Акушерство и Гинекология №4 (приложение) / 2019

Оценка цитотоксической активности NK-клеток в лабораторной диагностике репродуктивной патологии

19 апреля 2019

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.И. Отта», Санкт-Петербург, Менделеевская линия, 3

Введение. Известны лабораторные методы определения цитотоксической активности (ЦА) NK-клеток – с использованием клеток-мишеней К562 и по экспрессии лизосомального маркера CD107a. NK-клетки присутствуют в эндометрии и децидуальной оболочке. Функции NK-клеток матки и особенности взаимодействия NK-клеток и клеток трофобласта остаются малоизученными.

Целью работы явилась разработка и апробация метода оценки ЦА NK-клеток периферической крови в отношении клеток трофобласта в модели in vitro.

Материалы и методы. Обследованы здоровые небеременные женщины без предшествующих беременностей и с предшествующей одной или несколькими физиологически протекавшими беременностями, закончившимися родами в срок (фертильные), женщины с неосложненной (физиологической) беременностью на сроке 6–7 недель. NK-клетки получали из периферической крови, выделяя мононуклеары в градиенте плотности Histopaque®-1077 (Sigma Aldrich). Используя проточный сортировщик клеток FACSAra III (BD), также выделяли NK-клетки из пула мононуклеаров. Предварительно культивированные в присутствии 1% раствора HEPES и 10% ЭТС клетки трофобласта линии Jeg-3 обрабатывали раствором 4мкМ CFSE и помещали в 96-луночный планшет. В часть лунок с клетками трофобласта вносили мононуклеары периферической крови (соотношение эффектор:мишень 10:1) либо NK-клетки, выделенные из мононуклеарной фракции (соотношение эффектор:мишень 5:1). Центрифугировали планшеты 3 минуты, 100g и инкубировали клетки 4 ч. Затем оценивали количество нежизнеспосо...

В.А. Михайлова, Д.О. Баженов, Е.В. Хохлова, З. Саллум, А.О. Агнаева, О.Н. Беспалова, А.М. Гзгзян, С.А. Сельков, Д.И. Соколов
Статья платная, чтобы прочесть ее полностью, вам необходимо произвести покупку
Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.