Определение экскреции с мочой моноцитарного хемотаксического протеина-1 и трансформирующего фактора роста-β1 у больных хроническим гломерулонефритом как метод оценки процессов фиброгенеза в почке

Цель исследования. Определить содержание в моче и почечной ткани больных ХГН профиброгенных медиаторов – моноцитарного хемотаксического протеина (МСР-1) и трансформирующего фактора роста-?1 (TGF-?1), а также уточнить их значение для оценки процессов воспаления и фиброза в почке и как критериев прогноза. Материал и методы. Обследованы 83 больных активным ХГН (I группа – с умеренным мочевым синдромом, II – с нефротическим синдромом (НС), III группа – с высокой протеинурией, артериальной гипертензией и прогрессирующей почечной недостаточностью), изучена экскреция с мочой МСР-1 и TGF-?1методом ELISA. Контрольную группу составили 12 здоровых лиц. Проведена морфометрия 25 биоптатов почек с измерением площади интерстиция, степени клеточной воспалительной инфильтрации интерстиция, а также степени интерстициальной экспрессии ?-ГМА – основного маркера миофибробластов.

Результаты. Уровень мочевой экскреции МСР-1 был выше во всех группах больных активным ХГН, чем у здоровых лиц, причем у больных с НС (II группа) достоверно выше, чем у больных с умеренным мочевым синдромом (I группа). Особенно высоким мочевой показатель МСР-1 был у больных III группы. Уровень TGF-?1 был также выше у больных ХГН, чем у здоровых лиц. Экскреция TGF-?1 зависела главным образом от величины креатининемии; наиболее высокой она была у больных с тяжелым прогрессирующим течением нефрита со стойким нарушением функции почек (III группа). Выявлена прямая корреляция между уровнем экскреции МСР-1 с мочой и выраженностью воспалительной клеточной инфильтрации интерстиция (RS = 0,8; p < 0,001). Мочевые показатели МСР-1 и TGF-?1 коррелировали и с величиной ТИФ, оцененной по площади интерстиция (RS = 0,78; p < 0,001 и RS = 0,5; p < 0,05 соответственно), и с количеством основных продуцентов ТИФ – интерстициальных мифибробластов, экспрессирующих ?-ГМА (RS = 0,64; p < 0,05 и RS = 0,65; р < 0,05 соответственно).

Заключение. Результаты исследования демонстрируют важную роль МСР-1 и TGF-?1 в процессе ремоделирования тубулоинтерстиция. Изученные показатели являются маркерами ТИФ, а определение уровня МСР-1 и TGF-?1 в моче является информативным неинвазивным методом, позволяющим мониторировать активность заболевания и стадии фиброза, оценивать прогноз ХГН.

Одной из наиболее важных проблем нефрологии является изучение механизмов прогрессирования хронического гломерулонефрита (ХГН) с целью поиска новых путей торможения фиброза в почке и отдаления развития терминальной почечной недостаточности, требующей применения дорогостоящей заместительной почечной терапии. В настоящее время благодаря многочисленным исследованиям, главным образом в эксперименте, подтверждено первостепенное значение тубулоинтерстициального фиброза (ТИФ) как патоморфологической основы почечной недостаточности и установлена важная роль протеинурии (ПУ) в его развитии [1]. Показано, что нефротоксический эффект ПУ реализуется через интерстициальное воспаление, заканчивающееся развитием ТИФ [2, 3].

Центральным звеном в этих механизмах является активация тубулярных эпителиальных клеток под действием повреждающих компонентов ПУ с продукцией ими молекулярных медиаторов воспаления и фиброза – моноцитарного хемотаксического протеина-1 (МСР-1) и трансформирующего фактора роста-β1 (TGF-β1), осуществляющих паракринно-аутокринную регуляцию процессов формирования и прогрессирования ТИФ [3, 4]. В основе ТИФ лежат процессы накопления компонентов экстрацеллюлярного матрикса (ЭЦМ) (фибронектина, коллагена I, III, IV типов, ламинина и гепарансульфат-протеогликанов) и апоптоз тубулярных клеток, ведущие к атрофии канальцев, расширению интерстициального объема и потере перитубулярных капилляров [5, 6].

