Экспериментальное изучение эффективности препарата афалаза в условиях хронического асептического воспаления предстательной железы

01.02.2013
Просмотров: 1704

1 ООО НПФ “Материа Медика Холдинг”, 2 ФГБУ НИИ фармакологии СО РАМН, Москва

В экспериментальном исследовании была оценена эффективность препарата афалаза (смесь аффинно очищенных антител к ПСА и эндотелиальной NO-синтазе) по сравнению с экстрактом Serenoa repens в модели абактериального хронического простатита у крыс линии Вистар, вызванного прошиванием тканей предстательной железы шелковой нитью. Крысам (n=13 в каждой группе), кроме животных интактной группы, через 1 мес. после операции в течение 45 дней внутрижелудочно вводили дистиллированную воду (10 мл/кг), афалазу (в дозах 5; 7,5 и 10 мл/кг) или экстракт Serenoa repens (50 мг/кг). После окончания введения определили массу, объем, весовой коэффициент простаты и провели гистологическое исследование. Через 2,5 мес. после операции в контрольной группе наблюдали развитие хронического абактериального простатита. Было отмечено достоверное увеличение массы, весового коэффициента и объема простаты по сравнению с интактной группой. При введении как экстракта Serenoa repens, так и афалазы данные параметры достоверно не отличались от контрольных значений. Введение крысам экстракта Serenoa repens предотвращало развитие атрофических и замедляло развитие склеротических процессов. Введение афалазы во всех изучаемых дозировках препятствовало развитию склеротических изменений, а в дозе 7,5 мл/кг предотвращало развитие атрофических процессов, по эффективности не уступавшее экстракту Serenoa repens. Принимая во внимание высокую безопасность афалазы, препарат является перспективным средством лечения хронического простатита.

Введение. Простатит – распространенное заболевание, существенно снижающее качество жизни пациента [1]. Вероятность развития простатита у мужчин в возрасте 20–40 лет превышает 35% [2], причем за медицинской помощью обращаются не более 60% больных [1, 3].

По сводным данным Американской ассоциации урологов, самым распространенным видом простатита
является хронический (ХП), который диагностируют у 35—98% мужчин репродуктивного возраста. Согласно современной классификации Национального института здоровья (NIH) США, выделяют два типа ХП: бактериальный и абактериальный, последний также называют синдромом хронической тазовой боли, и он может иметь как воспалительную, так и невоспалительную природу [4, 5].

Помимо боли и чувства дискомфорта в области таза, органов мочеполовой системы, прямой кишки, частых позывов на мочеиспускание на фоне простатита часто развивается физический и эмоциональный стресс [6, 7]; кроме того, лечение данного заболевания требует серьезных финансовых затрат [6].

В патогенезе ХП важная роль отводится простатспецифическому антигену (ПСА) [8]. Как известно, ПСА
принадлежит к группе сериновых протеаз, продуцируется главным образом клетками железистого эпителия простаты и секретируется в семенную жидкость. Ферментативная активность ПСА направлена на поддержание вязкости секрета простаты и регуляцию факторов роста в тканях железы. ПСА разжижает эякулят, тем самым увеличивая подвижность сперматозоидов, что положительно сказывается на фертильности мужчины. При заболеваниях простаты, сопровождающихся повреждением базальной мембраны (простатит, аденома, рак простаты), ПСА может проникать через
гистогематический барьер и в значительных количествах попадать в системный кровоток [9].

Проблема лечения ХП и сексуальных нарушений уже давно привлекает внимание специалистов и является предметом широкой дискуссии [10]. Исследователи сходятся во мнении, что ХП часто
сопряжен с эректильной дисфункцией (ЭД), причем как ЭД отрицательно сказывается на течении ХП и
затрудняет его лечение, так и ХП усугубляет тяжесть ЭД [11, 12]. Несмотря на наличие массы лекарственных средств, распространенность заболеваний предстательной железы возрастает [13], делая как никогда актуальным поиск эффективных средств лечения ХП.

Афала® (аффинно очищенные антитела к ПСА, ООО НПФ “Материа Медика Холдинг”) используется
в качестве лечения аденомы предстательной железы и ХП с 2001 г. Эффективность препарата подтверждена в ряде экспериментальных и клинических исследований, в которых было показано, что препарат оказывает противовоспалительное, обезболивающее и антипролиферативное действия [14–16].

