Анализ экспрессии генов MGP, UMOD, SPP1, F2, FN1, HAVCR1, ассоциированных с развитием уролитиаза, у пациентов с мочекаменной болезнью

Введение. Совершенствование молекулярно-генетических методов диагностики полигенных форм уролитиаза – актуальная задача урологии.
Цель исследования. Изучить относительный уровень экспрессии генов MGP, UMOD, SPP1, F2, FN1, HAVCR1, ассоциированных с формированием МКБ, и количество кодируемых ими белков (Gla-белок, протромбин, фибронектин, остеопонтин, уромодулин и TIM-1-белок) у пациентов с уролитиазом.
Материал и методы. Обследованы 49 человек: 45 пациентов с уролитиазом и 4 человека из группы контроля, средний возраст – 67±12 лет. Контролем были здоровые добровольцы. Из периферической венозной крови выделяли иРНК; методом ОТ-ПЦР-РВ переводили в кДНК и детектировали относительный уровень экспрессии исследуемых генов.
Результаты. По уровню экспрессии генов MGP, UMOD, SPP1, F2, FN1, HAVCR1 в крови выделены четкие хиатусы между значениями в группе контроля и у пациентов с уролитиазом, при этом не выявлены хиатусы по количественному содержанию их белковых продуктов, как в крови, так и моче.
Вывод. В крови при относительном уровне экспрессии гена MGP выше 10%, F2 выше 0,5%, FN1 выше 0,2%, UMOD выше 0,04%, SPP1 выше 0,001%. HAVCR1 выше 0,01% можно прогнозировать уролитиаз. Указанные значения уровней экспрессии генов MGP, UMOD, SPP1, F2, FN1, HAVCR1 в крови позволяют надежно выявлять пациентов с уролитиазом по сравнению с количественным содержанием белковых продуктов этих генов в крови и моче.

Введение. Мочекаменная болезнь (МКБ), или уролитиаз, занимает одно из ведущих мест среди всех урологических заболеваний [1–3], ее частота составляет 15–25%. Распространенность МКБ на 100 тыс. населения в России составляет: у детей – 19–20, у подростков – 80–82, у взрослых – 450–460, в 65–70% случаев болезнь диагностируют у лиц в возрасте 20–25 лет, т.е. в наиболее трудоспособном периоде жизни [4, 5]. Причины возникновения МКБ могут быть как экзогенными, так и эндогенными, что подтверждает полиэтиологичность заболевания. Среди эндогенных факторов выделяют генетические, врожденные и приобретенные в процессе жизни человека [6]. Пациенты с МКБ склонны к повторному образованию камней после оперативных вмешательств и даже в короткий период наблюдения имеют большой процент возникновения рецидива [7].

В России и за рубежом диагностике и профилактике МКБ в последнее время уделяется много внимания. Стремительное развитие методик профилактики и диагностики МКБ привело к изменению структуры оперативных вмешательств, а именно максимальному переходу к малоинвазивным хирургическим вмешательствам (эндоскопическим и лапароскопическим технологиям), так как даже минимальное воздействие на паренхиму почки сопровождается ее повреждением, изменениями воспалительного характера и ишемией, приводящей к нарушениям функциональной активности [8, 9].

В настоящее время известно довольно много способов диагностики уролитиаза. Наиболее распространены способы диагностики по количественному анализу маркеров (цитрата, оксалата, мочевой кислоты (ураты), креатинина, аммония, калия, натрия, магния, кальция, хлорида, сульфата, фосфата) методом капиллярного электрофореза с УФ-детектированием [10]. Другие способы диагностики уролитиаза основаны на определении количества маркера ранних стадий МКБ – белка Тамма–Хорсфалла в моче методом иммуноферментного анализа (ИФА) [11, 12]. Известен способ диагностики, разграничивающий обследуемых не только на группы больных МКБ и здоровых, но и группу риска развития МКБ [13], а также диагностика уролитиаза по количеству белка с использованием ИК-спектроскопии [14].

Наибольшую актуальность приобретают молекулярно-генетические методы диагностики МКБ. С генетической точки зрения выделяют моногенно и полигенно обусловленные формы МКБ [15–17]. Описано более 80 моногенных форм, которые точно диагностируются по конкретному дефекту в определенном гене [18]. Для полигенных форм актуально совершенствование молекулярно-генетического подхода, например, использование полногеномного анализа ассоциаций (genome-wide association study, GWAS), выявляющего однонуклеотидные полиморфизмы (single nucleotide polymorphism, SNP), ассоциированные с их формированием. Такие SNP обычно имеют гены, продукты которых вовлечены в патогенетический процесс при МКБ: MGP, UMOD, SPP1, F2, FN1, HAVCR1, кодирующие маркеры воспаления и фиброза фагоцитарного звеньев иммунитета и цитокинового профиля при МКБ [19–26]. Ранее относительный уровень экспрессии данных генов в крови у пациентов с МКБ не исследовали, измеряли только содержание их белковых продуктов методом ИФА.

Цель исследования: изучить относительный уровень экспрессии генов MGP, UMOD, SPP1, F2, FN1, HAVCR1, ассоциированных с формированием МКБ, и количес...

Хотько Д.Н., Полуконова Н.В., Пылаев Т.Е., Веретенников С.С., Бучарская А.Б., Попков В.М., Хотько А.И., Тарасенко А.И., Алтынбаев Р.Р.