Особенности морфологической картины хронического 16-недельного экспериментального оксалатного нефролитиаза

DOI: https://dx.doi.org/10.18565/urology.2018.5.13-15

13.12.2018
14

ФГБОУ ВО «Алтайский государственный медицинский университет» Минздрава России, Барнаул, Россия

Цель исследования: изучить морфологическую картину хронического оксалатного нефролитиаза.
Материалы и методы: Экспериментальный оксалатный нефролитиаз моделировался у крыс путем потребления в течение 16 нед. 1%-ного раствора этиленгликоля в виде питья. Материалом для проведения морфологических исследований являлись почки крыс.
Результаты. По прошествии 16 нед. моделирования оксалатного нефролитиаза во всех отделах почек крыс формируются крупные уролиты, обтурирующие почечные канальцы. Кроме того, развивается гнойный калькулезный пиелонефрит с исходом в фиброз.

Введение. Оксалатный нефролитиаз – основная патогенетическая форма мочекаменной болезни (МКБ), на долю которой приходится до 80% всех случаев заболевания [1, 2]. Поскольку МКБ охватывает 8–10% населения развитых стран мира, вопрос изучения патогенеза нефролитиаза и поиска методов его коррекции весьма актуален [2].

В течение последних лет нами была воспроизведена и отработана технология моделирования экспериментального оксалатного нефролитиаза на животных с целью изучения особенностей патогенеза и поиска новых методов фармакологического лечения МКБ [3, 4]. Установлено, что при моделировании патологии устойчивая картина нефролитиаза у крыс формируется к исходу 3-й недели опыта, а для достоверной оценки эффективности апробируемых методов фармакологической коррекции нефролитиаза достаточной продолжительностью эксперимента является 6 нед. [4, 5].

В то же время хорошо известно, что оксалатный нефролитиаз у людей чаще всего носит хронический характер. И зачастую он протекает бессимптомно до тех пор, пока в почках не формируется крупный конкремент [6]. По этой причине высокую актуальность приобретает вопрос экспериментального поиска патогенетических мишеней для таргетной коррекции именно хронической формы оксалатного нефролитиаза.

Цель исследования: изучить морфологическую картину хронического оксалатного нефролитиаза.

Материалы и методы. Исследование проведено на 12 крысах-самцах сток Вистар массой 250–300 г в возрасте 2–3 мес. На протяжении всего периода эксперимента животные находились в стандартных условиях содержания в виварии, ежедневно получая в качестве питания корм для лабораторных грызунов из расчета 30–40 г на одну особь. Моделирование оксалатного нефролитиаза осуществлено в соответствии с общепринятой этиленгликолевой моделью, согласно которой животные в качестве питья постоянно получали 1%-ный раствор этиленгликоля в свободном доступе [7]. Для обеспечения хронизации моделируемого нефролитиаза стандартный срок моделирования в 6 нед. был увеличен в 2,5 раза и составил 16 нед. Исследования выполняли с соблюдением принципов гуманности, изложенных в директивах Европейского сообщества (86/609/ЕЕС) и Хельсинкской декларации, в соответствии с Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных.

По истечении 16 нед. опыта крыс подвергали эвтаназии под эфирным наркозом и изымали обе почки для проведения морфологических исследований. Почки фиксировали в 10%-ном растворе нейтрального формалина, проводили по стандартной методике и заливали в парафин. Гистологические срезы толщиной 4–5 мкм окрашивали гематоксилином и эозином по методу Косса на кальций и по Маллори на соединительную ткань.

Морфометрическое исследование срезов почек подопытных крыс проведено с целью выявления кальциевых депозитов, формирующихся в области почечного сосочка, с последующим измерением их размеров и количества в поле зрения.

Морфометрические исследования проведены с помощью аппаратно-программного комплекса, состоящего из программного обеспечения для морфометрического анализа ВидиоТест-Морфология 5.2, цифровой камеры VIDI CAM (Россия), адаптированной к световому микроскопу Nikon Eclipse E200 (Япония) и персонального компьютера.

