Акушерство и Гинекология №12 / 2014

Оценка интерферонового статуса у беременных с высоким риском инфекционных осложнений

17 декабря 2014

РНИМУ им Н.И. Пирогова, Москва, Россия

Цель исследования. Определение диагностической и прогностической значимости комплексного исследования интерферонового статуса у беременных высокого инфекционного риска. Материал и методы. Обследованы 100 пациенток и их новорожденных. В I (основную группу) вошли 65 беременных с урогенитальной инфекцией (УГИ): Iа подгруппа – 24 беременные с преждевременными родами (ПР) и реализацией внутриутробной инфекции (ВУИ); Iб подгруппа – 15 беременных с ПР без реализации ВУИ и Iв подгруппа – 26 беременных со своевременными родами. Во II (контрольную группу) вошли 20 пациенток без УГИ, у которых беременность завершилась своевременными родами. В III (группу сравнения) вошли 15 небеременных. Определение экспрессии генов цитокинов в мононуклеарных клетках периферической крови пациенток проводили с использованием метода обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции. Определение выработки интерферонов (ИФН) и чувствительности лейкоцитов периферической крови (ЛПК) к препаратам интерферонов проводили биологическим методом. Пациентку считали чувствительной к препаратам ИФНα и ИФНγ, если ее ЛПК отвечали увеличением продукции интерферонов при примировании хотя бы одним из препаратов интерферонов. Результаты. Способность к индуцированной продукции ИФНα в культуре лейкоцитов беременных с ПР была выше, чем у здоровых беременных (35,5±11,6 Ед/мл по сравнению с 25,5±5,4 Ед/мл). Способность к продукции ИФНγ у беременных с ПР, напротив, была понижена (5,1±2,4 Ед/мл и 14,9±1,6 Ед/мл, соответственно; р<0,05). У беременных, родивших преждевременно соотношение индуцированной продукции ИФН α и γ в среднем составило 9,7±3,2, по сравнению с 3,2±1,4 у родивших в срок, р<0,05. Соотношения индуцированной продукции ИФН α и γ более 5 может являться прогностическим факторов в отношении ПР и ВУИ плода. Положительная прогностическая ценность этого фактора составляет 69%, отрицательная прогностическая ценность – 85,7%, чувствительность – 90%, специфичность 60%. У беременных с ПР высокий уровень экспрессии гена ИФНα (82,3%) сочетается с высокой выработкой ИФНα в культуре лейкоцитов (35,5±11,6 Ед/мл), однако на фоне высокого уровня экспрессии гена ИФНγ (91,0%) продукция его снижена (5,1±2,4 Ед/мл), что свидетельствует о нарушении синтеза ИФНγ. Отмечена высокая чувствительность ЛПК у беременных с ПР инфекционного генеза к препаратам ИФНα: роферону А – в 82,0% и интрону А – в 82,0% наблюдений, при этом чувствительность в культуре лейкоцитов к препарату – гаммаферону выявлена только в 20,5% случаев; р<0,05. Заключение. Факторами риска развития ПР и реализации ВУИ у плода и новорожденного являются: наличие УГИ во время беременности в сочетании с хроническими воспалительными заболеваниями органов малого таза, хроническими экстрагенитальными заболеваниями. У беременных с ПР на фоне высокого уровня экспрессии гена ИФНγ продукция его в культуре лейкоцитов снижена, что свидетельствует о нарушении продукции ИФНγ на посттранскрипционном уровне. Соотношение индуцированной продукции ЛПК ИФНα к ИФНγ в 5 раз и более позволяет с высокой точностью прогнозировать ПР. Наиболее высокой чувствительностью (82,0%) к препаратам ИФНα (роферону А, интрону А) обладают лейкоциты беременных в группе с УГИ и ПР, т.е. с наиболее выраженными изменениями интерферонового статуса.

Проблема преждевременных родов (ПР) и внутриутробного инфицирования плода (ВУИ) в современном акушерстве продолжает оставаться актуальной и нерешенной [1–4].

