Актуальные аспекты лабораторной диагностики паразитарных болезней

Цель исследования. Определение диагностической ценности методов лабораторной диагностики паразитозов, актуальных для юга России.
Материалы и методы. Для верификации паразитарной инвазии у 1500 больных клиники инфекционных и паразитарных болезней ФБУН «Ростовский НИИ микробиологии и паразитологии» Роспотребнадзора применяли методы лабораторной диагностики, регламентированные МУК 4.2.3145-13 «Лабораторная диагностика гельминтозов и протозоозов» и МУ 3.2.1173-02 «Серологические методы лабораторной диагностики паразитарных заболеваний».
Результаты. Среди пациентов, обратившихся в клинику с направительным диагнозом «глистная инвазия», паразитарные болезни были выявлены у 58,5%. Чаще регистрировали энтеробиоз (35,5%), эхинококкоз (18,7%), токсокароз (15,5%), тениаринхоз (5,8%). Наиболее эффективный метод диагностики энтеробиоза – трехкратное исследование материала из перианальных складок, позволившее выявить яйца остриц у 91,7% больных. Постоянными лабораторными признаками токсокароза являлись эозинофилия периферической крови и положительный результат ИФА с токсокарозным антигеном. Наблюдение в динамике показало, что через месяц после проведенной этиотропной терапии у 65,0% больных увеличились титры антител в 2 и более раз при снижении эозинофилии и нормализации показателей периферической крови.У 9 (42,9%) больных эхинококкозом до хирургического лечения регистрировали отрицательные результаты ИФА с эхинококкозным антигеном, а через месяц после оперативного вмешательства отрицательный результат ИФА получен только у 4 (19,1%) пациентов. У 5 больных имел место высокий риск развития рецидива за счет диссеминации личинок при оперативном лечении. Диагноз «тениаринхоз» устанавливали на основании результатов паразитоскопического исследования члеников гельминта до и после антигельминтной терапии. У 62,5% больных яйца тениид были обнаружены по результатам исследования материала перианального соскоба.
Заключение. Одним из важных факторов оптимизации диагностики паразитарных болезней является выбор метода и кратности обследования, а также параллельное применение всех прямых и иммунологических методов лабораторной и инструментальной верификации диагноза.

В практической медицине с каждым годом возрастает роль лабораторной диагностики как одного из основных методов верификации диагноза и инструмента мониторинга эффективности проводимой терапии. До настоящего времени «золотым стандартом» диагностики большинства паразитарных болезней является паразитоскопическое исследование: макроскопическое исследование паразитов или их фрагментов, микроскопия биологических сред с использованием специальных методов исследования материала [1]. Убеди­тельным подтверждением диагноза ларвального гельминтоза может служить обнаружение возбудителя при микроскопии биоптатов (мышц плеча или голени при трихинеллезе; печени, легких при токсокарозе). Но этот, несомненно, самый достоверный метод мало приемлем из-за своей травматичности и потенциальной опасности при проведении. Альтернативой паразитоскопическим методикам при диагностике тканевых гельминтозов стали иммунологические методы, наиболее популярным из которых является иммуноферментный анализ (ИФА) для обнаружения специфических иммуноглобулинов разных классов к возбудителям паразитозов. По сравнению с другими методами детекции антигенов и антител он обладает рядом преимуществ, которые обусловили его широкое применение во всех областях медицины. Однако при интерпретации результатов ИФА следует принимать во внимание такие естественные ограничения данного метода, как генетическая неоднородность населения, наличие лиц с низким уровнем антитело­­образования на антигены паразита или же перекрестные реакции с антигенами человека и возбудителя, а также длительно циркулирующие анамнестические антитела, сформировавшиеся вследствие ранее перенесенной инвазии [2]. Неверная интерпретация результатов ИФА нередко приводит к их ошибочной трактовке и необоснованному назначению терапии.

Целью исследования явилось определение диагностической значимости существующих методов верификации гельминтозов для оптимизации их лабораторной диагностики.

Материалы и методы

За период 2013–2016 гг. в клинике инфекционных и паразитарных болезней ФБУН «Ростовский НИИ микробиологии и паразитологии» Роспотреб­надзора был проведен анализ 1500 медицинских карт стационарных больных. Для верификации диагноза паразитарной инвазии всем больным параллельно назначали паразитоскопические и серологические исследования, обследование прово­дили многократно с применением специальных методов лабораторной диагностики. Использовали стандартные методики, рекомендованные суще­ст­вующими нормативно-методическими доку­мен­тами: метод нативного и окрашенного мазков, метод эфир-формалиновой седиментации, метод обогащения по Берману в разных модификациях, метод исследования материала из перианальных складок. Для иммунологического обследования пациентов клиники использовали диагностические тест-системы «Токсокара-IgG-ИФА-БЕСТ», «Эхи­но­кокк-IgG-ИФА-БЕСТ», «Описторхоз-IgG-ИФА-БЕСТ», «Опи­сторхоз-IgМ-ИФА-БЕСТ» (ЗАО «Век­тор-Бест», Кольцово, Россия) Исследования сывороток крови проводили методом ИФА в соот­ветствии с инструкциями к тест-системам и руковод­ствуясь МУК 3.2.1173-02 «Серологические методы лабораторной диагностики паразитарных заболе­ва­ний». Статистическую обработку полу­ченных данных производили с помощью программы SPSS Statistics 23.0. В соответствии с характером исследуемых показателей и задачами исследования использовали бинарную логистическую регрессию (ROC-анализ), коэффициент корреляции Пирсона.

Результаты

В структуре паразитарных инвазий преобладал энтеробиоз (35,5% пациентов). Больные эхино­коккозом различных локализаций, множест­венным, рецидивным и резидуальным составили 15,9%, пациенты с токсокарозом – 12,2%. Доля пациентов с другими паразитарными болезнями была значительно меньше (рис. 1).

У 27 (4,3%) больных отмечалась сочетанная инвазия: энтеробиоз и аскаридоз, энтеробиоз и дифиллоботриоз, энтеро­­биоз и лямблиоз, энтеробиоз и токсокароз, эхино­­коккоз и дикроцелиоз, дифиллоботриоз и описторхоз.

При однократном исследовании материала из перианальных складок пациентов яйца остриц выявляли у 56,1% больных, при двукратном – у 81,9%, при трехкратном – у 91,9%. У 18 (8,1%) пациентов диагноз был установлен клинически по факту обнаружения в кале остриц. Прирост относительного чис...

Головченко Н.В., Ермакова Л.А., Твердо­хлебова Т.И., Пшеничная Н.Ю., Гопа­ца Г.В., Журавлев А.С.