Определение терапевтической эффективности различных концентраций сивелестата на лабораторной модели псориаза (Часть 1)

Обоснование. Псориаз – распространенное хроническое мультифакториальное иммуноопосредованное воспалительное заболевание кожи, характеризующееся повышенной скоростью деления кератиноцитов. Результаты недавних исследований показали, что интерлейкин-36 (ИЛ-36) занимает значимое место в инициации и регуляции воспалительного процесса при псориазе. ИЛ-36 в коже находится в неактивной форме, а для его активации необходимы нейтрофильные сериновые протеазы. Эти данные обусловили научный интерес к изучению нового направления в наружной терапии больных псориазом на основании местного ингибирования сериновых протеаз. Для проверки данной гипотезы нами разработан препарат в наружной лекарственной форме на основе ингибитора сериновых протеаз – сивелестата. Цель исследования: оценка терапевтической эффективности различных концентраций топического ингибитора сериновых протеаз (крема сивелестата) на лабораторной модели псориаза. Методы. Для сравнения эффективности различных концентраций cивелестата в подавлении воспалительной реакции в коже использовали крем (ланолин+масло оливковое+вода в равных долях), содержащий сивелестат в концентрациях 0,5, 1 и 5%. Работа проводилась на 40 инбредных мышах линии BALB/c, рандомизированных в 4 группы по 10 животных. Для проведения опыта предварительно сформировали экспериментальную модель псориаза на лабораторных животных. Терапевтическую эффективность различных концентраций сивелестата определяли по результатам оценки клинических и гистологических методов исследования. Результаты. На 10-й день исследования в группах 1 (контроль) и 2 (0,1%-ный сивелестат) клинические изменения были ярко выражены, в группах 3 (1%-ный сивелестат) и 4 (5%-ный сивелестат) наблюдалось разрешение элементов кожной сыпи, более выраженное в последней группе. К 10-му дню исследования наиболее сильное снижение индекса mPASI наблюдалось в группах 4 (сивелестат 5%) и 3 (сивелестат 1%), значимо отличавшееся от показателей в группах 1 и 2 (p<0,05). При сравнении показателей индекс mPASI группы 4 значимо отличался от такового группы 3 (p<0,05). Установлено, что толщина эпидермиса животных группы 4 (сивелестат 5%) была в 1–2,7 раза меньше, чем в других группах (1, 2, 3; p<0,05). Между собой группы 1 (контроль), 2 (сивелестат 0,1%) и 3 (сивелестат 1%) по толщине эпидермиса значимо не различались. Заключение. 5%-ный крем сивелестат при наружном нанесении 1 раз в день в течение 5 дней на лабораторной модели имиквимод-индуцированного псориаза обладает высокой терапевтической эффективностью по сравнению с контрольной группой и группами 0,1- и 1%-ного крема сивелестата. При использовании 5%-ного крема сивелестата выраженность клинических проявлений по mPASI было ниже на 70%, а гистологических по толщине эпидермиса ниже на 63%, чем в контрольной группе.

Введение

Псориаз – распространенное хроническое мультифакториальное иммуноопосредованное воспалительное заболевание кожи, характеризующееся повышенной скоростью деления кератиноцитов [1].

Одно из ключевых значений в патогенезе псориаза в настоящее время придают цитокину интерлейкину-36 (ИЛ-36) [2]. С одной стороны, он всегда присутствует в коже и действует непосредственно на кератиноциты.

С другой – для активации ИЛ-36 необходим протеолитический процессинг, возможный только при участии сериновых протеаз нейтрофилов. На основании этих сведений можно предположить, что инактивация сериновых протеаз приведет к подавлению ИЛ-36-опосредованного воспаления в коже и позволит добиться ремиссии заболевания у больных псориазом [3, 4].

Для проверки гипотезы о возможности местного подавления развития псориатического воспаления нами был создан наружный препарат – крем, содержащий ингибитор сериновых протеаз (сивелестат).

Сивелестат – селективный, обратимый конкурентный ингибитор нейтрофильной эластазы, не влияющий на функции других протеаз человека. При системном назначении сивелестата происходит значительное снижение уровня фактора некроза опухоли α и ИЛ-6 в сыворотке крови посредством ингибирования NF-kB клеточного механизма [5].

Цель исследования: оценка терапевтической эффективности различных концентраций топического ингибитора сериновых протеаз (крема сивелестата) на лабораторной модели псориаза.

Методы

Для сравнения эффективности различных концентраций cивелестата в подавлении воспалительной реакции в коже использовали крем (ланолин+масло оливковое+вода в равных долях), содержащий сивелестат в концентрации 0,5, 1 и 5% (табл. 1).

Работа проводилась на 40 инбредных мышах линии BALB/c, рандомизированных в 4 группы по 10 животных, согласно представленному дизайну (рис. 1).

Для проведения опыта предварительно сформировали экспериментальную имиквимод-индуцированную лабораторную модель псориаза, согласно патенту RU 2736000 C1. После окончания карантина лабораторных животных волосы на коже спины однократно брили бритвой с острым лезвием, не допуская порезов. Начиная со следующего дня на кожу спины равномерно наносили препарат имиквимод ...

А.С. Жуков, Е.Р. Жарун, М.А. Чайкина, А.А. Чернышова, В.Р. Хайрутдинов, А.В. Самцов, А.В. Гарабаджиу