Определение белков теплового шока в моче, сыворотке крови и ткани почки: значение в оценке активности и прогноза хронического гломерулонефрита

Цель. Оценить состояние системы «самозащиты почки» у больных хроническим гломерулонефритом (ХГН) по уровню в моче, крови и экспрессии в почке основных белков теплового шока (БТШ), уточнить значение изменений этих факторов в оценке активности и прогноза ХГН.
Материал и методы. В исследование были включены 75 больных активным ХГН: 34 – с выраженным мочевым синдромом (I группа), 41 – с нефротическим синдромом (II группа), включая 31 с умеренным (IIA группа) и 10 с выраженным (IIБ группа). У 7 больных I группы и 14 II группы выявлено преходящее нарушение функции почек как проявление высокой активности ХГН. Контрольные группы – 10 пациентов с неактивным ХГН и 10 здоровых лиц. В обследованных группах методом ELISA в моче определены уровни БТШ-27 и БТШ-70, интерлейкинов (ИЛ)-10 и -6; в сыворотке крови – уровень антител к БТШ-70, в ткани почки исследована экспрессия БТШ-70.
Результаты. По мере нарастания активности ХГН (прежде всего увеличение протеинурии, развитие нефротического синдрома, особенно в сочетании с нарушением функции почек) формируется дисбаланс повреждающих и защитных механизмов. Об активности воспалительной реакции в ткани почки и выраженности клеточного повреждения у больных ХГН свидетельствует снижение уровня антител к БТШ-70 в сыворотке крови и противовоспалительного ИЛ-10 в моче при повышении экскреции с мочой БТШ-27, -70 и ИЛ-6. Прогрессирующий характер этих нарушений является неблагоприятным прогностическим признаком, указывающим на риск хронизации болезни и худшего ответа на лечение. Так, у 80% пациентов с высоким (более 21 пг/мл) уровнем антител к БТШ-79 ответ на лечение был получен в течение 12 месяцев, у 50% – в течение 5 месяцев. В то же время у 57% пациентов с титрами антител ниже 21 пг/мл нефротический синдром персистировал, несмотря на проводимое более года лечение, рекомендованное для данных форм заболевания.
Заключение. Результаты исследования демонстрируют важное значение БТШ как показателей, отражающих активацию механизмов клеточной защиты и внеклеточных эффектов регуляции иммунного воспаления в почке.

Введение

Среди механизмов, определяющих течение и исход заболеваний почек, в настоящее время наиболее изучены повреждающие звенья патогенеза. Однако в экспериментальных работах было показано, что течение патологического процесса в почке независимо от его этиологии определяется балансом локально воздействующих повреждающих факторов и противостоящих им механизмов самозащиты, среди которых особое место занимают белки теплового шока (БТШ) [1–3].

Благодаря достижениям современной молекулярной биологии и инновационным клеточным технологиям установлены фундаментальные защитные функции БТШ, которые заключаются в поддержании нормальной структуры белков в клетке [4].

Роль БТШ в механизмах, ограничивающих повреждение почечной ткани, а также иммунорегуляторная функция этих белков при хроническом гломерулонефрите (ХГН) изучены недостаточно. Данное направление исследований представлено главным образом экспериментальными и единичными клиническими работами по оценке экспрессии отдельных БТШ в различных структурах почки [5–7].

Вместе с тем изучение БТШ, способных модулировать процессы повреждения, приобретает особый интерес для понимания основных закономерностей прогрессирования ХГН и представляется перспективным для разработки новых методов торможения нефросклероза.

В связи с этим целью нашего исследования было оценить состояние системы «самозащиты» почки у больных ХГН по уровню в моче, крови и экспрессии в почке основных защитных БТШ, уточнить значение изменений этих факторов в оценке активности и прогноза ХГН.

Материал и методы

Обследованы 75 больных активными формами ХГН: 31 женщина и 44 мужчины в возрасте от 16 до 67 лет (в среднем 35,5 [27; 51] года), наблюдавшихся в клинике нефрологии, внутренних и профессиональных болезней им. Е.М. Тареева УКБ № 3 ГБОУ ВПО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова» с 2011 по 2013 г.