Известно, что при заболеваниях предстательной железы, например при раке, аденоме простаты,
наблюдается изменение экспрессии и функциональной активности NO-синтазы [17, 18], которая является биологической мишенью импазы.

Препарат импаза® (аффинно очищенные антитела к эндотелиальной NO-синтазе, ООО НПФ “Материа
Медика Холдинг”) известен как средство лечения ЭД. Импаза повышает активность эндотелиальной
NO-синтазы, восстанавливает выработку эндотелием оксида азота (NO) при сексуальной стимуляции, увеличивает содержание в гладких мышцах циклического гуанозинмонофосфата (цГМФ) и способствует их расслаблению, что приводит к увеличению кровенаполнения пещеристых тел, росту интракавернозного давления (увеличению длины пениса в разные фазы копулятивного цикла) и обеспечивает достаточную по силе и продолжительности эрекцию [14].

В различных исследовательских центрах РФ получены клинические данные по эффективности импазы
при ЭД у пациентов с ХП [19—21].

К настоящему времени имеются данные о совместном приеме афалы и импазы в лечении больных с расстройствами мочеиспускания, в том числе показана клиническая эффективность их совместного применения в лечении больных аденомой простаты в сочетании с ЭД [22]. На фоне приема препаратов было отмечено значимое уменьшение выраженности симптомов аденомы простаты, повышение качества жизни пациентов, уменьшение количества остаточной мочи, восстановление эректильной функции и улучшение мочеиспускания. Полученные данные позволяют говорить о наличии синергического эффекта, наблюдаемого при совместном применении афалы и импазы. Импаза усиливает антипролиферативную и противовоспалительную активность афалы за счет эндотелиопротективного действия и улучшения васкуляризации. Следует отметить, что прием комбинированного препарата способствует не только нормализации функционального состояния предстательной железы и уменьшению воспаления в ней, но и устранению нарушений сексуальной функции, что выгодно отличает препарат от других лекарственных средств, используемых в лечении больных с заболеваниями простаты.

С учетом успешного применения в клинической практике на протяжении многих лет афалы и импазы, а также их синергетического действия был предложен новый комплексный препарат, афалаза® (смесь аффинно очищенных антител к ПСА и эндотелиальной NO-синтазе, ООО “НПФ “Материа Медика Холдинг”), для лечения аденомы простаты и ХП.

Целью данного экспериментального исследования явилось изучение эффективности афалазы в условиях хронического асептического воспаления предстательной железы у крыс.

Материалы и методы. Эксперименты проведены на 78 крысах-самцах линии Вистар (4 мес., 320–450 г).
Простатит моделировали прошиванием передней доли простаты животных шелковой нитью под наркозом (тиопентал в дозе 60 мг/кг внутрибрюшинно) [23, 24]. В качестве препарата сравнения использован экстракт Serenoa repens (простамол Уно®, “Берлин-Хеми АГ/Менарине Групп”; Германия), который в настоящее время является одним из широко используемых препаратов лечения хронического абактериального простатита [25]. Дозы и схема введения афалазы и экстракта Serenoa repens были выбраны на основании данных предыдущих исследований афалы [26], импазы [27] и
Serenoa repens [28].

Пяти группам крыс (по 13 крыс в каждой) через 1 мес. после операции в течение 45 дней в желудок вводили исследуемые препараты: дистиллированную воду (10 мл/кг, контроль), афалазу в трех дозах (5; 7,5 и 10 мл/кг) или экстракт Serenoa repens (50 мг/кг). Одна группа животных (n=13) служила интактным контролем. Через 2,5 мес. животных взвешивали, забивали (методом дислокации шейных позвонков), вскрывали и препарировали прошитую переднюю долю предстательной железы. Определяли ее массу, вычисляли весовой коэффициент, (отношение массы органа [в мг] к массе
тела крысы [в г]), объем и плотность железы. Часть экспериментального материала была взята для гистологического исследования (не менее 5 крыс из каждой группы), при этом вентральную долю предстательной железы фиксировали в жидкости Карнуа и заливали в парафин. Депарафинированные срезы толщиной 5 мкм окрашивали гематоксилином и эозином и по Ван–Гизону [29]. С помощью компьютерного графического анализа на стандартной площади гистологического среза на препаратах, окрашенных гематоксилином и эозином, измеряли площадь эпителия ацинусов (ПЭА)
и площадь просвета ацинусов (ППА); на препаратах, окрашенных по Ван–Гизону, – площадь коллагеновых волокон (ПКВ) в соединительнотканных прослойках.

