Акушерство и Гинекология №4 (приложение) / 2019
Применение метода проточной цитофлуориметрии для оценки функциональной активности тромбоцитов у новорожденных
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова» Министерства здравоохранения РФ, Москва, Россия, 117997, ул. Академика Опарина, 4
Введение. Тромбоциты играют ключевую роль в клеточном гемостазе и тесно связаны с плазменным гемостазом. Исследование функции тромбоцитов у новорожденных детей, особенно недоношенных, осложняется большим объемом образца крови, отсутствием стандартизации и референтных интервалов для выполнения большинства функциональных тестов, а также неполным пониманием функционального фенотипа неонатальных тромбоцитов [1]. «Золотым стандартом» исследования функции тромбоцитов до сих пор является турбидиметрический метод агрегации тромбоцитов с различными агонистами, требующий 400 мкл богатой тромбоцитами плазмы [2].
Современный тест функциональной активности тромбоцитов (ФАТ), осуществляемый методом проточной цитофлуориметрии (ПЦ), дает полную информацию о функциональном состоянии тромбоцитов и их способности к активации в присутствии агонистов [3]. Использование 20 мкл цельной крови без предварительной обработки дает возможность широкого применения ФАТ для новорожденных [4].
Цель: адаптировать метод ПЦ для оценки тромбоцитарного гемостаза и определить референтные значения ФАТ у здоровых новорожденных.
Методы. Исследовали периферическую кровь с цитратом натрия 3,2%, полученную у 10 здоровых новорожденных 1–3 сут жизни. Поверхностные рецепторы и внутриклеточные гранулы определяли с помощью моноклональных антител к CD61 (PE), CD42b (PE), PAC1 (FITC), CD62P (Alexa647) и аннексину V (Alexa 647). Общее количество антигена оценивали по интенсивности флуоресценции нативных и актив...
