STROKE №1 (33) / 2014
Полногеномный анализ вариабельности уровня артериального давления и риска развития ишемического инсульта
Imperial College Cerebrovascular Research Unit (ICCRU) and International Centre for Circulatory Health, Imperial College London, London, United Kingdom; Centre for Clinical Epidemiology and Biostatistics, School of Medicine and Public Health, School of Nursing and Midwifery, and School of Biomedical Sciences and Pharmacy, University of Newcastle, Newcastle, New South Wales, Australia; Hunter Medical Research Institute, Newcastle, New South Wales, Australia; Institute for Stroke and Dementia Research, Medical Centre, Klinikum der Universität München, Ludwig-Maximilians-University, Munich, Germany; Munich Cluster for Systems Neurology (SyNergy), Munich, Germany; Stroke and Dementia Research Centre, St. George’s University of London, London, United Kingdom; Department of Neurology, Mayo Clinic, Jacksonville, FL; Baltimore Veterans Affairs Medical Centre, Baltimore, MD; Laboratory of Neurogenetics, National Institute on Aging, US National Institutes of Health, Bethesda, MD; Departments of Neurology and Public Health Sciences, Division of Cardiovascular Medicine, Department of Internal Medicine, Center for Public Health Genomics, Department of Public Health Science, University of Virginia, Charlottesville, VA; Division of Clinical Neurosciences, Institute of Genetics and Molecular Medicine, University of Edinburgh, Edinburgh, Australia; Department of Clinical Neurology, John Radcliffe Hospital, Oxford, United Kingdom; UCL Genetics Institute, University College London, London, United Kingdom; Division of Applied Medicine, University of Aberdeen, Aberdeen, United Kingdom; Centre for Genetic Origins of Health and Disease, University of Western Australia, Crawley, Western Australia, Australia; Molecular and Cellular Therapeutics, Royal College of Surgeons in Ireland, Dublin 2, Ireland; Conway Institute of Biomolecular and Biomedical Research, University College Dublin, Dublin 4, Ireland; Centre for Clinical Pharmacology, William Harvey Research Institute, Barts and the London Medical School, London, United Kingdom; Department of Neurosciences, Gosford Hospital, Central Coast Area Health, Gosford, New South Wales, Australia; Division of Genetics, Hunter Area Pathology Service, Newcastle, New South Wales, Australia; Department of Medicine, University of Maryland, Baltimore, MD; and Longitudinal Studies Section, Clinical Research Branch, National Institute on Aging, National Institutes of Health, Baltimore, MD.
Предпосылки и цель исследования. Вариабельность уровня артериального давления (вАД) ассоциирована с развитием ишемического инсульта (ИИ). Цель исследования заключалась в определении генетических основ такой вариабельности и ассоциации между генетическими вариантами, связанными с вАД и ИИ. Методы. Исследование полногеномных ассоциаций (ИПГА) локусов, оказывающих влияние на вариабельность АД, было проведено с участием 3802 человек из исследования Anglo-Scandinavian Cardiac Outcome Trial (ASCOT), в котором были доступны долгосрочные данные о показателях уровня АД между визитами к врачу и в рамках каждого отдельного визита. Поскольку вариабельность уровня АД ассоциирована с развитием ИИ, мы генотипировали сигнальный однонуклеотидный полиморфизм в независимой выборке пациентов с ИИ, состоящей из 8624 человек, и у 12 722 лиц контрольной группы, и также у 3900 лиц дополнительной контрольной группы (скандинавской), состоявшей из участников исследования ASCOT для репликации наших результатов. Результаты. ИПГА ASCOT позволило обнаружить кластер из 17 коррелированных однонуклеотидных полиморфизмов в гене NLGN1 (3q26.31), ассоциированном с вариабельностью АД. Наиболее сильная ассоциация была с rs976683 (р=1,4×10-8). Условный анализ rs976683 не представил доказательств наличия дополнительных независимых ассоциаций в локусе. При анализе rs976683 у пациентов с ИИ не обнаружили ассоциации его с инсультом в целом (отношение шансов [ОШ]=1,02, 95% доверительный интервал [ДИ] от 0,97 до 1,07; р=0,52) или его вариантами: кардиоэмболическим (ОШ=1,07, 95% ДИ от 0,97 до 1,16; р=0,17), атротромботическим, связанным с поражением крупной артерии (ОШ=0,98, 95 % ДИ от 0,89 до 1,07; р=0,60) и с болезнью мелких сосудов (ОШ=1,07, 95% ДИ от 0,97 до 1,17; р=0,19). Не обнаружили доказательств наличия ассоциации между rs976683 и вариабельностью АД в дополнительной (скандинавской) выборке испытания ASCOT (р=0,18). Выводы. Мы обнаружили кластер однонуклеотидных полиморфизмов в локусе NLGN1, со значимой ассоциацией с вариабельностью уровня АД. По результатам дальнейших анализов не выявили ассоциации полиморфизмов локуса с риском развития ИИ и его вариантов.