Результаты. Через 2,5 мес. после прошивания предстательной железы шелковой нитью наблюдали развитие хронического (абактериального) простатита. Масса передней доли железы, ее весовой коэффициент, плотность были достоверно выше, чем в интактной группе (p<0,05). Объем передней доли простаты в контроле не отличался от такового интактных животных (табл. 1). При морфологическом исследовании отмечено расширение и полнокровие сосудов железы, наличие лимфоцитарно-макрофагального инфильтрата. В тканях предстательной железы наблюдалось увеличение относительной ПКВ в 3,1 раза по сравнению с интактной группой (р<0,05), что свидетельствует об интенсивном развитии склеротических процессов. Кроме того, выявлена тенденция к уменьшению относительной ПЭА на 14% (р>0,05 по сравнению с интактной группой), что указывает на развитие атрофических процессов (табл. 2).

Введение крысам-самцам как афалазы, так и экстракта Serenoa repens не приводило к достоверным изменениям массы простаты, весового коэффициента, объема и плотности простаты по сравнению с контрольной группой (см. табл. 1). В то же время плотность простаты снижалась. Последнее, очевидно, можно объяснить менее выраженным отеком и меньшей лимфоидной инфильтрацией.

Таблица 1. Влияние исследуемых препаратов на массу, весовой коэффициент, объем и плотность простаты (M±m).

Таблица 2. Влияние исследуемых препаратов на морфометрические показатели предстательной железы крыс (M±m).

В группе животных, получавших экстракт Serenoa repens, наблюдали снижение относительной ПКВ на
22,4% (р<0,05), однако данный показатель оставался повышенным по сравнению с интактной группой.
При введении афалазы в дозах 5; 7,5 и 10 мл/кг также отмечено снижение относительной ПКВ на 53, 53 и 44,6% соответственно (р<0,05 по сравнению с контролем) (см. табл. 2), причем статистически значимого различия с фоновыми значениями не выявлено. Полученные данные свидетельствуют о том, что афалаза во всех исследуемых дозах обладает способностью тормозить развитие склеротических процессов.

Кроме того, в группах крыс, получавших афалазу в дозе 7,5 мл/кг и экстракт Serenoa repens, отмечена тенденция к повышению относительной ПЭА на 12,7 и 23,1% соответственно (р>0,05). Необходимо отметить, что значения относительной ПЭА в указанных группах достоверно не отличались от показателей интактных животных.

При определении относительной ППА было установлено, что почти во всех экспериментальных группах этот показатель не отличался от контрольных и фоновых значений (см. табл. 2). Исключение составили крысы, получавшие афалазу в дозе 10 мл/кг, у которых ППА простаты статистически значимо превышала фоновые значения.

Обсуждение. Через 2,5 мес. после прошивания передней доли предстательной железы шелковой нитью в группе контроля отмечено развитие хронического воспалительного процесса, характеризующегося отеком, гиперемией, образованием лимфоидно-макрофагального инфильтрата, разрастанием коллагеновых волокон (склероз), появлением признаков атрофии эпителия ацинусов. При введении крысам-самцам как экстракта Serenoa repens, так и афалазы не было выявлено достоверных отличий от контрольных значений в массе, весовом коэффициенте и объеме простаты. Полученные результаты согласуются с данными литературы по доклиническим и клиническим наблюдениям применения экстракта Serenoa repens [30, 31], в которых было также показано, что прием препаратов, содержащих экстракт Serenoa repens, не приводит к статистически значимому
уменьшению объема предстательной железы при ХП.

Вместе с тем введение афалазы в трех исследуемых дозах (5; 7,5 и 10 мл/кг) и экстракта Serenoa repens (50 мг/кг) препятствовало развитию склеротических процессов, при этом было выявлено снижение относительной ПКВ и как следствие – увеличение относительной ППА. Следует отметить, что по антисклеротическому действию афалаза превосходила препарат сравнения.

