STROKE №6 / 2008
Функциональная интеграция вновь образованных нейронов в полосатом теле после ишемии головного мозга у взрослых крыс
1 января 2008
Предпосылки и цель исследования. Ишемическое повреждение может индуцировать нейрогенез в полосатом теле. Эти вновь образующиеся нейроны могут экспрессировать декарбоксилазу глутаминовой кислоты и холинацетилтрансферазу — маркеры GABA-эргических и холинэргических нейронов соответственно. В настоящем исследовании изучили, могут ли эти новые GABA-эргические и холинэрегические нейроны дифференцироваться в функциональные клетки. Методы. Для нанесения меток на делящиеся клетки в срезах полосатого тела головного мозга взрослых крыс после окклюзии средней мозговой артерии (СМА) использовали ретровирусы, содержащие ген EGFP. Для верификации, могут ли эти вновь образованные нейроны анатомически формировать нейрональную полярность и синапсы с ранее существовавшими нейронами, провели иммунное окрашивание с целью выявления EGFP и иммунноэлектронную микроскопию. Для оценки функциональных электрофизиологических свойств вновь образованных нейронов провели фиксацию потенциала на мембране на свежих срезах полосатого тела головного мозга крыс через 6–8 недель после окклюзии СМА. Результаты. Сигналы экспрессии EGFP (EGFP+) в основном определяли в теле клетки в течение первых двух недель. С 4-й по 13-ю неделю после образования нейроны EGFP+ постепенно формировали нейрональную полярность, также выявляли время-зависимое увеличение длины дендритов и формирование ветвей. Клетки EGFP+ давали положительную реакцию на NeU и декарбоксилазу глутаминовой кислоты (EGFP+-NeuN+-GAD67+), МАР-2 и холинацетилтрансферазу (EGFP+-МАР-2+-ChAT+). Они также экспрессировали фосфорилированный синапсин I (EGFP+-p-SYN+) и образовывали типичные синаптические структуры, включающие дендриты и отростки. Как GABA-эргические, так и холинэргические вновь образованные нейроны могут формировать потенциалы действия и получать возбуждающие и тормозные синаптические сигналы; было продемонстрировано наличие спонтанного постсинаптического потенциала, изменяющегося при воздействии пикротоксина или CNQX. Заключение. Вновь образующиеся в полосатом теле под влиянием ишемии GABA-эргические и холинэрегические нейроны могут функционально интегрироваться в нейронную сеть головного мозга взрослых крыс после инсульта.
