВ были выше, чем при среднетяжелой и легкой формах заболевания (р < 0,05).
Заключение. В план обследования часто и длительно болеющих детей с тяжелой формой заболевания необходимо включать определение вирусной нагрузки ГВЧ. При выявлении активной формы инфекции и высоких концентраций ГВЧ можно рекомендовать проведение противовирусной терапии.
Часто болеющие дети являются одной из актуальных проблем современной педиатрии. По определению национальной научно-практической программы «Острые респираторные заболевания (ОРЗ) у детей: лечение и профилактика» (2002), «часто болеющие дети»(ЧБД) – это не диагноз, а группа диспансерного наблюдения, включающая детей с частыми респираторными инфекциями, возникающими из-за транзиторных корригируемых отклонений в защитных системах организма, и не имеющих стойких органических нарушений в них. Повышенная восприимчивость к респираторным инфекциям у ЧБД не связана со стойкими врожденными и наследственными патологическими состояниями». Сегодня, по мнению как отечественных, так и зарубежных авторов, к ЧБД, или детям с рекуррентной респираторной инфекцией, принято относить лиц с частотой ОРЗ от 8 до 12 раз в год [1–3].
В последнее время все больше внимания уделяется герпесвирусным инфекциям (ГВИ), их роли в формировании группы ЧБД и тяжелых форм инфекционных болезней за счет способности к персистенции вирусов в организме, в том числе в иммунокомпетентных клетках [4, 5]. Данные о значении коинфекций как факторов, влияющих на тяжесть основного заболевания, противоречивы. Представители семейства Herpesviridae широко распространены в человеческой популяции. В настоящее время известно 8 герпесвирусов, вызывающих заболевания человека. Большинство герпесвирусов человека (ГВЧ) у здоровых иммунокомпетентных людей находится в латентном состоянии, но при снижении иммунитета под действием различных факторов они могут реактивироваться и вызывать заболевания различной степени тяжести и/или осложнять течение основного заболевания [6]. Многие вопросы, связанные с ролью вируса Эпштейна–Барр (ВЭБ), цитомегаловируса (ЦМВ) и вируса герпеса человека 6-го типа (ВГЧ-6) при инфекционных заболеваниях у детей раннего возраста, остаются недостаточно изученными.
Цель настоящей работы – определение частоты встречаемости маркеров ГВИ у часто и длительно болеющих детей, количественный анализ вирусной нагрузки в клинических материалах и оценка влияния ГВЧ на тяжесть состояния детей.
Материалы и методы
Обследовано 108 детей в возрасте от 1 мес. до 12 лет (средний возраст 2,8 ± 2,5 года), поступивших для лечения в 2011–2013 гг. в Морозовскую детскую городскую клиническую больницу и Инфекционную клиническую больницу № 1 Департамента здравоохранения города Москвы с клиническими диагнозами: лимфаденопатия (29), ОРЗ и рецидивирующий обструктивный бронхит (22), инфекционный мононуклеоз (18), пневмония (12), рецидивирующий отит (11), менингит и менингоэнцефалит (9), цитопения (7).
От каждого пациента собирали по 5 мл крови в пробирки, часть образца центрифугировали при 2000 об/мин в течение 15 мин («Joane», Франция) и отбирали плазму для анализа антител (АТ), другую часть использовали для выделения ДНК ГВЧ. Образцы мочи центрифугировали при 2000 об/мин в течение 15 мин и осадок отбирали для дальнейших исследований. Образцы слюны собирали внутри ротовой полости аппликаторами. Все образцы доставляли в день забора в лабораторию и хранили при -70 0С до исследования.
АТ к ЦМВ и к ВЭБ классов IgM и IgG, а также АТ класса IgG к ВГЧ-6 определяли методом ИФА в плазме крови с использованием тест-систем «ВектоЦМВ-IgM», «ВектоЦМВ-IgG», «ВектоВЭБ-VCA-IgM», «ВектоВЭБ-NA-IgG» и «ВектоHHV-6-IgG» («Вектор-Бест», Россия).
ДНК ГВЧ определяли в цельной крови, моче и слюне. Выделение и амплификацию ДНК проводили с помощью наборов фирмы «Интерлабсервис» (Россия). Для выделения ДНК использовали набор реагентов «ДНК-сорб-В». ПЦР с детекцией в режиме реального времени проводили с помощью набора «АмплиСенс® EBV/CMV/HHV6-скрин-FL». Для амплификации использовали термоцикл...