Одной из основных причин увеличения относительной ППА при введении афалазы (доза 10 мл/ кг)
и экстракта Serenoa repens, судя по данным морфологического исследования, по-видимому, является способность препарата препятствовать развитию склеротических процессов. Хотя нельзя исключать и стимулирующего влияния афалазы в этой дозе на секреторную активность предстательной железы.

С точки зрения интегральной оценки влияния исследуемого препарата на железу оптимальной является доза 7,5 мл/кг. Афалаза в данной дозе предотвращала развитие атрофических процессов в простате, по эффективности не уступая экстракту Serenoa repens.

Следует также отметить, что афалаза оказалась эффективнее афалы (6 мл/кг) [24], экспериментальная оценка эффективности которой проведена в аналогичных условиях хронического асептического воспаления предстательной железы у крыс. При введении афалы относительная ПЭА достоверно возрастала на 15,6% по сравнению с контролем, но не достигала уровня интактных животных, тогда как при введении афалазы данный показатель не отличался от значений в интактной
группе. Кроме того, афала лишь задерживала развитие склеротических процессов, в то время как афалаза препятствовала склерозированию ткани.

Заключение. Полученные в ходе настоящего исследования данные подтверждают эффективность комплексного препарата афалаза в модели экспериментального абактериального хронического простатита. Принимая во внимание высокую безопасность афалазы (на настоящий момент имеются данные полного токсикологического исследования), препарат является перспективным средством лечения ХП.

