Микробиота мочи и влагалища здоровых женщин постменопаузального возраста (пилотное исследование)

Изучение микробиоты различных биотопов урогенитального тракта здоровых женщин
в постменопаузе имеет важное практическое значение для решения вопроса о целесообразности коррекции дисбиотических нарушений изучаемых биотопов.
Цель исследования – изучить микробиоту влагалища и мочи здоровых женщин, находящихся в постменопаузе. Обследованы 20 здоровых женщин в постменопаузе (средний возраст – 59,0±2,1 года). Длительность климактерия у всех обследуемых составила свыше 8 лет. Проведено бактериологическое исследование мочи и влагалища на расширенном наборе питательных сред (15) для культивирования факультативно-анаэробных бактерий (ФАБ) и неклостридиальных анаэробных бактерий (НАБ), а также ПЦР средней порции утренней мочи. Среди ФАБ в моче и влагалище доминировали коагулазоотрицательные стафилококки и НАБ. Бактериальные паттерны изучаемых биотопов во многом оказались подобными. При этом в моче были обнаружены Megasphaera spp., Veillonella spp., Prevotella spp., Mobiluncus spp., Fusobacterium spp., тогда как во влагалище данные микроорганизмы отсутствовали. Кластерный анализ не выявил достоверных отличий в концентрации одних и тех же микроорганизмов, выделенных из мочи и влагалища. При сравнении частоты обнаружения микроорганизмов, идентифицированных в моче бактериологическим методом и ПЦР, идентичность бактериального паттерна констатирована в 56% наблюдений.

Введение. Инициированный Национальным институтом здоровья США исследовательский проект «Human microbiome project» (2008–2012) во многом расширил существующие представления о микробном спектре различных биотопов человеческого организма, в том числе органов мочевыделительной и половой систем.

Как известно, урогенитальный тракт является сложной экосистемой, подверженной постоянным колебаниям (даже суточным) в ответ на различные экзогенные и эндогенные раздражители [1]. При этом микробный спектр влагалища имеет особое значение в предотвращении его колонизации патогенными микроорганизмами, в том числе передающимися половым путем и вызывающими инфекции мочевыводящих путей [2, 3].

В периоды мено- и постменопаузы в условиях эстрогендефицита pH влагалища становится нейтральным, количество лакто- и бифидобактерий снижается, облигатно-анаэробных бактерий, напротив, повышается [4].

Фундаментальные исследования по микробиому влагалища женщин показали существенные различия, связанные с возрастом и этнической принадлежностью [5, 6]. Верификация 16S рРНК бактерий выявила 265 видов микроорганизмов во влагалище [5, 7]. Среди них Lactobacillus spp. играют важнейшую роль в функционировании данного биотопа [8, 9]. Установлено также, что количество лактобацилл во влагалище оказывает влияние на формирование микробиоценоза в целом, характерного для каждой возрастной группы, что необходимо учитывать при интерпретации результатов исследования (бактериологического и/или ПЦР) и решении вопроса о целесообразности коррекции [10]. Однако микробиота влагалища в целом в постменопаузе остается недоизученной.

Вместе с тем изучение микробиоты мочи здоровых женщин в постменопаузе также является краеугольным камнем в понимании этиологической структуры инфекций мочевыводящих путей. Это приобретает особое значение в свете новых данных о микрофлоре мочи здоровых женщин детородного возраста [11] и работ по изучению микробиома мочи с обнаружением в данном биотопе 45 родов различных микроорганизмов с доминированием анаэробных [12].

Цель: изучить микробиоту влагалища и мочи условно здоровых женщин, находящихся в постменопаузе.

Материалы и методы. Обследованы 20 условно здоровых женщин, находившихся в постменопаузе (52–65 лет). Средний возраст обследуемых составил 59,0±2,1 года. Длительность климактерия более 8 лет.

Критерии включения в исследование: отсутствие генитальной патологии; отсутствие менструаций в течение 5 и более лет; пролапса гениталий и урологических заболеваний, дизурии, инфекций, передающихся половым путем, отсутствие гормональной, антибактериальной терапии, использования антисептических средств в течение 1 мес до начала исследования; наличие матки; роды в анамнезе (не менее 2); отсутствие самопроизвольного прерывания беременности на ранних и поздних сроках; согласие пациентки на участие в исследовании.

Критерии исключения: наличие тяжелой экстрагенитальной патологии, отказ женщины от участия в исследовании.

Всем женщинам проведены ПЦР и бактериологическое исследование средней порции утренней мочи, а также бактериоскопическое и бактериологическое исследование вагинальной микрофлоры. Материал забирали в соответствии с МУ 4.2.2039-05 (2006).

После соответствующей гигиенической процедуры образцы мочи собирал специально обученный медицинский персонал при самостоятельном мочеиспускании обследуемых. Образцом для бактериологического исследования и ПЦР была средняя порция утренней мочи, отобранная в стерильный одноразовый контейнер (Sterile Uricol, «HiMedia»). Пробы кодировали идентификационным номером и разделяли на 2 аликвоты для бактериологического исследования и ПЦР. Отделяемое заднего свода влагалища для бактериологического исследования забирали стерильным тампоном Сopan innovation (Италия). В работе были использованы питательные среды фирмы «HiMedia» (Индия). С целью выявления факультативно-анаэробных бактерий (ФАБ) применяли MacConkey Agar, HiCrome Candida Differential Agar, HiCrome Enterococci Agar, HiCrome Aureus Agar Base, Mannitol Salt Agar, Streptococcus Selective Agar, Blood Agar Base с добавлением бараньих эритроцитов. Для выделения неклостридиальных анаэробных бактерий (НАБ) использовали среды Блаурокка, Shedler Agar and Broth, Bacteroides Bile Esculin Agar, Bifidobacterium Agar and Broth, MRS Agar, Clostridial Agar. Бактериологическое исследование мочи и отделяемого из заднего свода влагалища осуществляли по методике В. В. Меньшикова [13] с использованием аэробной и анаэробн...

Ю.Л. Набока, А.Н. Рымашевский, М.И. Коган, И.А. Гудима, О.А. Боровлева, К.Т. Джалагония, С.А. Заруцкий