Эффекты антимикробного пептида из лактоферрина в сыворотке крови и моче пациентов с почечной коликой при уролитиазе и пиелонефрите

Цель работы: оценить роль лактоферрина и лактоферрицина в сыворотке крови и моче пациентов с приступом почечной колики на фоне МКБ и пиелонефрита. Материалы и методы. Обследованы 149 пациентов, поступивших в урологическое отделение ГБУЗ АО ГКБ № 3 Астрахани по экстренным показаниям с приступом почечной колики. Наряду со стандартными клиническими, лабораторно-инструментальными методами исследования (общий анализ крови, биохимический анализ крови, общий анализ мочи, ультрасонография почек) у всех пациентов в крови и моче измеряли концентрацию СРБ и лактоферрина с помощью набора реагентов для ИФА (Лактоферрин «Вектор-Бест», Новосибирск). Чувствительность теста на СРБ и ЛФ составила 3–5 мкг/мл и 5 нг/мл соответственно. Исследования всего собранного материала на лактоферрицин производились отсроченно в лаборатории Астраханского ГМУ. На основании результатов клинического и инструментального исследованиий пациенты, поступившие с приступом почечной колики, были ретроспективно распределены на три группы: в первую вошли 38 больных МКБ. Во вторую – 64 пациента с обструктивным пиелонефритом, в третью – 47 пациентов, госпитализированных в стационар с характерными признаками первичного необструктивного пиелонефрита. Группы были сопоставимыми по полу и возрасту. Контролем служили образцы крови и мочи 25 доноров. Результаты. При сопоставлении группы пациентов с МКБ с группой пациентов с необструктивным и обструктивным пиелонефритом установлены высокодостоверные различия (р<0,0001) по ЛФ, ЛФЦ, СРБ и количеству лейкоцитов в крови и осадке мочи. В моче по результатам ROC-анализа в парах МКБ без пиелонефрита по сравнению с обструктивным пиелонефритом установлены самые значимые различия для всех четырех изученных показателей: для ЛФ (AUC=0,823), для ЛФЦ (AUC=0,832), для СРБ (AUC=0,829), и количеству лейкоцитов в осадке мочи (AUC=0,780). Обсуждение. В крови и моче при МКБ и пиелонефрите сопоставлены эффекты бактерицидного пептида ЛФЦ с уровнями в биологических жидкостях СРБ, ЛФ и количества лейкоцитов. Установлено наибольшее диагностическое значение всех четырех изученных показателей в моче, а не в сыворотке ROC-анализа. Подтвердили более существенное влияние изученных показателей на пиелонефрит, чем на мочекаменную болезнь. Уровень лактоферрина и СРБ у пациентов при поступлении коррелирует с количеством лейкоцитов в крови и осадке моче и со степенью воспалительного процесса в организме. А уровень пептида ЛФЦ в моче отражает степень инфицирования мочевыводящих путей. Выводы. Проведено сравнительное изучение тестов на ЛФ и ЛФЦ в сыворотке крови и моче пациентов, поступивших в урологический стационар с приступом почечной колики. Определение концентрации лактоферрицин в моче является информативным показателем. Таким образом, лактоферрин и продукт его гидролиза лактоферрицин отражают различные стороны инфекционно-воспалительного процесса при пиелонефрите.

Введение. Пиелонефрит очень часто сопровождает мочекаменную болезнь, доброкачественную гиперплазию простаты, аномалии развития мочеполовых органов и другие урологические заболевания. Наоборот, у массы пациентов с уролитиазом, нуждающихся в неотложной урологической помощи, наблюдаются почечная колика или вторичный пиелонефрит. Несмотря на многообразие методов лечения и лекарственных средств, количество острых пиелонефритов и рецидивов хронического пиелонефрита увеличивается [1–3]. По данным исследователей Европейской ассоциации по контролю и мониторингу резистентности к антибактериальным препаратам в первом десятилетии XXI в. в европейских странах, устойчивость Escherichia coli к антибиотикам группы цефалоспоринов третьего поколения и пенициллинов при урологической инфекции повысилась до критической величины 15–25% [4].

Кроме того, за последние годы изменилась и сама клиническая картина пиелонефрита, проявивавшаяся в более частом выявлении малосимптомных форм болезни, несмотря на выраженные воспалительно-деструктивные изменения в органах мочевыделительной системы (МВС). В связи с этим в качестве альтернативы или дополнения к антибиотикам повышенный интерес представляют антимикробные пептиды (АМП), прежде всего те, которые синтезируются лейкоцитами или эпителиальными клетками МВС [5]. Некоторые из АМП, например α-дефензин, уже находят применение в дифференциальной диагностике: он обнаруживается в моче при пиелонефрите, но не у пациентов с гломерулонефритом [6, 7]. Доказано, что и активированные нейтрофилы, и эпителиоциты в моче секретируют такие АМП, как лактоферрин, липокалин, кателицидин, αи β-дефенсины и др. [8, 9].

Лактоферрин (ЛФ) – железосвязывающий транспортный белок, который является одним из компонентов иммунной системы организма [10]. Кроме того, ЛФ, синтезируемый во вторичных гранулах нейтрофилов, выполняет важную роль в антимикробной защите [11, 12]. На сегодняшний день установлены антимикробные свойства ЛФ в отношении Streptococcus mutans, Escherichia coli, Candida, Toxoplasma gondii [13]. Также ЛФ продуцируется эпителием мочеполового тракта начиная от дистальных отделов собирательных канальцев почек. Нормальное содержание ЛФ в моче колеблется от 14 до 145 нг/мл [14].

Среди различных механизмов ингибирования бактериального роста с помощью лактоферрина есть и вариант конкурирования с бактериями за атомы железа, и влияние белка на структуру клеточной мембраны бактерий, и самостоятельный антимикробный эффект короткого положительно заряженного N-концевого участка полипептидной цепи ЛФ, получившего имя лактоферрицин (ЛФЦ) [15–17]. По литературным данным, антимикробный механизм ЛФЦ во многом сравним с эффектом других АМП животного происхождения (дефенсины, протегрины или бактеницин) [9]. В других экспериментах по сравнению антимикробной активности ЛФЦ и ЛФ пептид продемонстрировал более высокую активность даже в отношении штаммов Staphylococcus aureus или Klebsiella pneumoniae, устойчивых к антибиотикам, что свидетельствует о важности дальнейших исследований в данном направлении [16, 17].

Следовательно, любые исследования, касающиеся антимикробных пептидов как нового класса индикаторов инфицирования мочевыделительной системы, актуальны и несут эффект новизны. А бактерицидный пептид лактоферрицин в данной статье исследуется как дополнительный критерий в дифференциальной диагностике пиелонефрита.

Цель данной работы – оценить роль лактоферрина и лактоферрицина в сыворотке крови и моче пациентов с приступом почечной колики на фоне МКБ и пиелонефрита.

Материалы и методы. Обследованы 149 пациентов урологического отделения ГБУЗ АО ГКБ № 3 Астрахани, поступивших по экстренным показаниям с приступом почечной колики. На основании результатов ста...

А.А. Серебряков, В.М. Мирошников, А.В. Коханов, А.О. Догадина, К.Н. Мехтиев