Список литературы

1. Liang C.Z., Li H.J., Wang Z.P. et al. Treatment of chronic prostatitis in Chinese men // Asian J Androl 2009;11:153–156.
2. Пушкарь Д.Ю. Сегал А.С. Хронический абактериальный простатит: современное понимание проблемы. Врачебное сословие. 2004;5-6:10–11.
3. Nickel J.C., Downey J., Hunter D. et al. Prevalence of prostatitis-like symptoms in a population based study using the National Institutes of Health chronic prostatitis symptom index. J. Urol. 2001;165:842–
845.
4. Krieger J.N., Nyberg L. Jr., Nickel J.C. NIH consensus definition and classification of prostatitis. JAMA. 1999;282:236–237.
5. Эрлих Н., Мюллерад М., Хазанова В. Воспаление предстательной железы и хронические тазовые боли: диагностика и лечение. Урология. 2009;1:81–84.
6. Calhoun E.A., McNaughton Collins M., Pontari M.A. et al. The economic impact of chronic prostatitis. Arch. Intern. Med. 2004;164(11):1231–1236.
7. Turner J.A., Ciol M.A., Von Korff M. et al. Health concerns of patients with nonbacterial prostatitis/pelvic pain. Arch. Intern. Med. 2005;165:1054–1059.
8. Ponniah S., Arah I., Alexander R.B. PSA is a candidate self-antigen in autoimmune chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndrome. Prostate. 2000;44(1):49–54
9. Malm J., Hellman J., Hogg P. et al. Enzymatic action of prostate-specific antigen (PSA or hK3): substrate specificity and regulation by Zn(2+), a tight-binding inhibitor. Prostate. 2000;45(2):132–139.
10. Аляев Ю.Г., Винаров А.З., Ахвледиани Н.Д. Хронический простатит и сексуальные нарушения. Пленум Правления Российского общества урологов. Материалы. Саратов, 8–10 июня 2004 г. С. 169–177.
11. Газымов М.М., Ефимов Л.П., Смирнова Е.Ю. Влияние психосоматического состояния на качество жизни больных хроническим простатитом. Материалы Правления Российского общества урологов. Саратов, 8–10 июня 2004 г. С. 232.
12. Неймарк А.И., Яценко O.K. Хронический неинфекционный простатит. Правления Российского общества урологов. Материалы. Саратов, 8–10 июня 2004 г. С. 207.
13. Алолихина О.И., Сивкова А.В., Бешлиев Д.А. и др. Анализ урологической заболеваемости в Российской Федерации в 2002–2009 годах по данным официальной статистики. Экспериментальная и клиническая урология. 2011;1:4–10.
14. Эпштейн О.И. Сверхмалые дозы (история одного исследования). М.: Изд-во РАМН, 2008:336.
15. Горпинченко И.И., Гурженко Ю.Н., Корниенко А.М. и др. Исследование клинической эффективности препарата Афала в лечении мужчин с хроническим абактериальным простатитом, осложненным нарушениями мочеиспускания. Здоровье мужчины. 2009;1:90–93.
16. Кульчавеня Е.В. Эффективность афалы в комплексном лечении больных хроническим простатитом. Бюл. экспер. биол. и мед. Прил. 2009;148(8):64–66.
17. Gradini R., Realacci M., Ginepri A. Nitric oxide synthases in normal and benign hyperplastic human prostate: immunohistochemistry and molecular biology. J. Pathol. 1999;189(2):224–229.
18. Klotz T., Bloch W., Volberg C. et al. Selective expression of inducible nitric oxide synthase in human prostate carcinoma. Cancer.1998;82(10):1897–1903.
19. Шаплыгин Л.В., Алисейко С.В. Импаза в лечении хронического простатита. Мат. 2-й Всероссийской конференции “Мужское здоровье”. М., 2005:71–72.
20. Глыбочко П.В., Твердохлеб С.А., Попков В.М., Блюмберг Б.И. Эффективность и безопасность применения препарата “Импаза” при лечении эректильной дисфункции у больных хроническим абактериальным простатитом. Мат. 2-й Всероссийской конференции “Мужское здоровье”. М., 2005:295–296.
21. Жавберт Е.С., Дугина Ю.Л., Сергеева С.А. и др. Импаза в терапии хронического простатита. Сборник материалов IX Национального научно-медицинского конгресса “Здоровье человека” под девизом “Армения–Россия – медицина без границ” (с международным участием). Ереван. 2010:208–211.
22. Цыбденов А.Г. Клиническая эффективность препаратов
“Афала” и “Импаза” в лечении гиперплазии предстательной железы в сочетании с эректильной дисфункцией. Вестник Бурятского госуниверситета. 2009;12:129–130.
23. Вертапетов Б.А., Николайчук С.П., Шаратник Р.М. Гонадотропные гормоны, предстательная железа и экспериментальная модель ее недостаточной деятельности. Проблемы эндокринологии. 1970;6:81–85.
24. Боровская Т.Г., Фомина Т.И., Лоскутова О.П. и др. Антитела к простатическому специфическому антигену в сверхмалых дозах: влияние на морфологическое и функциональное состояние предстательной железы крыс. Бюлл. эксперим. биол. и мед. 2002. Прил. 4:104–106.
25. Лопаткин Н.А., Аполихин О.И., Сивков А.В. и др. Результаты мультицентрового исследования экстракта Serenoa repens у больных с хроническим абактериальным простатитом. Урология. 2007;5:3–7.
26. Боровская Т.Г., Фомина Т.И., Лоскутова О.П. и др. Влияние сверхмалых доз антител к простатоспецифическому антигену на предстательную железу крыс. Бюлл. эксперим. биол. и мед. 2001. Прил. 3. С. 49–51.
27. Martyushev-Poklad A.V., Mazo E.B., Gamidov S.I. et al. Impaza, an oral antibody therapeutic for erectile dysfunction: benefits from mono-and combined therapy. Inter J Androl. 2005;28(Suppl. 1):P.49 (Abstracts of the 8 th International Congress of Andrology. 12-16 June 2005, Seoul, Korea).
28. Савельева К.В., Качанова М.В., Дугина Ю.Л. и др. Новые возможности лекарственной терапии доброкачественной гиперплазии предстательной железы. Signatura. 2007;2:81–86.
29. Меркулов Г.А. Курс патогистологической техники. Медицина, Ленинградское отд., 1969: 405.
30. Боровская Т.Г., Хейфец И.А., Дугина Ю.Л. и др. Изучение зависимости противовоспалительного эффекта афалы от дозы в условиях хронического простатита у крыс. Тез. докл. XVII Российского национального конгресса “Человек и лекарство”. М., 2010. С. 581–582.
31. Мазо Е.Б., Дмитриев Д.Г. Клинический эффект применения препарата “Простамол® уно” у больных доброкачественной гиперплазией предстательной железы и хроническим простатитом. Урология. 2001;5:38–41.

Об авторах / Для корреспонденции

Е. С. Жавберт, e-mail: Zhavbertes@materiamedica.ru

Нет комментариев

Комментариев: 0

Вы не можете оставлять комментарии
Пожалуйста, авторизуйтесь
Статьи по теме

Смотрите также