Оценка интерферонового статуса у беременных с высоким риском инфекционных осложнений

Цель исследования. Определение диагностической и прогностической значимости комплексного исследования интерферонового статуса у беременных высокого инфекционного риска. Материал и методы. Обследованы 100 пациенток и их новорожденных. В I (основную группу) вошли 65 беременных с урогенитальной инфекцией (УГИ): Iа подгруппа – 24 беременные с преждевременными родами (ПР) и реализацией внутриутробной инфекции (ВУИ); Iб подгруппа – 15 беременных с ПР без реализации ВУИ и Iв подгруппа – 26 беременных со своевременными родами. Во II (контрольную группу) вошли 20 пациенток без УГИ, у которых беременность завершилась своевременными родами. В III (группу сравнения) вошли 15 небеременных. Определение экспрессии генов цитокинов в мононуклеарных клетках периферической крови пациенток проводили с использованием метода обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции. Определение выработки интерферонов (ИФН) и чувствительности лейкоцитов периферической крови (ЛПК) к препаратам интерферонов проводили биологическим методом. Пациентку считали чувствительной к препаратам ИФНα и ИФНγ, если ее ЛПК отвечали увеличением продукции интерферонов при примировании хотя бы одним из препаратов интерферонов. Результаты. Способность к индуцированной продукции ИФНα в культуре лейкоцитов беременных с ПР была выше, чем у здоровых беременных (35,5±11,6 Ед/мл по сравнению с 25,5±5,4 Ед/мл). Способность к продукции ИФНγ у беременных с ПР, напротив, была понижена (5,1±2,4 Ед/мл и 14,9±1,6 Ед/мл, соответственно; р<0,05). У беременных, родивших преждевременно соотношение индуцированной продукции ИФН α и γ в среднем составило 9,7±3,2, по сравнению с 3,2±1,4 у родивших в срок, р<0,05. Соотношения индуцированной продукции ИФН α и γ более 5 может являться прогностическим факторов в отношении ПР и ВУИ плода. Положительная прогностическая ценность этого фактора составляет 69%, отрицательная прогностическая ценность – 85,7%, чувствительность – 90%, специфичность 60%. У беременных с ПР высокий уровень экспрессии гена ИФНα (82,3%) сочетается с высокой выработкой ИФНα в культуре лейкоцитов (35,5±11,6 Ед/мл), однако на фоне высокого уровня экспрессии гена ИФНγ (91,0%) продукция его снижена (5,1±2,4 Ед/мл), что свидетельствует о нарушении синтеза ИФНγ. Отмечена высокая чувствительность ЛПК у беременных с ПР инфекционного генеза к препаратам ИФНα: роферону А – в 82,0% и интрону А – в 82,0% наблюдений, при этом чувствительность в культуре лейкоцитов к препарату – гаммаферону выявлена только в 20,5% случаев; р<0,05. Заключение. Факторами риска развития ПР и реализации ВУИ у плода и новорожденного являются: наличие УГИ во время беременности в сочетании с хроническими воспалительными заболеваниями органов малого таза, хроническими экстрагенитальными заболеваниями. У беременных с ПР на фоне высокого уровня экспрессии гена ИФНγ продукция его в культуре лейкоцитов снижена, что свидетельствует о нарушении продукции ИФНγ на посттранскрипционном уровне. Соотношение индуцированной продукции ЛПК ИФНα к ИФНγ в 5 раз и более позволяет с высокой точностью прогнозировать ПР. Наиболее высокой чувствительностью (82,0%) к препаратам ИФНα (роферону А, интрону А) обладают лейкоциты беременных в группе с УГИ и ПР, т.е. с наиболее выраженными изменениями интерферонового статуса.

Проблема преждевременных родов (ПР) и внутриутробного инфицирования плода (ВУИ) в современном акушерстве продолжает оставаться актуальной и нерешенной [1–4].

