Сравнительный анализ липидного профиля крови и фолликулярной жидкости женщин, проходящих лечение бесплодия методами вспомогательных репродуктивных технологий

Актуальность: На развитие ооцитов, оплодотворение и раннее дробление эмбриона влияет состав фолликулярной жидкости (ФЖ), поэтому данные о молекулярном составе ФЖ могут способствовать лучшему пониманию механизмов оогенеза и факторов, влияющих на него. Крайне перспективным представляется изучение липидного профиля ФЖ в качестве дополнительного маркера оценки качества ооцитов. Однако забор ФЖ является инвазивной манипуляцией, поэтому представляет интерес поиск косвенных источников информации о составе ФЖ. 
Цель: Сравнительный анализ липидного профиля плазмы крови и ФЖ женщин в программах лечения бесплодия методами вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ).
Материалы и методы: В исследование были включены 40 супружеских пар, обратившихся за лечением бесплодия методом ВРТ, в возрасте от 24 до 39 лет с нормальным индексом массы тела (до 25 кг/м2). Пациенткам, включенным в исследование, была выполнена овариальная стимуляция по протоколу с антагонистами гонадотропин-рилизинг-гормона. В день пункции был проведен забор ФЖ и плазмы крови с последующей криоконсервацией. Молекулярный состав образцов определяли с помощью жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием. 
Результаты: Определен липидный состав ФЖ и плазмы крови (175 и 185 липидов соответственно), среди выявленных молекул в ФЖ и плазме крови совпадают 70 липидов. Уровни 42 из них статистически значимо коррелируют. При анализе корреляции уровней липидов в плазме крови и ФЖ из левого и правого яичников было выявлено 25 липидов, уровни которых в плазме статистически значимо коррелируют с уровнями в ФЖ из левого яичника, и 40 липидов со значимой корреляцией – из правого яичника. Корреляция уровней между ФЖ из левого и правого яичников всех 175 идентифицированных липидов была статистически значимой.
Заключение: Выявленные сходства и отличия липидома плазмы крови и ФЖ могут быть использованы для поиска методов неинвазивной оценки состояния ооцитов, а также прогнозирования эффективности проведения программ ВРТ. На основании полученных результатов возможны не только индивидуализация и персонификация лечения бесплодия и подготовки к программам ВРТ, но и более глубокое понимание механизмов нарушения созревания ооцитов и причин низкой частоты фертилизации.

Вклад авторов: Макарова Н.П., Чаговец В.В., Франкевич В.Е., Калинина Е.А. – концепция и дизайн исследования; Фортыгина Ю.А., Новоселова А.В., Гамисония А.М., Чаговец В.В. – сбор и обработка материала, статистическая обработка данных; Фортыгина Ю.А., Драпкина Ю.С. – написание текста статьи; Калинина Е.А., Макарова Н.П. – редактирование.
Конфликт интересов: Авторы заявляют об отсутствии возможных конфликтов интересов.
Финансирование: Работа проведена без привлечения дополнительного финансирования со стороны третьих лиц.
Одобрение Этического комитета: Исследование было одобрено локальным Этическим комитетом ФГБУ 
«НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России.
Согласие пациентов на публикацию: Пациенты подписали информированное согласие на публикацию своих данных.
Обмен исследовательскими данными: Данные, подтверждающие выводы этого исследования, доступны по запросу у автора, ответственного за переписку, после одобрения ведущим исследователем.
Для цитирования: Фортыгина Ю.А., Макарова Н.П., Драпкина Ю.С., Новоселова А.В., Гамисония А.М., Чаговец В.В., Франкевич В.Е., Калинина Е.А. Сравнительный анализ липидного профиля крови и фолликулярной жидкости женщин, проходящих лечение бесплодия методами вспомогательных репродуктивных технологий.
Акушерство и гинекология. 2024; 4: 93-102
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2024.62