Статистическую обработку полученных данных провели в программе SigmaStat 3.5 для Windows (Systat Software, Inc., США, 2006). Результаты работы представлены в виде средней () и ошибки средней (m). Оценку межгрупповых различий провели по критерию Данна и Манна–Уитни. Кроме того, с использованием критерия Манна–Уитни проведено статистическое сравнение основных морфометрических показателей по результатам моделирования оксалатного нефролитиаза у крыс в течение 16 и 6 нед. Различия считали статистически значимыми при p

Результаты и обсуждение. Морфологическое исследование почек крыс после 16-недельного моделирования оксалатного нефролитиаза при окраске по Коссу выявило во всех отделах почки отложения солей кальция. Как правило, депозиты кальция обтурировали просвет канальцев (см....

Список литературы

1. Han H., Segal A.M., Seifter J.L., Dwyer J.T. Nutritional Management of Kidney Stones (Nephrolithiasis). Clin Nutr Res. 2015;4(3):137–152.

2. Ziemba J.B., Matlaga B.R. Epidemiology and economics of nephrolithiasis. Investig Clin Urol. 2017;58(5):299–306.

3. Bryukhanov V.M., Zverev Ya.F., Lampatov V.V., Zharikov A.Yu., Azarova O.V., Motin Yu.G. Function of the kidneys under conditions of experimental oxalate nephrolithiasis. Nephrologiya. 2008;12(1):69–74. Russian (Брюханов В.М., Зверев Я.Ф., Лампатов В.В., Жариков А.Ю.,Азарова О.В., Мотин Ю.Г. Функция почек в условиях экспериментального оксалатного нефролитиаза Нефрология. 2008;12(1):69–74).

4. Zharikov A.Yu., Zverev Ya.F., Lampatov V.V., Bryukhanov V.M.,Azarova O.V., Talalaeva O.S., Motin Yu .G. The application of vicasole as a perspective nephrolithyiasis pharmacological correction’s drug. Byulleten’ sibirskoy medicini. 2012;11(1):18–24. (Жариков А.Ю., Зверев Я.Ф., Лампатов В.В., Брюханов В.М., Азарова О.В., Талалаева О.С., Мотин Ю.Г. Применение викасола как перспективного средства фармакологической коррекции экспериментального нефролитиаза. Бюллетень сибирской медицины. 2012;11(1):18–24).

5. Motin Yu .G., Lapiy G.A., Lepilov A.V., Bgatova N.P., Zharikov A.Yu., Motina N.V., Nepomnyaschich L.M. Morphological study of rat kidney during experimental oxalate nephrolithiasis. Fundamental’nye issledovanija. 2015;1–8:1639–1644. (Мотин Ю.Г., Лапий Г.А., Лепилов А.В., Бгатова Н.П., Жариков А.Ю., Мотина Н.В., Непомнящих Л.М. Морфологическое исследование почек крыс при экспериментальном оксалатном нефролитиазе. Фундаментальные исследования. 2015;1–8:1639–1644).

6. Scales C.D. Jr, Tasian G.E., Schwaderer A.L., Goldfarb D.S., Star R.A., Kirkali Z. Urinary Stone Disease: Advancing Knowledge, Patient Care, and Population Health. Clin J Am Soc Nephrol. 2016;11(7):1305–1312.

7. Zharikov A.Yu., Bryukhanov V.M., Zverev Ya.F., Lampatov V.V. Current methods of modeling of oxalate nephrolithiasis. Nephrologiya. 2008;12(4):28–35. Russian (Жариков А.Ю., Брюханов В.М.,Зверев Я.Ф., Лампатов В.В. Современные методы моделирования оксалатного нефролитиаза. Нефрология. 2008;12(4):28–35).

8. Khan S.R., Pearle M.S., Robertson W.G., Gambaro G., Canales B.K., Doizi S., Traxer O., Tiselius H.G. Kidney stones. Nat Rev Dis Primers. 2016;25;2:16008. Doi: 10.1038/nrdp.2016.8.

9. O’Kell A.L., Grant D.C., Khan S.R. Pathogenesis of calcium oxalate urinary stone disease: species comparison of humans, dogs, and cats. Urolithiasis. 2017;45(4):329–336.

Об авторах / Для корреспонденции

А в т о р д л я с в я з и: Г. В. Жарикова – преподаватель кафедры общей и биологической химии, клинической
лабораторной диагностики ФГБОУ ВО «Алтайский государственный медицинский университет» Минздрава России;
Барнаул, Россия; е-mail: ganna1704@mail.ru

Полный текст публикаций доступен только подписчикам

Нет комментариев

Комментариев: 0

Вы не можете оставлять комментарии
Пожалуйста, авторизуйтесь