На долю недоношенных детей приходится 60–70% ранней неонатальной смертности и 65–75% детской смертности. Мертворождаемость при ПР в 8–13 раз выше, чем при своевременных родах, а перинатальная смертность у недоношенных новорожденных в 33 раза выше, чем у доношенных [5, 6]. Следует отметить, что 40% ПР обусловлено инфекционными факторами, а ПР до 30 недель беременности имеют инфекционную этиологию в 80% случаев [7–10].

Несмотря на многочисленные научные и практические исследования в этой области, частота ПР не снижается, а в некоторых странах даже растет 11–13].

По современным представлениям, одной из причин развития ПР являются ограниченные возможности иммунной системы беременной своевременно распознавать и уничтожать инфекционные агенты. Это связано со смещением иммунного равновесия в организме беременной в сторону преобладания врожденного иммунитета над приобретенным [14–16].

Система цитокинов играет важную роль в течение всей беременности, регулируя процессы инвазии трофобласта, межклеточные взаимоотношения в эндометрии, воспалительные реакции [17]. При осложненном течении беременности на фоне урогенитальной инфекции (УГИ) отмечается увеличение в периферической крови провоспалительных цитокинов, что приводит к возрастанию продукции простагландинов и ферментов, способствующих сокращениям матки и раскрытию шейки матки [18, 19].

Дальнейшие исследования в этой области и поиск новых иммунологических маркеров невынашивания беременности позволят выявить пациенток групп риска по развитию ПР, своевременно проводить патогенетически обоснованную терапию с целью улучшения исходов беременности и родов, снижения перинатальной заболеваемости и смертности.

Целью нашего исследования стало определение диагностической и прогностической значимости комплексного исследования интерферонового статуса у беременных высокого инфекционного риска.

Материал и методы исследования

Нами проведено клинико-лабораторное обследование 100 пациенток и их новорожденных. Все пациентки были разделены на три группы. В I основную группу) вошли 65 беременных с наличием УГИ. Критериями включения пациенток в основную группу являлись: срок беременности от 25 до 32 недель, наличие УГИ, угроза ПР. Критериями исключения пациенток из основной группы являлись: многоплодная беременность, острые инфекционные, воспалительные заболевания, оперативное родоразрешение.

Основная группа проспективно в зависимости от исхода беременности была разделена на 
3 подгруппы: Iа подгруппа – 24 беременные с ПР и реализацией ВУИ; Iб подгруппа – 15 беременных с ПР без реализации ВУИ и Iв подгруппа – 
26 беременных со своевременными родами. Во II контрольную группу) вошли 20 пациенток без УГИ, у которых беременность завершилась своевременными родами. В III (группу сравнения) вошли 15 небеременных женщин (рис. ).

В обследованных группах изучали: данные соматического и акушерского анамнеза, течение настоящей беременности, особенности родового акта, состояние новорожденных. Всем пациенткам проводили комплексное клинико-лабораторное обследование (клинический анализ крови и мочи, определение группы крови и резус-фактора, биохимический анализ крови, гемостазиограмма, анализ микрофлоры влагалища и цервикального канала).

Определение экспрессии генов цитокинов в мононуклеарных клетках периферической крови пациенток проводили с использованием метода обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции (ОТ-ПЦР) [20].

Выделение РНК проводили по методике P. homczynski, N. Sacchi, [21] методом кислой гуанидин-тиоцианат-фенол-хлороформ экстракции. ОТ-ПЦР – амплификация были выполнены в соответствии с методикой, предложенной С.М. elder, P.S. Thomas [22]. В работе были использованы пары праймеров, последовательность которых получена из базы данных «PrimerBank»: интерферон (ИФН)-α [22], ИФН-γ 23], в качестве положительного контроля использовали β-актин [24]. Регистрацию результатов ПЦР осуществляли электрофорет...

Бахарева И.В., Ганковская Л.В., Романовская В.В., Мезенцева М.В., Магомедова А.М., Кузнецов П.А., Греченко В.В.