Функциональная активность гранулоцитов у беременных с высоким инфекционным риском и их новорожденных

Цель исследования. Характеристика особенностей функционирования фагоцитов периферической крови беременных и их новорожденных при реализации внутриутробной инфекции (ВУИ). Материал и методы. Сто восемнадцать беременных, родоразрешенных путем операции кесарева сечения: I группа (n=30) – наличие плацентарной недостаточности (ПН), отсутствие бактериально-вирусной инфекции во время беременности; II группа (n=30) – наличие во время данной беременности бактериально-вирусной инфекции при отсутствии ПН; III группа (n=30) – наличие ПН, а также бактериально-вирусной инфекции во время данной беременности; IV группа (n=28) – условно здоровые беременные. В зависимости от состояния новорожденных выделены следующие группы: 1-я (n=15) – женщины высокого инфекционного риска, родившие новорожденных с явлениями гипо­трофии; 2-я (n=18 ) – женщины высокого инфекционного риска, с реализацией ВУИ у новорожденных; 3-я (n=25) – женщины высокого инфекционного риска, чьи новорожденные имели осложнения неинфекционной природы; 4-я (n=32) – женщины высокого инфекционного риска, родившие условно здоровых новорожденных; 5-я (n=28) – группа контроля, включившая условно здоровых женщин и их новорожденных детей. Фагоцитарную активность нейтрофильных гранулоцитов определяли с помощью метода проточной цитометрии, генерацию активных форм кислорода (АФК) оценивали по люминол-зависимой хемилюминесценции. Определяли уровень спонтанной и индуцированной опсонизированным зимозаном продукции АФК в образцах нефракционированной венозной крови матери и пуповинной крови новорожденного. Изучали экспрессию активационных маркеров гранулоцитами венозной крови беременных женщин перед родами и пуповинной крови новорожденных: CD16 – Fc-рецептор III типа, CD11b – рецептор комплемента (CR3), CD95(Fas/APO1) – проапоптотический маркер (Fas-рецептор). Результаты исследования. По содержанию лейкоцитов в венозной крови беременных женщин непосредственно перед родами и в пуповинной крови их детей статистически значимых различий между группами выявлено не было. При оценке поглотительной функции отмечено существенное снижение фагоцитарной активности в крови беременных с высоким инфекционным риском и их новорожденных. Определение функциональной активности гранулоцитов крови по уровню спонтанной генерации АФК не выявило существенных различий между беременными с высоким инфекционным риском и их новорожденными (p=0,437) при наличии различий в контрольной группе (p<0,05). Индуцированная продукция АФК, напротив, была более интенсивной у беременных, имеющих высокий инфекционный риск, по сравнению с показателем у женщин контрольной группы. Заключение. Отмечено снижение функциональной активности гранулоцитов новорожденных, родившихся у матерей высокого инфекционного риска с повышенной активацией иммунной системы, особенно при реализации ВУИ в раннем неонатальном периоде. Обнаружение высокого уровня индуцированной продукции АФК у матери и низкого в пуповинной крови может служить одним из прогностических критериев, свидетельствующих о высокой вероятности реализации ВУИ.

Инфекционно-воспалительные заболевания матери и нарушения в ее иммунной системе являются факторами риска возникновения патологических состояний и изменения реактивности иммунной системы у плода, развивающихся в условиях тесного взаимоотношения с материнским организмом. При физиологическом течении беременности происходит изменение баланса между врожденным и адаптивным иммунитетом матери, при этом факторы естественного иммунитета начинают играть большую роль в иммунологической адаптации беременной. С ранних сроков беременности происходит увеличение числа фагоцитов (гранулоцитов и моноцитов), усиление фагоцитоза, генерации активных форм кислорода (АФК). Важную роль в защите от инфекции играют полиморфноядерные фагоциты, которые используют сходные с макрофагами механизмы бактерицидного действия с увеличением связывания и поглощения микроорганизмов в присутствии опсонизирующих факторов (антител и фрагментов комплемента).

