Экспериментальное изучение влияния активного вещества препарата мирамистин® на инфекционную активность коронавируса SARS-CoV-2 in vitro

Цель исследования. Изучение и лабораторное подтверждение влияния препарата мирамистин® (бензилдиметил-миристоиламино-пропиламмония – БМПА) на инфекционную активность коронавируса SARS-CoV-2 in vitro.
Материалы и методы. Использованы культуры клеток почки обезьяны Vero CCL-81 и лабораторного штамма коронавируса SARS-CoV-2 Dubrovka. Применяли культуральные, вирусологические, молекулярно-биологические и статистические методы. При проведении всех экспериментов использована оригинальная фармацевтическая субстанция бензилдиметил-миристоиламино-пропиламмоний хлорид (ООО «ИНФАМЕД», Россия)
Результаты. Изучение цитотоксичности БМПА в культуре клеток показало, что его ЦТД50 составляет 0,0091 ± 0,002%, а МПК – 0.005%. Оригинальный препарат обладает выраженной вирулицидной активностью в отношении коронавируса SARS-CoV-2, полностью подавляя его инфекционность в концентрации 0,005% и выше. В дополнительном эксперименте с выявлением результата путем титрования вируса и в вирусспецифической реакции ОТ-ПЦР-РВ подтверждена полная инактивация вируса в диапазоне нетоксических концентраций 0,01–0,0025%.
Заключение. Оригинальная фармацевтическая субстанция бензилдиметил-миристоиламино-пропиламмоний хлорид в условиях in vitro проявляет выраженную вирулицидную активность в концентрациях, соответствующих концентрации активного вещества в препарате мирамистин (0,01%), и даже в более низких концентрациях (0,005 и 0,0025%).

В декабре 2019 г. в самом густонаселенном городе центрального Китая была зарегистрирована вспышка пневмонии, вызванная ранее неизвестным видом коронавируса, которому было присвоено официальное таксономическое наименование SARS-CoV-2. Коронавирус SARS-CoV-2, наряду с вирусом SARS-CoV, относится к семейству Coronaviridae, подсемейству Orthocoronavirinae, роду Betacoronavirus, подроду Sarbecovirus, виду Severe acute respiratory syndrome-related coronavirus [1–2]. В течение короткого времени вирус из Китая распространился по странам и континентам, в начале марта ВОЗ объявила о пандемии инфекции, получившей название COVID-19. К настоящему времени в мире было зарегистрировано более 616,5 млн случаев заболевания, из которых более 6,5 млн закончились смертельными исходами.

Характер заболевания, вызванного SARS-CoV-2, может различаться у разных людей в широких пределах [3]. В клинической практике наблюдается большая вариабельность клинических проявлений COVID-19 даже среди близких контактов инфицированного и членов одной семьи. Спектр симптоматики при COVID-19 колеблется от легкой и умеренной формы до критической и фатальной [4–6]. Также часто фиксируются случаи бессимптомного течения заболевания. Кроме того, бессимптомное течение инфекции может быть ассоциировано с субклиническими нарушениями в легких, которые выявляются при проведении компьютерной томографии [7]. Таким образом, SARS-CoV-2 обладает повышенной вирулентностью с тактическим преимуществом – способностью поддерживать передачу от человека человеку даже при бессимптомном носительстве [8], что позволяет вирусу быстро распространяться. Заболевание COVID-19 в тяжелой форме может протекать у практически здоровых людей любого возраста, но преимущественно встречается у лиц старше 65 лет и/или в группах риска – у людей с сопутствующими заболеваниями (сердечно-сосудистые заболевания, сахарный диабет, гипертония, хронические заболевания легких и почек, онкологические заболевания, ожирение, курение) [5, 9, 10]. В настоящее время вакцинация против коронавирусной инфекции рассматривается как основное средство профилактики заболевания и способ остановить пандемию. За очень короткое время в мире созданы и зарегистрированы несколько вакцин против коронавирусной инфекции. Однако известно, что ни одна вакцина не обладает 100% эффективностью. Кроме того, изменчивость нового коронавируса оказалась значительно выше, чем ожидалось, постоянно возникают новые варианты вируса, в отношении которых эффективность существующих вакцин снижена. Поэтому другим направлением борьбы с коронавирусной инфекций является применение лекарственных препаратов. Несмотря на определенные успехи в этой области вопрос о медикаментозной терапии COVID-19 остается открытым. Создание новых специфических препаратов для лечения новой инфекции является длительным процессом, занимающим при наилучшем стечении обстоятельств несколько лет. С целью сдерживания распространения вируса и создания резерва необходимых лекарственных препаратов все медицинское сообщество фокусируется на использовании уже существующих зарегистрированных препаратов, обладающих эффективностью в отношении других инфекций [11, 12]. При этом проведение полноценных клинических испытаний было невозможно в условиях геометрически усиливающей волны заболеваемости в начале и середине пандемии и затруднено в настоящее время. В связи с этим экспериментальное изучение активности уже апробированных препаратов может определить их эффективность в отношении новой инфекции, Часто оно являлось одним из оснований для начала применения таких препаратов в клинической практике и включения их в рекомендации по лечению COVID-19.

Мирамистин® [бензилдиметил 3-(миристоиламино) пропиламмония хлорида моногидрат – БМПА] – оригинальный лекарственный препарат из группы катионных поверхностно-активных веществ. Многочисленными экспериментальными исследованиями подтверждено, что он обладает выраженным антимикробным действием в отношении грамположительных и грамотрицательных бактерий, грибов, вирусов, простейших, аэробной, анаэробной флоры, находящейся в виде монокультур и микробных ассоциаций, включая штаммы, полирезистентные к лекарственным препаратам. Препарат имеет низкую токсичность, не обладает местнораздражающим, аллергизирующим, мутагенным, канцерогенным и эмбриотоксическим действием. Его вирулицидные свойства исследованы по отношению к лабораторным штаммам вирусов гриппа (H3N2), гепатита, аденовирусов, герпесвирусов I и II типа, коронавируса ОС43, ECHO 6-го типа, полиовирусов 2-го типа, Коксаки В1 и В6, колифага Т2, а также вирусу иммунодефицита человека (ВИЧ) [13–17].

Целью работы явилось изучение и лабораторное подтверждение влияния оригинального лекарственного препарата БМПА на инфекционную активность коронавируса SARS-CoV-2 in vitro.

Исследование выполнено с использованием оборудования Центра коллективного пользования НИИВС им. И.И. Мечникова

Материалы и методы

Образцы и их приготовление

Ленева И.А., Грачева А.В., Корчевая Е.Р., Смирнова Д.И., Файзулоев Е.Б.