Фарматека №2 (315) / 2016
Helicobacter pylori – изотопная диагностика инфекции и тестирование резистентности
(1) ГБОУ ВПО «Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова» Минздрава РФ, Санкт-Петербург; (2) НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера, Санкт-Петербург
В статье представлены результаты исследования частоты встречаемости хеликобактерной инфекции и степени инфицированности пациентов с функциональной диспепсией на основании 13С-уреазного карбамидного дыхательного теста. Обследованы 1929 пациентов. Показаны высокая степень обсемененности среди больных функциональной диспепсией при частоте встречаемости Helicobacter pylori 52%. Описана методика бактериологического тестирования. Представлены результаты определения резистентности штаммов H. pylori методом серийных разведений. Среди анализируемых изолятов 42,5% резистентны к метронидазолу, 27,1% – к левофлоксацину, 25% – к кларитромицину, 6,3% – к амоксициллину. Все тестируемые штаммы были чувствительны к тетрациклину.
Введение
Своевременная диагностика и эрадикация Helicobacter pylori в настоящее время рассматриваются как приоритетная стратегия профилактики развития некардиального рака желудка, снижения риска рецидива язвенной болезни и излечивания от инфекционного хеликобактерного гастрита [1]. Сложности диагностики микроорганизма в России связаны с малой доступностью в большинстве регионов страны неинвазивных валидизированных высокочувствительных и специфичных методик верификации H. pylori – 13С-уреазного дыхательного теста и определения антигена хеликобактера в стуле с помощью моноклональных антител [2]. В силу особенностей культивирования H. pylori и сложности определения резистентности к антимикробным препаратам в большинстве случаев врачи не обладают информацией о чувствительности микроорганизма к антибиотикам. Перечисленные особенности зачастую приводят к гипердиагностике хеликобактерной инфекции, «слепой» (без тестирования на присутствие микроорганизма) эрадикации, затрудняют назначение адекватной эффективной терапии.
H. pylori имеет широкий спектр чувствительности к антимикробным препаратам in vitro [3, 4]. Однако в схемы эрадикации входит ограниченный набор препаратов (кларитромицин, амоксициллин, метронидазол, тетрациклин, левофлоксацин и препараты висмута) [2, 5]. Резистентность H. pylori к антимикробным препаратам является определяющим фактором эффективности существующих режимов эрадикации микроорганизма [5, 6].
Целью данной работы было получение данных о частоте инфицированности пациентов с гастроэнтерологическими жалобами и определении первичной резистентности штаммов H. pylori в Санкт-Петербурге.
Материал и методы
Проведено проспективное наблюдательное исследование, включившее пациентов, обратившихся к гастроэнтерологу или терапевту с жалобами на диспепсию. Всем больным выполнен 13С-уреазный дыхательный тест с меченой мочевиной – 13С-карбамидом. Принцип метода основан на высокой уреазно-ферментативной активности H. pylori, посредством которой происходит ферментативный гидролиз принятой внутрь меченой мочевины до углекислого газа и аммиака (рис. 1).
Процедура тестирования включала забор проб выдыхаемого воздуха до приема меченого субстрата и через 10, 20 и 30 минут после приема 13С-карбамида с усилителем уреазной активности хеликобактера лимонной кислотой.
В природе углерод встречается в виде двух стабильных нерадиоактивных изотопов: «легкого» с массовым числом 12 (12С) и «тяжелого» – с массовым числом 13 (13С). Распространенность 12С составляет 98,89%, 13С – 1,11%. Природное соотношение углеродов составляет 0,01122. Изотопной меткой препарата был стабильный нерадиоактивный 13-й изотоп углерод. Доказана прямая корреляция между уреазной активностью хеликобактера и приращением 13С-углерода в выдыхаемом воздухе после приема субстрата [7].
