Оценка акросомной реакции при диагностике бесплодия

Анализ акросомного статуса сперматозоидов с помощью проточной цитофлюорометрии позволяет эффективно диагностировать бесплодие, обусловленное нарушениями функций сперматозоидов при нормальных показателях спермограммы.

Бесплодие является важной медицинской и социальной проблемой. При обследовании бесплодных супружеских пар в 4-40% случаев (по данным разных клиник) нарушений репродуктивной функции ни у мужчин, ни у женщин не обнаруживают и ставят диагноз «бесплодие неясного генеза» [1]. Несмотря на многочисленные исследования, не удается выявить такие особенности спермы пациентов с бесплодием, которые обладали бы существенной клинической значимостью, необходимой для постановки диагноза «мужской фактор бесплодия». Основные параметры спермограммы (концентрация, подвижность, содержание лейкоцитов) и микробиологический анализ эякулята могут быть использованы для отнесения пациентов к фертильной или субфертильной группе, но не для диагностики бесплодия [5, 7]. Установлено, что максимальную диагностическую значимость для выявления мужского фактора бесплодия имеет содержание в эякуляте морфологически нормальных сперматозоидов, оцениваемых с помощью критерия Крюгера. Однако этот тест включает в себя множество морфометрических характеристик для каждого сперматозоида, требует длительного и тщательного анализа каждого образца спермы высококвалифицированным специалистом, и в России этот трудоемкий и субъективный анализ практически не используется. Современным подходом к выявлению дисфункций сперматозоидов является оценка качества ДНК и хроматина с помощью методов TUNEL (Terminal deoxynucleotidyl transferases dUTP Nick End-Labeling) и SCSA (sperm chromatin structure assay) [8]. Однако данные об эффективности использования предлагаемых методик в клинической практике остаются спорными [3, 12].

Диагностика мужского бесплодия с вероятностью, близкой к 100%, возможна лишь в случае азооспермии, глобулозооспермии или при полной неподвижности сперматозоидов, обусловленной генетическими факторами, однако такие клинические синдромы в совокупности встречаются менее чем у 10% пациентов с бесплодием [2].

В настоящее время большое внимание уделяется разработке тестов для оценки функций сперматозоидов, определяющих их оплодотворяющую способность. Молекулярные аспекты акросомной реакции (АР) в настоящее время активно исследуются, однако до сих пор не идентифицированы поверхностные рецепторы сперматозоидов, обеспечивающие связывание гамет с физиологическими лигандами, остаются невыясненными механизмы рецепторного экзоцитоза in vivo. Большой интерес представляет недавно выявленная активность ангиотензинпревращающего фермента, локализованного на поверхности сперматозоидов [6, 9, 11], по-видимому, непосредственно влияющая на процесс оплодотворения.

Предполагается, что функциональные тесты могут иметь большее прогностическое значение, чем традиционный анализ спермы [7]. Одной из возможных причин снижения фертильности может быть сниженная оплодотворяющая способность сперматозоидов, обусловленная нарушениями АР.

Акросомная реакция — рецепторопосредованный экзоцитоз акросомного содержимого, обеспечивающий проникновение сперматозоида через оболочки яйцеклетки [13]. Акросома представляет собой мембранно-связанную структуру в передней, заостренной части головки сперматозоида, которая формируется из аппарата Гольджи на ранних стадиях сперматогенеза, в фазе круглых сперматид. Внутреннее содержимое акросомы — акросомный матрикс — содержит несколько ферментов, которые высвобождаются одновременно или последовательно в процессе АР и разрушают прозрачную оболочку яйцеклетки (zona pellucida).

В 1991 г. был предложен эффективный тест для оценки оплодотворяющей способности сперматозоидов — ARIC (AR to ionophore challenge), в котором в качестве индуктора АР использовался ионофор А23187 [4]. Результаты экспериментов in vitro показали высокую прогностическую значимость определения процента сперматозоидов с завершенной спонтанной АР и процента сперматозоидов с завершенной АР после ее индукции ионофором А23187 при диагностике мужского бесплодия [4].

Были выявлены два основных типа нарушений, препятствующих оплодотворению и приводящих к бесплодию, — спонтанная АР, которая происходит еще до взаимодействия сперма...

Николаева М.А., Голубева Е.Л., Ушакова И.В., Ванько Л.В., Божедомов В.А., Сухих Г.Т.