Возможности липидомного анализа семенной плазмы в прогнозировании успеха microTESE у мужчин с азооспермией

Цель исследования: оценка возможности метаболомного, в частности липидомного, анализа семенной плазмы для выявления пациентов с остаточным очаговым сперматогенезом в яичках, которые могут иметь разумные шансы на извлечение сперматозоидов при процедуре microTESE. Материалы и методы. Исследованы образцы семенной плазмы 64 мужчин с азооспермией и 24 фертильных мужчин, составивших контрольную группу, на липидомный состав. Из эякулята были выделены липиды модифицированным методом экстракции Фолча. Липидные экстракты и образцы контроля качества анализировали на жидкостном хроматографе Dionex UltiMate 3000. Данные липидомного анализа были сопоставлены с результатами процедуры microTESE.
Результаты. При сравнении показателей контрольной группы и группы пациентов с азооспермией выбрано 23 липида в режиме положительных ионов и 37 липидов в режиме отрицательных ионов, содержание которых в группах статистически значимо различалось. Липиды относятся преимущественно к классам (гексозил)церамидов, сфингомиелинов и фосфотидилхолинов, фосфотидилэтаноламинов и их простых эфиров. При многофакторном анализе статистически значимым предиктором обнаружения сперматозоидов при microTESE оказались содержание липида SM d16:1/18:0 [β-коэффициент: -7,23 (95% доверительный интервал [95% ДИ] от -11,93 до -2,53); отношения шансов [ОШ]: 7,23e-04 (95% ДИ от 6,59e-06 до 7,93e-02); критерий Вальда: -3,02; p=0,003, содержание липида TG 14:1_16:0_18:3 (β-коэффициент – 2,95 [95% ДИ от 0,98 до 4,93]; ОШ:1,92e+01 (95% ДИ от 2,66e+00 до 1,39e+02); критерий Вальда: 2,93; p=0,003, и объем яичек (β-коэффициент: 0,14 (95% ДИ от 0,04 до 2,45); ОШ: 1,15e+00 (95% ДИ от 1,04e+00 до 1,27e+00);
критерий Вальда: 2,65; p=0,008]. Чувствительность данной регрессионной модели составила 61%, специфичность – 83%, а показатель AUC – 0,75.
Выводы: семенная плазма служит богатым источником биологических маркеров для выявления пациентов с остаточным очаговым сперматогенезом в яичках. Липидомный профиль семенной плазмы пациентов контрольной группы с нормальным сперматогенезом имеет явные отличия от профиля пациентов с азооспермией, также выявлена разница содержания липидов между пациентами с положительными и отрицательными исходами microTESE. Это предварительные результаты, и необходимы дальнейшие исследования, чтобы подтвердить достоверность полученной панели липидов.

Введение. Бесплодием страдают около 15% пар во всем мире и почти половина случаев связана с мужским фактором [1–4]. Несмотря на развитие методов лечения, многие вопросы, особенно связанные с лечением мужского бесплодия, остаются без ответа. Мужское бесплодие считается сложным заболеванием и имеет множество причин, начиная от генетических мутаций и заканчивая образом жизни, сопутствующими заболеваниями или приемом лекарств. Некоторые причины мужского бесплодия до сих пор неизвестны, и бесплодие неясного генеза было классифицировано как идиопатическое мужское бесплодие [3–5]. Применение новых генетических, протеомных и метаболомных технологий и выявление новых биологических маркеров открывают перспективы для диагностики и лечения мужского бесплодия [6–9].

Биомаркер определяется как типичный биологический маркер процесса или состояния, который может быть независимо рассчитан, оценен и изучен [10]. Соответствующий биомаркер должен быть легко выявляем на ранней стадии, а методика его получения неинвазивной [4, 11]. В нашем исследовании изучается метаболом, в частности липидом, семенной плазмы с целью классификации специфических биомаркеров для более точной диагностики мужского бесплодия. Метаболомика – это исследование клеток, тканей или биологических жидкостей путем оценки их метаболитов [12, 13]. Метаболиты являются конечным результатом клеточных регуляторных процессов; ряд метаболитов, созданных системой клеток, составляtт ее «метаболом» [14–16]. Было показано, что оценка уровней метаболитов очень важна из-за регулирующего действия метаболитов как частей биохимических путей, особенно с точки зрения их применения в качестве диагностических маркеров некоторых заболеваний [17]. Липидомика – это исследование липидного профиля (липидома) в клетке, ткани или организме. Липидомику также можно рассматривать как ветвь метаболомики, которая представляет собой качественную и количественную оценку основных классов метаболитов в данном образце [18].

Цель исследования: оценка возможности метаболомного, в частности липидомного, анализа семенной плазмы для выявления пациентов с остаточным очаговым сперматогенезом в яичках, которые могут иметь разумные шансы на извлечение сперматозоидов при процедуре microTESE.

Материалы и методы. В работе использованы образцы семенной плазмы 64 мужчин с азооспермией и 24 фертильных мужчин, составивших контрольную группу. Пациенты с азооспермией были обследованы в отделении андрологии и урологии Национального медицинского исследовательского центра акушерства, гинекологии и перинатологии им. В. Кулакова (Москва, Россия) с января 2019 по февраль 2021 г. Исследование одобрено этическим комитетом Первого МГМУ им. И. М. Сеченова. Все пациенты дали письменное согласие на участие в исследовании.

Критерии включения в исследование: азооспермия (подтвержденная не менее 2 раз с помощью микроскопического анализа), подписанна...

С.И. Гамидов, Т.В. Шатылко, А.Х. Тамбиев, А.О. Токарева, В.В. Чаговец, Т.Б. Бицоев, Н.Л. Стародубцева, А.Ю. Попова, В.Е. Франкевич