Локальные факторы врожденного иммунитета в прогнозировании преждевременных родов

Цель исследования. Разработка тест-системы прогноза реализации преждевременных родов (ПР), основанной на профиле экспрессии генов в клетках соскоба из цервикального канала у беременных с угрожающими ПР. Материал и методы. Обследованы 125 женщин в возрасте от 19 до 40 лет с угрожающими ПР до развития регулярной родовой деятельности. Группу 1 составили 46 беременных, родивших в сроках от 22 до 36 недель в течение 7 дней после проведения обследования. Группу 2 – 79 случаев угрожающих ПР с последующим родоразрешением в доношенном сроке беременности. У всех пациенток проанализирована структура микробиоценоза влагалища методом фемофлор и определение соотношений уровней мРНК генов TLR4, CD68, TNF, GATA3, IL1b, IL10, IL18, TNFa, TLR4, B2M в цервикальном канале методом ПЦР в режиме реального режиме времени с обратной транскрипцией. Полученные результаты были проанализированы с применением бинарной логистической регрессии. Результаты. Выявлено достоверное снижение уровня экспрессии мРНК гена TLR4 (p<0,05) при развитии ПР. С помощью бинарной логистической регрессии была построена математическая модель, определяющая вероятность развития ПР на основании уровня экспрессии генов TLR4 и IL10. При вероятности большей или равной 15% ожидается развитие ПР в ближайшие 7 дней. Площадь под ROC-кривой составила 0,822, р=0,01, чувствительность и специфичность в точке отсечки составили 100 и 57% соответственно. Заключение. Соотношение уровней мРНК генов TLR4/IL10 может быть использовано в качестве предиктора развития ПР. Использование данного прогностического критерия позволит своевременно выявлять группы высокого риска ПР и осуществлять полноценный комплекс лечебно-профилактических мероприятий.

Проблема преждевременных родов (ПР) в современном акушерстве продолжает оставаться актуальной и нерешенной [1–3]. Это обусловлено тем, что ПР остаются ведущей причиной неблагоприятных перинатальных исходов [4]. Несмотря на многочисленные научные и практические исследования в этой области, частота ПР не снижается, а в некоторых странах даже растет [5]. По современным представлениям одной из причин развития ПР инфекционного генеза являются ограниченные возможности иммунной системы беременной к своевременному распознаванию и уничтожению этиологического агента инфекции. Проникновение инфекционных факторов может стать пусковым механизмом развития системного воспалительного ответа (ССВО), при котором локальное повреждение тканей в зоне инокуляции инфекционных патогенных факторов вызывает совокупность системных реакций, одной из которых является дисфункция врожденного и приобретенного иммунного ответа [6, 7]. ССВО определяют как неспецифический системный ответ организма на инфекционные агенты и иммунодефициты. Признаком системного иммунного ответа является изменение соотношения цитокинов в периферической крови. Система цитокинов играет важную роль в течение всей беременности, регулируя процессы инвазии трофобласта, межклеточные взаимоотношения в эндометрии, воспалительные реакции [8]. Нарушение соотношения про и противовоспалительных цитокинов является главной особенностью патогенеза ССВО [9, 10]. Вместе с тем немаловажным в развитии воспалительного ответа имеет взаимосвязь микробиоценоза влагалища, локального и врожденного иммунитета, изучение которых поможет уточнить молекулярно-биологические аспекты патогенеза ПР, и позволит прогнозировать развитие патологических процессов с разработкой системы профилактических мероприятий для улучшения перинатальных исходов.

Цель исследования: разработка тест-системы для прогноза реализации ПР, основанной на профиле экспрессии генов в клетках соскоба из цервикального канала у беременных с угрожающими ПР.

Материал и методы исследования

Обследованы 125 женщин в возрасте от 18 до 40 лет с угрожающими ПР до развития регулярной родовой деятельности.

Критериями включения послужили: одноплодная беременность, угрожающие ПР на сроке гестации с 22 до 36 недель 6 дней, отсутствие регулярной родовой деятельности.

Критериями исключения были: тяжелая экстрагенитальная патология, истмико-цервикальная недостаточность, преждевременное излитие околоплодных вод, многоплодная беременность, пороки развития плода.

Группу 1 составили 46 беременных, родившие в сроках от 22 до 36 недель в течение 7 дней после проведения неинвазивного прогностического теста. Группу 2 – 79 случаев угрожающих ПР с последующим родоразрешением в доношенном сроке беременности.

Взятие биоматериала осуществлялось цитощеткой раздельно из цервикального канала и влагалища. Во избежание деградации мРНК материал помещают в пластиковую пробирку, содержащую 500 мкл среды для стабилизации РНК (лизирующий раствор из комплекта реагентов для выделения ПРОБА-НК (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия)).

Тютюнник В.Л., Курчакова Т.А., Кан Н.Е., Непша О.С., Донников А.Е., Меджидова М.К., Кокоева Д.Н.