В последние годы появилась возможность определения отдельных молекулярных медиаторов воспаления в моче больных ХГН, однако имеются лишь единичные клинические работы, демонстрирующие взаимосвязь уровня экскреции МСР-1 и TGF-β1 со степенью выраженности тубулоинтерстициального повреждения и фиброза [7, 8].

Цель исследования: Определить содержание в моче больных ХГН хемокина МСР-1 и TGF-β1, уточнить их значение для оценки интерстициального фиброза в почке и как критериев прогрессирования заболевания.

Материал и методы

Обследованы 83 больных активными формами ХГН: 49 (59 %) женщин и 34 (41 %) мужчин в возрасте от 15 до 69 лет (средний возраст – 33 ± 13,8 года). Контрольную группу составили 12 здоровых лиц, сопоставимых по полу и возрасту с обследованными больными ХГН: 6 мужчин и 6 женщин от 21 до 37 лет (средний возраст – 29 ± 5 лет). Среди 83 обследованных больных ХГН диагноз был подтвержден морфологически у 45: у 15 выявлен мезангиопролиферативный нефрит, у 10 – мезангиокапиллярный нефрит, у 6 – мембранозный нефрит, у 4 – фокально-сегментраный гломерулосклероз, у 3 – нефрит с минимальными изменениями, у 7 – фибропластический гломерулонефрит.

Результаты исследования молекулярных медиаторов сравнивали в трех группах больных, различающихся по степени активности ХГН и выраженности почечной недостаточности. Первую группу составили 26 больных с умеренным мочевым синдромом, у которых наблюдалось обострение заболевания (нарастание протеинурии, усиление гематурии). Протеинурия в этой группе составила в среднем 1,3 ± 0,2 г/сут; у 7 отмечена изолированная протеинурия субнефротического уровня, у 9 протеинурия сочеталась с умеренной эритроцитурией (до 30–40 в п/зр.) и у 10 – с выраженной эритроцитурией (сплошь все п/зр.). Функция почек у всех больных I группы была в пределах нормы (креатинин сыворотки крови – 1,06 ± 0,04 мг/дл), артериальная гипертензия (максимально до 170/100 мм рт. ст.) наблюдалась у 3 больных. Длительность нефрита в I группе составила от 1,5 месяцев до 20 лет (в среднем – 6,6 ± 1,2 года).

Во II группу включены 38 пациентов с нефротическим синдромом (НС), признаки которого были отчетливо выражены: отеки различной степени и локализации, протеинурия, в отдельных случаях достигавшая 12,0–13,5 г/сут (в среднем – 5,5 ± 0,6 г/сут), гипоальбуминемия (2,50 ± 0,11 г/дл). У 19 больных наряду с массивной протеинурией выявлено преходящее нарушение функции почек (креатинин – от 1,6 до 2,8 мг/дл, в среднем – 1,9 ± 0,07 мг/дл) как показатель высокой активности нефрита, среди них у 12 также отмечены гематурия, артериальная гипертония (остронефритический синдром). Длительность нефрита во II группе составила в среднем 2,7 ± 0,7года, длительность НС к моменту обследования – 6,60 ± 0,86 месяца.

В III группу вошли 19 пациентов с выраженной протеинурией (у 13 – нефротического уровня, в среднем – 4,6 ± 0,8 г/сут), гематурией (от 10–15 в п/зр. до сплошь в п/зр.), со стойким нарушением функции почек, в отличие от предыдущей группы (креатинин сыворотки крови в среднем 3,6 ± 0,8 мг/дл), и тяжелой артериальной гипертензией (артериальное давление (АД) систолическое – 160–220 мм рт. ст., АД диастолическое – 100–130 мм рт. ст.). При морфологическом исследовании ткани почки у больных этой группы выявлен значительный фиброз. Длительность нефрита в III группе составила в среднем 4,5 ± 1,0 год.

Уровень экскреции с мочой МСР-1 и TGF-β1 исследовали у 63 больных методом непрямого иммуноферментного анализа (ELISA). Для определения уровня МСР-1 в моче больных ХГН использовали систему BioSource International, Immunoassay Kit; США, Бе...

Н.В.Чеботарева, И.Н Бобкова, Л.В.Козловская, В.А. Варшавский, Е.П. Голицына