Генетические исследования давно представили доказательства наследуемости (31–68%) уровня артериального давления (АД) [1]. В последние годы был достигнут существенный прогресс в понимании генетических основ различных показателей АД (систолическое АД – САД, диастолическое АД – ДАД, среднее артериальное давление и пульсовое давление) [2–7]. Однако эпизодическая артериальная гипертензия (АГ), или вариабельность АД, остается недостаточно изученной, несмотря на наличие доказательств, подтверждающих ее роль в качестве фактора риска развития сосудистых событий [8]. Вариабельность САД является четким предиктором развития ишемического инсульта (ИИ) независимо от среднего АД [9], особенно у лиц, страдающих АГ с наибольшей вариабельностью АД в течение ряда измерений, с наибольшим риском развития сердечно-сосудистых катастроф [8, 10].
Определение генетической основы вариабельности АД затруднительно, учитывая отсутствие проспективных когортных исследований с данными о показателях АД при серии последовательных измерений, и сопровождающихся данными исследований полногеномных ассоциаций (ИПГА). Исследование Anglo-Scandinavian Cardiac Outcome Trial (ASCOT) является продольным исследованием по изучению влияния блокаторов кальциевых каналов по сравнению с β-адреноблокаторами у лиц, страдающих АГ с умеренным риском развития сердечно-сосудистых событий, зачисленных в исследование в Великобритании, Ирландии и странах Северной Европы с 1998 по 2000 г. [11]. Вариабельность АД оценивали в течение >5 лет, провели полногеномое генотипирование для выборок из исследований ASCOT, ASCOT-United Kingdom-Ireland cohort (ASCOT-UK-IR), которые позволили выполнить ИПГА для генетических вариантов риска вариабельности АД.
Поскольку мы предположили, что вариабельность АД больше ассоциирована с риском развития ИИ, чем геморрагического [8], и поскольку АГ является одним из основных модифицируемых факторов риска, любой генетический вариант, ассоциированный с вариабельностью АД, также будет ассоциирован с ИИ. На основе результатов недавно опубликованных ИПГА [12, 13], которые показывали зависимость генетического риска развития инсульта от его варианта, мы изучали генетический вариант по вариантам ИИ. С целью репликации полученных результатов мы также изучили генетический вариант для ассоциации с вариабельностью АД в независимой выборке лиц из скандинавской когорты исследования ASCOT (зачисленной в исследование ASCOT в Дании, Финляндии, Норвегии и Швеции [ASCOT-DK-FI-NO-SE]).
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Исследуемые выборки ASCOT
ASCOT-Blood Pressure–Lowering Arm (ASCOT-BPLA) является многоцентровым исследованием с участием >19 тыс. пациентов с АГ в возрасте от 40 до 79 лет на начало исследования, со средним САД 140/90 мм рт.ст. на фоне лечения и 160/100 мм рт.ст. без лечения [11]. Пациенты не страдали ишемической болезнью сердца, но у них было ≥3 других фактора риска развития сердечно-сосудистых катастроф: например гипертрофия стенки левого желудочка, сахарный диабет 2 типа, заболевание периферических артерий, ранее перенесенный инсульт/транзиторная ишемическая атака, для мужчин — возраст ≥55 лет или курение сигарет.
В исследовании проверяли влияние современных блокаторов кальциевых каналов по сравнению со старыми β-адреноблокаторами у лиц с АГ с умеренным риском развития сердечно-сосудистых событий. Главной целью изучения снижения АД было сравнение и оценка долгосрочного влияния двух режимов гипотензивной терапии на комбинированную конечную точку в виде нефатального инфаркта миокарда (в т.ч. бессимптомного инфаркта миокарда) и фатальной ишемической болезни сердца. Уровень АД измеряли в положении сидя с помощью единого автоматизированного устройства (Omron HEM705CP) у всех участников в течение в среднем 13 визитов к врачу на протяжении 5,5 года.
Выборка ИПГА ASCOT-UK-IR включала 3802 человека из первоначальной группы в 19 342 пациента с АГ. Проспективно регистрировали показатели вариабельности АД при визитах к врачу и между визитами на протяжении >5,5 года. Собирали образцы крови для выделения ДНК, из которых генотипировали 3802 лиц европейского происхождения из Великобритании и Ирландии, что позволило провести ИПГА для определения вариантов риска вариабельности АД.
Для анализов репликации использовали подгруппу из 3900 лиц с доступными ДНК из выборки исследования ASCOT-DK-FI-NO-SE. Критерии отбора для скандинавских участников исследования ASCOT были идентичны таковым для участников из Великобритании и Ирландии и измерения уровня АД для расчета его вариабельности проводили в одинаковых временных точках. Подробная информация о выборке исследования ASCOT-UK-IR приведена в таблице I в дополнительных данных on-line.
Ишемический инсульт
В выборку лиц с инсультом вошли 8624 пациента и 12 722 лица контрольной группы из 7 различных испытаний (см. дополнительные данные on-line): Australian Stroke Genetics Collaborative (ASGC) [13, 14], Bio-Repository of DNA in Stroke (BRAINS) [15, 16], Genetics of Early Onset Stroke (G...
