Особенности аллельного полиморфизма генов интерлейкинов и цитокиновый баланс женщин с невынашиванием беременности

Цель исследования. Определение цитокинового баланса сыворотки крови женщин с синдромом потери плода и оценка значимости SNP полиморфизмов генов в развитии этого состояния.
Материал и методы. Исследована периферическая кровь женщин с физиологическим течением беременности, с синдромом потери плода и небеременных здоровых женщин без репродуктивных потерь. Определяли содержание цитокинов и аллельный полиморфизмом их генов.
Результаты. У беременных женщин с синдромом потери плода наблюдаются нарушения баланса про- и противовоспалительных цитокинов за счет повышения уровня IL-10, IL-6, IL-17а, TNFα. При этом, чаще встречаются гетерозиготы по полиморфным маркерам генов IL-10 (мутация 1, G-1082A), IL-4 (C-589-T), TNFα (G-308A), IL-17f His161Arg (7488A/G).
Заключение. Преобладание провоспалительных цитокинов (TNFα и IL-17а) на фоне высокого уровня противовоспалительных (IL-10 и IL-4) свидетельствует о нарушении процесса физиологической перестройки иммунной системы в иммуносупрессорном направлении ко второму триместру беременности у беременных с синдромом потери плода в анамнезе. При этом гетерозиготы по полиморфным маркерам генов IL-10 (мутация 1, G-1082A), IL-4 (C-589-T), TNFα (G-308A), IL-17f His161Arg (7488A/G) встречаются значимо чаще.

В настоящее время проблема невынашивания беременности остается одной из ведущих в современном акушерстве. Актуальность данной проблемы связана с распространенностью этой патологии в структуре репродуктивных потерь, составляющей 15–20% всех клинически выявленных беременностей [1]. Поэтому поиск информативных маркеров-предикторов такого осложнения беременности представляет определенный научный и практический интерес. Особое значение имеют прогнозирование и доклиническая диагностика нарушений развития беременности [2, 3].

Несмотря на мультифакторную природу невынашивания беременности, одними из первостепенных причин являются иммунологические и генетические [4–6].

В последние годы внимание исследователей привлекает роль естественных Т-регуляторных клеток в индукции толерантности к аллоантигенам плода, которые в свою очередь позволяют расценивать их в качестве основных претендентов на роль клеток, контролирующих баланс в системе «мать-плод», а также предположить их участие в патогенезе невынашивания беременности [7]. Однако сообщения об этом в доступной литературе практически отсутствуют. В этом аспекте представляет интерес оценка местного цитокинового статуса, баланса и синтеза цитокинов периферической крови у женщин репродуктивного возраста [8–11].

Целью настоящего исследования является определение цитокинового баланса в сыворотке крови женщин с синдромом потери плода в анамнезе, а также выявление прогностической значимости полиморфизма генов в развитии данного состояния.

Материал и методы исследования

Обследованы 192 пациентки, наблюдающиеся в МУЗ Женская консультация № 5 и МУЗ Женская консультация № 6 г. Волгограда. Все обследуемые были разделены на три группы. Первую группу составили 39 женщин с физиологическим течением беременности, вторую – 64 беременных с синдромом потери плода в анамнезе. Группы были репрезентативны по возрасту (29±4,05 года) и сроку гестации (18±3,2 недели). Третью (контрольную) группу составили 89 небеременных соматически здоровых женщин без репродуктивных потерь в анамнезе (средний возраст 27,8±5,06 года).

Материалом для исследования послужила периферическая кровь пациенток, полученная при плановом посещении врача без проведения дополнительных манипуляций. Цитокины определялись с помощью наборов реактивов для иммуноферментного анализа производства ООО «Цитокин» (Санкт-Петербург): «ИФА-интерлейкин (IL-)-4», «ИФА-IL-6», «ИФА-IL-17а», «ИФА-IL-10», «ИФА-IL-1β», «ИФА-интерферон (IFN)-γ», «ИФА-фактор некроза опухоли (TNF)-α» на фотометре иммуноферментном планшетном «Эфос» 9305 (ОАО «Московский завод Сапфир», Москва). В наборах использован «сэндвич»-вариант твердофазного иммуноферментного анализа. Концентрация интерлейкинов в определяемых образцах рассчитывалась на основании калибровочной кривой, построенной по полученным значениям калибровочных проб. Исследование генетических полиморфизмов проводили с помощью диагностических наборов для выявления полиморфизмов в геноме человека методом полимеразной цепной реакции «SNP-экспресс» производства НПФ «Литех». Для исследования полиморфизмов генов провоспалительных цитокинов применялись наборы «Мутация интерлейкина 1β» (ген – IL-1β, полиморфизм – Т-31С), «Мутация интерлейкина 12β» (ген – IL-12β, полиморфизм – А1188С), «Мутация фактора некроза опухоли α» (ген – TNF, полиморфизм – G-308A), «Мутация интерлейкина 17а» (ген – IL-17a, полиморфизм – G-197A), «Мутация интерлейкина 17f» (ген – IL-17f, полиморфизм – His161Arg), «Мутация интерлейкина 6» (ген – IL-6, полиморфизм – C-174G), «Мутация интерлейкина 2» (ген – IL-2, полиморфизм – T-330G).

Для обнаружения полиморфизма генов противовоспалительных цитокинов использовались наборы «Мутация-1 интерлейкина 10» (ген – IL-10, полиморфизм – G-1082A), «Мутаци...

Питиримова Л.Н., Загороднева Е.А., Гумилевский Б.Ю.