Фактор некроза опухоли α в эякуляте как показатель сниженной фертильности

Введение. Провоспалительный цитокин фактор некроза опухоли α (ФНО-α) является одним из компонентов протеома семенной плазмы; его значение окончательно не раскрыто. Представляет интерес сравнительный анализ концентрации данного белка в крови и в эякуляте и изменений его уровня в сперме у мужчин с бесплодием. Цель исследования: определить уровень ФНО-α в сыворотке крови и семенной плазме здоровых мужчин и у пациентов со сниженной фертильностью. Материалы и методы. Обследованы 70 мужчин репродуктивного возраста, из них 18 с азооспермией (основная группа), 18 – c олигоастенозооспермией (группа сравнения) и 34 с нормальными показателями спермограммы (контрольная группа). Эякулят исследовали с помощью анализатора спермы SQA–V (MES, Израиль). В образцах семенной плазмы концентрацию ФНО-α определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием тест-системы «альфа-ФНО-ИФА-БЕСТ» (А-8756, ООО «Вектор-Бест», Россия). Результаты исследования. Концентрация ФНО-α в сыворотке крови имела значительный разброс (коэффициент вариации (CV) – 85,31%) и составила 2,75±2,18 пг/мл, что в 2,55 раза ниже аналогичного показателя в семенной плазме (7,01±5,98 пг/мл; CV=126,15%, р<0,00001). При сравнении содержания ФНО-α в семенной плазме у обследованных были установлены статистически значимые различия (критерий Краскела–Уоллиса H=24,75991; р<0,00001). При попарном сравнении выявлена статистически значимая разница уровня ФНО-α в семенной плазме между группой сравнения и контрольной группой (p=0,000023), а также между основной группой и группой сравнения (p=0,000043); достоверных различий между основной и контрольной группами не выявлено (р>0,05). При определении содержания ФНО-α в сыворотке крови статически значимой разницы между группами не установлено (р>0,05). Отсутствовали корреляционные зависимости между концентрацией ФНО-α в сыворотке крови и семенной плазме (R=0,295374); между уровнем данного протеина и общим количеством сперматозоидов в эякуляте (R=-0,027945); между содержанием ФНО-α и концентрацией сперматозоидов в эякуляте (R -0,042902). Обсуждение. Маловероятно, что исследуемый цитокин проникает в семенную плазму из сыворотки крови против градиента концентрации. Есть основания предполагать, что ФНО-α продуцируется локально в органах репродуктивной системы резидентными иммунными клетками или клетками, участвующими в сперматогенезе. Повышенное содержание ФНО-α в семенной плазме у пациентов группы сравнения может указывать на наличие воспалительного процесса в органах репродуктивной системы и свидетельствовать о сниженной фертильности эякулята. Заключение. Пока остаются неясными физиологическая роль ФНО-α в сперме, источники его продукции в органах репродуктивной системы мужчин и патогенетические механизмы участия данного протеина в патологических процессах в органах мужской репродуктивной системы. Все это обосновывает необходимость дальнейшего исследования уровня ФНО-α в семенной плазме в норме и при заболеваниях органов урогенитального тракта у мужчин.

Введение. Нарушение мужской репродуктивной функции вследствие воздействия физических и химических факторов, генетических нарушений, перенесенных ранее заболеваний часто сопровождается изменениями структуры сперматозоидов и/или их количества, а также протеома и метаболома семенной плазмы [1–4]. Частым фактором, отрицательно влияющим на свойства эякулята, является воспаление в органах репродуктивной системы у мужчин [5].

Важную роль в формировании воспалительного иммунного ответа играют цитокины [6]. Провоспалительные цитокины (интерферон-γ, интерлейкины-1, -2, -6, -8) отвечают за формирование воспалительного ответа, индукцию лихорадки, активацию мононуклеарных фагоцитов, стимуляцию синтеза белков острой фазы – это обеспечивает уничтожение и элиминацию патогена. Противовоспалительные цитокины (интерлейкины-4, -10) регулируют активность воспалительного процесса.

К провоспалительным цитокинам относится также фактор некроза опухоли-α (ФНО-α, англ. TNFα) [6–8], который вырабатывается различными клетками – активированными макрофагами, В-лимфоцитами, Т-лимфоцитами, NK-клетками, полиморфно-ядерными лейкоцитами, тучными клетками, базофилами, фибробластами, клетками эндотелия сосудов и др. ФНО-α экспрессируется как трансмембранный белок с молекулярной массой 26 кДа, включающий остатки 233 аминокислот. Под действием специфического TNF-конвертирующего фермента ADAM17 (A Disintegrin And Metalloprotease 17, CD156b) фрагмент, связанный с мембраной, отщепляется и формируется растворимый ФНО-α (17 кДа, 157 аминокислотных остатков) [6–10].

Физиологическая функция ФНО-α разнообразна и включает регуляцию пролиферации, дифференцировки, апоптоза, формирования структуры органов и тканей, участие в ремиелинизации нейронов, ремоделировании миокарда, регенерации хрящевой ткани, десенсибилизации макрофагов, подавлении онкогенеза [7–13]. ФНО-α определяется как в сыворотке крови, так и в других биологических жидкостях организма – в моче, слюне [14], ликворе [15], синовиальной жидкости [16]. Установлено присутствие данного белка в органах мужской репродуктивной системы – яичках и их придатках [17], а также в содержимом кист придатка яичка [18].

В доступной литературе обнаружено небольшое количество публикаций, посвященных изучению ФНО-α в сперме [5,19–21, 24–26]. В связи с этим представляется актуальным сравнительный анализ концентрации данного протеина в крови и в эякуляте, изучение возможных изменений его концентрации в сперме у больных с нарушением фертильности.

Цель исследования: определить содержание ФНО-α в сыворотке крови и в семенной плазме здоровых мужчин и у пациентов со сниженной фертильностью.

Материалы и методы. В исследование включены 70 мужчин репродуктивного возраста (средний возраст – 38,38±9,86 года), проходивших обследование с целью уточнения причины бесплодного брака. У всех обследованных отсутствовали изменения в общем и биохимическом анализах крови, общем анализе мочи. Исследование выполнено с соблюдением этических принципов проведения медицинских исследований с участием людей в качестве субъектов, изложенных в Хельсинкской декларации ВОЗ.

В работе использовали остаточные образцы биологических материалов (сыворотки крови и спермы) мужчин, проходивших обследование с целью оценки фертильности. Образцы эякулята собирали после 2–4 дней полового воздержания и оценивали в соответствии с рекомендациями ВОЗ [22]. Кровь брали методом венепункции кубитальной вены перед сбором эякулята. После выполнения всех назначений остатки проб обезличивали. Сыворотку крови и семенную плазму отделяли путем центрифугирования при 2000 g в т...

Соснин Д.Ю., Галькович К.Р., Кривцов А.В., Гильманов А.Ж.