На долю недоношенных детей приходится 60–70% ранней неонатальной смертности и 65–75% детской смертности. Мертворождаемость при ПР в 8–13 раз выше, чем при своевременных родах, а перинатальная смертность у недоношенных новорожденных в 33 раза выше, чем у доношенных [5, 6]. Следует отметить, что 40% ПР обусловлено инфекционными факторами, а ПР до 30 недель беременности имеют инфекционную этиологию в 80% случаев [7–10].

Несмотря на многочисленные научные и практические исследования в этой области, частота ПР не снижается, а в некоторых странах даже растет 11–13].

По современным представлениям, одной из причин развития ПР являются ограниченные возможности иммунной системы беременной своевременно распознавать и уничтожать инфекционные агенты. Это связано со смещением иммунного равновесия в организме беременной в сторону преобладания врожденного иммунитета над приобретенным [14–16].

Система цитокинов играет важную роль в течение всей беременности, регулируя процессы инвазии трофобласта, межклеточные взаимоотношения в эндометрии, воспалительные реакции [17]. При осложненном течении беременности на фоне урогенитальной инфекции (УГИ) отмечается увеличение в периферической крови провоспалительных цитокинов, что приводит к возрастанию продукции простагландинов и ферментов, способствующих сокращениям матки и раскрытию шейки матки [18, 19].

Дальнейшие исследования в этой области и поиск новых иммунологических маркеров невынашивания беременности позволят выявить пациенток групп риска по развитию ПР, своевременно проводить патогенетически обоснованную терапию с целью улучшения исходов беременности и родов, снижения перинатальной заболеваемости и смертности.

Целью нашего исследования стало определение диагностической и прогностической значимости комплексного исследования интерферонового статуса у беременных высокого инфекционного риска.

Материал и методы исследования

Нами проведено клинико-лабораторное обследование 100 пациенток и их новорожденных. Все пациентки были разделены на три группы. В I основную группу) вошли 65 беременных с наличием УГИ. Критериями включения пациенток в основную группу являлись: срок беременности от 25 до 32 недель, наличие УГИ, угроза ПР. Критериями исключения пациенток из основной группы являлись: многоплодная беременность, острые инфекционные, воспалительные заболевания, оперативное родоразрешение.

Основная группа проспективно в зависимости от исхода беременности была разделена на 
3 подгруппы: Iа подгруппа – 24 беременные с ПР и реализацией ВУИ; Iб подгруппа – 15 беременных с ПР без реализации ВУИ и Iв подгруппа – 
26 беременных со своевременными родами. Во II контрольную группу) вошли 20 пациенток без УГИ, у которых беременность завершилась своевременными родами. В III (группу сравнения) вошли 15 небеременных женщин (рис. ).

В обследованных группах изучали: данные соматического и акушерского анамнеза, течение настоящей беременности, особенности родового акта, состояние новорожденных. Всем пациенткам проводили комплексное клинико-лабораторное обследование (клинический анализ крови и мочи, определение группы крови и резус-фактора, биохимический анализ крови, гемостазиограмма, анализ микрофлоры влагалища и цервикального канала).

Определение экспрессии генов цитокинов в мононуклеарных клетках периферической крови пациенток проводили с использованием метода обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР) [20].

Выделение РНК проводили по методике P. homczynski, N. Sacchi, [21] методом кислой гуанидин-тиоцианат-фенол-хлороформ экстракции. ОТ-ПЦР – амплификация были выполнены в соответствии с методикой, предложенной С.М. elder, P.S. Thomas [22]. В работе были использованы пары праймеров, последовательность которых получена из базы данных «PrimerBank»: интерферон (ИФН)-α [22], ИФН-γ 23], в качестве положительного контроля использовали β-актин [24]. Регистрацию результатов ПЦР осуществляли электрофорет...

Бахарева И.В., Ганковская Л.В., Романовская В.В., Мезенцева М.В., Магомедова А.М., Кузнецов П.А., Греченко В.В.
Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.