Динамика растворимых форм молекул клеточной адгезии при преэклампсии

Цель исследования.  Изучение динамики содержания растворимых форм молекул клеточной адгезии (МКА)  — sICAM-1, sVCAM-1, sL-селектина и sE-селектина в сыворотке крови женщин в течение физиологической беременности и беременности, осложненной преэклампсией различной степени тяжести.
Материал и методы. Под наблюдением находились 53 пациентки с 8-й по 41-ю неделю беременности, протекающей с осложнениями, и 73 беременные с физиологическим течением гестационного периода и родов, сопоставимые по возрасту, числу беременностей и родов в анамнезе.
Определение растворимых форм МКА (sE-селектина, sL-селектина, sICAM-1 и sVCAM-1) в сыворотке крови беременных осуществляли с помощью иммуноферментного анализа (ELISA) с использованием стандартных тест-систем фирмы Bender MedSystems GmbH (Австрия).
Результаты исследования. При преэклампсии наблюдается выраженный дисбаланс в содержании МКА. Отклонения в содержании sICAM-1 и sVCAM-1 в крови пациенток с высоким риском развития преэклампсии могут быть маркерными для прогнозирования развития преэклампсии в течение всей беременности, а отклонения в содержании sL-селектина — на ранних сроках.
Заключение. Чувствительность и специфичность данных тестов являются достаточными для прогнозирования развития преэклампсии уже на ранних сроках беременности. При превышении содержания в крови определенных пороговых концентраций МКА с вероятностью более 80% можно предполагать развитие преэклампсии у пациенток из группы высокого риска. В случае усугубления тяжести течения преэклампсии исследование крови на содержание указанных МКА позволит в комплексе с другими специфическими исследованиями прогнозировать риск развития перинатальных осложнений.

Формирование межклеточных контактов (адгезия клеток) играет важную роль на всех этапах репродуктивного цикла (оплодотворение, имплантация, плацентация, гисто- и органогенез) и осуществляется с участием молекул клеточной адгезии (МКА) [11]. МКА — сложные трансмембранные белки, не только обеспечивающие механическое взаимодействие клеток с соседними клетками или элементами межклеточного матрикса, но и участвующие в процессах межклеточной сигнализации. Все МКА объединяются в настоящее время в пять семейств структурно и функционально родственных молекул [2, 8]. Все классы МКА широко представлены на клетках иммунной и репродуктивной систем [7, 18, 20].

Изменение экспрессии МКА, а также содержания растворимых форм МКА в кровотоке и других биологических жидкостях лежит в основе и усугубляет течение многих заболеваний, в том числе и связанных с патологией репродукции [6, 19, 21]. Одно из самых тяжелых и распространенных осложнений беременности — преэклампсия. Считается, что ее причиной является несовершенная адаптация сосудистой системы и неспособность организма матери адекватно обеспечить потребности развивающегося плода. Это выражается в целом ряде функциональных нарушений, которые в тяжелых случаях могут приводить к органическим поражениям органов и тканей матери и плода, в том числе к эндотелиальной дисфункции [4, 5]. Преэклампсия рассматривается и как синдром системного воспалительного ответа [3, 12].

Молекулы адгезии активно исследуются в качестве возможных маркеров для прогноза и диагностики преэклампсии [10, 14, 16]. Однако в целом данные о появлении в крови растворимых форм МКА весьма ограниченны.

Целью настоящего исследования явилось изучение динамики содержания растворимых форм МКА — sICAM-1, sVCAM-1, sL-селектина и sE-селектина в сыворотке крови женщин в течение физиологической беременности и беременности, осложненной преэклампсией различной степени тяжести.

Материал и методы исследования

Всего проспективно обследовано 126 беременных в различные сроки гестационного периода. Пациентки наблюдались с ранних сроков беременности до родов. Пробы крови для анализа растворимых форм МКА брали несколько раз в течение беременности в интервалах 8–13, 14–20, 21–26, 27–31, 32–36, 37–41 нед. Количество обследованных пациенток в указанных интервалах представлено в табл. 1.

Контрольную группу составили 73 беременные с физиологическим течением беременности и родов. В основную группу включены 53 пациентки с 8-й по 41-ю неделю беременности, протекающей с осложнениями. Из них 8 беременных в І триместре беременности (8–13 нед) с клиническими проявлениями токсикоза І триместра и угрозой прерывания. У 2 женщин произошел выкидыш на сроке 13–14 нед, у 3 — в дальнейшем развилась преэклампсия тяжелой степени. У остальных женщин основной группы во II и III триместрах беременности в различные гестационные сроки также был поставлен диагноз преэклампсии средней и тяжелой степени. Оценку степени тяжести преэклампсии проводили согласно Международной классификации болезней 9-го пересмотра [14]. По возрасту, числу беременностей и родов в анамнезе контрольная группа и группа пациенток с преэклампсией были сопоставимы.

Образцы крови у пациенток брали из локтевой вены. Сыворотку получали стандартным способом: образцы отстаивали при комнатной температуре до образования сгустка, центрифугировали при 3000 об/мин, надосадок помещали в пробирку типа Эппендорф и хранили при температуре -80°С.

Определение растворимых форм МКА (sE-селектин, sL-селектин, sICAM-1 и sVCAM-1) в сыворотке крови осуществляли методом иммуноферментного анализа (ELISA) с использованием стандартных тест-систем фирмы Bender MedSystems GmbH (Австрия). Оптическую плотность измеряли с помощью планшетного ридера BioTek (США) при длине волны 450 нм. Построение калибровочного графика и расчет концентраций sE-селектина, sL-селектина, sICAM-1 и sVCAM-1 производили по уравнениям линейной регрессии в логарифмических координатах.

Статистическую обработку данных проводили по общепринятым методам вариационной статистики. Значимость наблюдаемых отклонений оценивали с помощью t-критерия Стьюдента.

Результаты исследования и обсуждение

Результаты определения концентрации растворимых форм МКА (sE-селектин, sL-селектин, sICAM-1 и sVCAM-1) в сыворотке крови пациенток с физиологическим течением беременности и беременностью, осложненной преэклампсией, представлены на рис. 1.

Динамика растворимых форм МКА при физиологической беременности

При физиологическом течении беременности содержание растворимой формы sICAM-1 (рис. 1, а) колебалось незначительно. Так, в І триместре концентрация sICAM-1 в сыворотке крови составила 3327±627 нг/мл. Далее наблюдалась тенденция к некоторому снижению к 21–26-й неделе беременности. К 27–31-й неделе ...

Зиганшина М.М., Кречетова Л.В., Ванько Л.В., Культербаева М.А., Соколян А.В., Сухих Г.Т.