Беременность нередко осложняется воспалительными заболеваниями инфекционного или неинфекционного генеза, которые могут протекать не только на локальном, но и на системном уровне, причем на фоне неадекватного иммунного ответа. Активация нейтрофилов, являющаяся одним из ключевых моментов в развитии воспалительного процесса, приводит к продукции цитокинов, множества цитотоксических молекул и угнетению процесса апоптоза. Цитотоксический потенциал нейтрофилов, которые наиболее быстро мобилизуются при развитии воспалительного ответа, в значительной степени обеспечивается АФК [1].

Процесс уничтожения микроорганизмов фагоцитами сопровождает серия сложных метаболических событий, включающих активацию гликолитических путей, генерацию АФК и увеличение потребления кислорода — «дыхательный взрыв». Повреждение многих органов, особенно легких, сетчатки, центральной нервной системы у новорожденного может быть следствием не только влияния инфекционного агента, но и/или продолжительного воздействия АФК и протеаз. Подобные процессы могут иметь место и без непосредственного участия инфекции при выраженных воспалительных состояниях, при асфиксии или продолжительной гипоксии в процессе родов. При исследовании влияния родов на оксидативный стресс в фетальном кровообращении и возможности предотвращения его с помощью кесарева сечения получены неоднозначные результаты [2, 3, 4].

Ранняя диагностика и адекватное лечение могут снижать риск развития тяжелых заболеваний у новоpожденных. Ранний диагноз внутриутробной инфекции (ВУИ) не всегда возможен, так как симптомы инфекций часто не являются специфичными, а лабораторные тесты занимают немало времени. Поэтому постоянно ведутся поиски биомаркеров для ранней диагностики инфекции у новорожденного. В качестве приемлемых методов обнаружения инфекции предлагаются такие, как оценка активации лимфоцитов, проведенная быстро, до выделения инфекционного агента, повышенные уровни интерлейкина (ИЛ)-1β, ИЛ-6 и ИЛ-8 в крови, высокий уровень ИЛ-6 в амниотической жидкости [5, 6, 7]. Имеются только единичные работы по оценке значимости функциональных особенностей клеток врожденной иммунной системы при риске ВУИ новорожденных [8, 9, 10].

Представляется актуальным выяснение вопроса о том, в какой степени инфекционно-воспалительные заболевания матери оказывают влияние на состояние реактивности фагоцитов их новорожденных детей. Важным является выявление особенностей функциональной активности фагоцитов у матерей группы высокого инфекционного риска, родивших детей с реализацией ВУИ, для обоснования прогностических критериев состояния здоровья у ребенка на основе данных клинического обследования и оценки кислород-зависимой бактерицидной активности лейкоцитов в периферической крови матери и в пуповинной крови новорожденного.

Целью исследования явилась характеристика особенностей функционирования фагоцитов периферической крови беременных и их новорожденных при реализации ВУИ.

Материал и методы исследования

До настоящего времени среди беременных принято выделять группу высокого риска по реализации ВУИ у новорожденных, в связи с чем нами была сформирована группа исследуемых пациенток на основе общепринятых в последние годы факторов риска.

В исследование были включены 118 беременных, находившихся под наблюдением и родоразрешенных в ФГБУ НЦ АГиП им. академика В.И. Кулакова Минздравсоцразвития России в 2009–2011 гг. в возрасте от 20 до 46 лет, путем операции кесарева сечения при сроке гестации 37,7 нед (были включены 2 случая при сроке беременности 26 нед).

Критерии включения в исследование: в I группу (n=30) – наличие плацентарной недостаточности
(ПН), установленной по данным клинического обследования, результатам функциональных методов исследования (нарушение маточно- и/ или фетоплацентарного кровотоков и/или усиление кровотока в среднемозговой артерии, по данным допплерометрии, синдром задержки роста плода, по данным ультразвукового исследования), отсутствие клинических и лабораторны...

Ванько Л.В., Матвеева Н.К., Ломова Н.А., Беляева А.С., Сафронова В.Г., Кан Н.Е., Сухих Г.Т.