Урология №3 / 2019
Морфологическое исследование лимфоидных органов на ранних этапах экспериментального канцерогенеза простаты
1 ООО МЦ «Столица», Москва, Россия; ² ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов», Москва, Россия
Цель исследования: выявить структурные преобразования в тимусе и лимфатических узлах на начальных этапах формирования экспериментальной опухоли простаты.
Материалы и методы. Эксперименты проведены на 60 половозрелых самцах мышей СВА массой 28–30 г. Экспериментальную модель злокачественной опухоли простаты создавали путем инокуляции разведенного клеточного штамма трансплантируемой асцитной карциномы Эрлиха в паренхиму простаты после срединной лапаротомии под эфирным наркозом. Животных разделили на группы по 20 в каждой: 1) контроль (интактные животные); 2) животные на 5-е сутки экспериментального роста опухоли простаты и 3) животные на 18-е сутки экспериментального роста опухоли простаты. Для гистологического исследования забирали простату, тимус, тазовые лимфатические узлы. Выделение структурных компонентов и клеточных элементов в тимусе и лимфатических узлах проводили согласно Международной гистологической номенклатуре.
Результаты. К 5-м суткам эксперимента в тимусе возрастала доля соединительнотканных элементов и железистой ткани, увеличивалось число иммунобластов. На 18-е сутки определялась дезорганизация структуры тимуса: увеличение коркового вещества, количества эпителиоретикулярных клеток, снижение числа иммунобластов. В лимфатических узлах спустя 5 сут. после начала эксперимента выявлены паракортикальная гиперплазия, синусный гистиоцитоз, активация процесса бласттрансформации, на 18-е сутки – метастазы, фолликулярная реакция, активация транспортной функции.
Заключение. Полученные данные свидетельствуют об акцидентальной инволюции тимуса, нарушении транспортной и иммунной функций тазовых лимфатических узлов при экспериментальной опухоли простаты, степень выраженности которых зависит от стадии канцерогенеза простаты.
Введение. Процесс канцерогенеза характеризуется нарушением иммунного ответа организма и формированием его несостоятельности за счет активации инволюции тимуса, что создает предпосылки для развития Т-клеточного иммунодефицита, а генерализацией канцерогенеза считается метастазирование опухолевых клеток в лимфатические узлы [1]. Состояние подвздошных лимфатических узлов при раке простаты – один из определяющих факторов в прогнозе заболевания [2], а диагностический скрининг микрометастазов в лимфатических узлах – одной из важных задач в стадировании рака простаты [3].
Комплексное морфологическое исследование центральных и периферических лимфоидных органов при опухоли простаты в динамике ее экспериментального развития позволит выявить особенности их структурной организации на различных стадиях канцерогенеза простаты, а это в свою очередь даст возможность оценить действие в эксперименте известных и новых противоопухолевых препаратов как на ткани опухоли, так и на лимфоидную ткань.
В связи с вышесказанным была сформулирована цель исследования – выявить структурные преобразования в тимусе и регионарных лимфатических узлах на начальных этапах формирования экспериментальной опухоли простаты.
Материалы и методы. Эксперименты проведены на 60 половозрелых самцах мышей СВА массой 28–30 г (ФГБУ «Институт цитологии и генетики» СО РАН, Новосибирск). Все эксперименты выполнены в соответствии с Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных, утвержденными Приказом Минздрава СССР № 577 от 12.08.1977, с соблюдением принципов гуманности, изложенных в директиве Европейского сообщества (86/609/ЕС).
Экспериментальную модель злокачественной опухоли простаты создавали путем инокуляции разведенного клеточного штамма трансплантируемой асцитной карциномы Эрлиха в паренхиму простаты после срединной лапаротомии под эфирным наркозом: путем инъекций вводили 0,2 мл асцитной жидкости, содержавшей 500–550х10³ атипичных опухолевых клеток. На 5-е сутки после инокуляции атипичных клеток в простате формируется опухолевый узел объемом 2 мм³, состоящий из полиморфных атипичных клеток [4]. Животных разделили на группы: 1) контроль (интактные животные, которым не вводили клетки опухоли) (n=20); 2) животные на 5-е сутки экспериментального роста опухоли простаты (n=20) и 3) животные на 18-е сутки экспериментального роста опухоли простаты (n=20).
Животных выводили из эксперимента в соответствующие сроки путем дислокации шейных позвонков под эфирным наркозом. Для гистологического исследования забирали простату, тимус, тазовые лимфатические узлы, зафиксированные в растворе Теллесницкого [5]. Материал заливали в парафин, на ротационном микротоме изготавливали продольные срединные срезы (толщиной 5 и 7 мкм), которые затем окрашивали гематоксилином и эозином по Майеру, азуром ΙΙ и эозином по Нохт-Максимову [6]. С помощью окулярной тестовой системы при увеличении 16, 32, 200 и 1000 методом точечного счета проводили морфометрию срезов и подсчет клеточных элементов в опухоли, структурных компонентах тимуса и тазовых лимфатических узлов. В тимусе осуществляли морфометрию коркового и мозгового вещества, соединительнотканных компонентов (капсула, трабекулы). Железистые эпителиальные образования тимуса (эпителиальные тяжи, эпителиальные канальцы) морфометрировали на тех же срезах при увеличении 200, подсчитывали все тимусные тельца (Гассаля) на срезах целого органа, а затем их количество на стандартной площади 10 мм².
Кроме того, в тимусе подсчитывали абсолютное количество клеток на стандартной площади в 2025 мкм². Дифференцировали иммунобласты, ...