В I группу были включены 34 пациента с выраженным мочевым синдромом (МС), в т.ч. 23 больных, у которых ХГН изначально протекал с МС и персистировал в течение 7 [2; 12] месяцев, и 11 пациентов, у которых МС был результатом неполной ремиссии нефротического синдрома (НС). Клинически эта группа характеризовалась протеинурией от 1,0 до 3,5 г/сут (2,4 [1,24; 3,5] г/сут); у 13 больных выявлена изолированная протеинурия субнефротического уровня, у 17 – протеинурия сочеталась с умеренной, а у 4 – с выраженной эритроцитурией (более 50 в поле зрения).

У 7 больных I группы наряду с протеинурией выявлено преходящее нарушение функции почек (креатинин – от 1,26 до 2,97 мг/дл, в среднем 1,35 [1,27; 1,71] мг/дл, скорость клубочковой фильтрации – 53,5 [49; 67]) как проявление высокой активности нефрита. У 3 пациентов, несмотря на прием антигипертензивных препаратов, выявлена умеренная (АД 160–170/100 мм рт. ст.), у 2 – высокая артериальная гипертензия (АД до 190/120 мм рт. ст.). Длительность нефрита в этой группе составила в среднем 45 [9,5; 96] месяцев.

Во II группу вошел 41 больной ХГН с НС. По степени тяжести НС были выделены: подгруппа IIА – 31 пациент с умеренным НС (протеинурия 6,4 [4,8; 10] г/сут, альбумин сыворотки 27,7 [24,8; 30] г/л, общий белок сыворотки 46,6 [43,2; 49,7]); подгруппа IIБ – 10 больных с выраженным НС (анасарка, протеинурия 11,32 [7,52; 18] г/сут, гипоальбуминемия менее 20 г/л, в среднем – 19 [17,7; 19,9] г/л, общий белок сыворотки 34,45 [33,6–38,7] г/л).

У 15 больных II группы НС сочетался с гематурией (от 10–15 до сплошь в поле зрения). Артериальная гипертензия отмечена у 9 пациентов: у 6 – умеренная (АД 160–170/100 мм рт. ст.), у 3 – высокая (АД до 180/110 мм рт. ст.).

У 14 больных II группы наряду с НС выявлено преходящее нарушение функции почек (креатинин 1,55 [1,39; 1,99] мг/дл, скорость клубочковой фильтрации – 53 [42; 71]) как проявление высокой активности нефрита, у 6 из них также отмечена выраженная гематурия и артериальная гипертензия, которые расценивались в рамках остронефритического синдрома. Длительность нефрита во II группе составила в среднем 11,5 [4; 42,5] месяцев, длительность НС к моменту обследования – 4,0 [2; 7] месяца.

В отношении 72 больных диагноз ХГН был подтвержден морфологически: у 29 выявлен мезангиопролиферативный нефрит, у 13 – мезангиокапиллярный нефрит, у 13 – мембранозный нефрит (МН), у 7 – фокально-сегментарный гломерулосклероз (ФСГС), у 4 – болезнь минимальных изменений (БМИ), у 6 – нефросклероз в исходе ХГН.

Группы сравнения были представлены 10 пациентами с неактивным ХГН (протеинурия менее 0,5 г/сут – в среднем 0,23 [0,18; 0,3] г/сут, у двух больных микрогематурия до 15–20 в поле зрения, артериальная гипертензия отсутствовала или была умеренной, поддавалась коррекции антигипертензивными препаратами); а также 10 здоровыми лицами, сопоставимыми по полу и возрасту.

Наряду с общеклиническим обследованием нами были изучены:

В моче (методом ЕLISA):

• уровни БТШ-27 и -70 – защитных белко...

Н.В. Чеботарева, Н.В. Непринцева, И.Н. Бобкова, Л.В. Козловская, В.А. Варшавский.