Несмотря на широкое применение и развитие современных научных достижений в программах вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), эффективность лечения бесплодия методом экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) остается ограниченной и не превышает 30–40% [1]. При проведении программ ВРТ примерно у 15% перспективных в отношении наступления беременности супружеских пар отмечаются низкая частота оплодотворения ооцитов, арест эмбрионов на разных этапах дробления и получение эмбрионов неудовлетворительного качества [2]. Более того, у 70% супружеских пар при переносе эмбриона, соответствующего хорошему/отличному качеству согласно морфологическим критериям оценки, беременность не наступает при удовлетворительных показателях эндометрия в день переноса. Учитывая, что при переносе эуплоидного эмбриона частота беременности в программах ВРТ в значительной степени возрастает, в структуре наиболее частых причин повторных неудач имплантации следует выделить качество самого эмбриона [3]. В связи с этим наиболее перспективные научные исследования в области ВРТ сконцентрированы на разработке стратегии по улучшению качества гамет, а также условий культивирования эмбриона. Кроме этого, актуальным представляется изучение неинвазивных или малоинвазивных предикторов качества гамет, позволяющих прогнозировать не только качество получаемого эмбриона до начала овариальной стимуляции, но и эффективность лечения бесплодия методом ВРТ [4].

Известно, что на развитие ооцитов, оплодотворение и раннее дробление эмбриона влияет состав фолликулярной жидкости (ФЖ), который обеспечивает микроокружение, содержащее множество питательных веществ. ФЖ содержит микроэлементы и молекулы, окружающие и питающие ооцит, а также постоянно реагирующие на изменения, происходящие в интрафолликулярной среде [5]. Состав ФЖ влияет не только на созревание ооцитов, но и активирует ядерное и цитоплазматическое ооцитарное созревание, обеспечивает ооцит энергией для возобновления мейотического созревания, необходимого для формирования пронуклеусов после оплодотворения и дальнейшего потенциала к развитию [6]. С другой стороны, ооцит в созревающем фолликуле также секретирует различные факторы роста, обеспечивая постоянный баланс состава ФЖ. Одними из молекул, принимающими активное участие в обеспечении клеток источником энергии, а также участвующими в формировании основного структурного компонента плазматических мембран, сигнальных молекул и регуляторов белков, являются липиды. Было показано, что липопротеиды высокой плотности в ФЖ могут выполнять защитную роль, а также уменьшать фрагментацию ооцитов [7]. В настоящее время проведены исследования липидного профиля ФЖ при различных видах протоколов стимуляции [8, 9]. Результаты исследований показали, что определенный липидный состав положительно коррелирует с имплантацией эмбриона в программах ВРТ [6, 10]. Кроме этого, в литературе описаны изменения липидного состава ФЖ при эндометриозе [11], синдроме поликистозных яичников [12] и у пациенток старшего репродуктивного возраста [5, 13]. Изучение липидного профиля ФЖ в качестве дополнительного маркера оценки качества ооцитов представляется крайне перспективным и позволяет определить причину низкой частоты оплодотворения и получения эмбриона неудовлетворительного качества в программах ВРТ у пациенток с множественными неудачными попытками ЭКО в анамнезе. Особый интерес представляют исследования по прогнозированию качества ооцита до проведения программ овариальной стимуляции при помощи изучения липидного профиля плазмы крови. Núnez Calonge R. et al. показали, что липидный профиль крови может отражать липидный состав ФЖ и выступать маркером овариального ответа на стимуляцию [14].

Исследования всего набора липидов в тканях и плазме крови очень ограничены. Скрининг целого класса веществ, в том числе липидов, является основной прерогативой метода масс-спектрометрии. Учитывая, что разработка тест-системы по прогнозированию качества ооцитов, полученных во время овариальной стимуляции, при помощи изучения липидного профиля плазмы крови является крайне перспективной и актуальной задачей, цель данного исследования заключалась в анализе липидного профиля плазмы крови в зависимости от липидома ФЖ и определении потенциальных групп липидов, которые могут коррелировать с качеством ооцита.

Материалы и методы

В исследование были включены 40 супружеских пар в возрасте от 24 до 39 лет и с нормальным индексом массы тела (до 25 кг/м2), обратившихся за лечением бесплодия методом ВРТ в отделение вспомогательных технологий в лечении бесплодия им. проф. Б.В. Леонова. От каждой пары было получено письменное добровольное информированное согласие на участие в данном исследовании и обработку персональных данных. Критериями включения в исследование явились: бесплодие, обусловленное трубно-перитонеальным фактором, мужским фактором (без выраженной патозооспермии), а также сохраненный овариальный резерв. Критериями исключения послужили: аномалии строения матки, аномалии кариотипа...

Фортыгина Ю.А., Макарова Н.П., Драпкина Ю.С., Новоселова А.В., Гамисония А.М., Чаговец В.В., Франкевич В.Е., Калинина Е.А.