Прогностическая значимость уровня противовирусных антител в развитии рецидива рака мочевого пузыря

DOI: https://dx.doi.org/10.18565/urology.2018.6.86-94

31.12.2018
256

ˡ Кафедра урологии и хирургической андрологии РМАНПО (зав. каф. – академик РАН, д.м.н., проф. О. Б. Лоран), Москва, Россия; 2 урологическое отделение и 3 патологоанатомическое отделение ГБУЗ «ГКБ им. В. П. Демихова» ДЗМ (гл. врач – д.м.н., проф. О. Б. Переходов), Москва, Россия; 4 Коми республиканский онкологический диспансер (гл. врач – А. Н. Соколов), Сыктывкар, Россия; 5 Вологодская областная клиническая больница № 2 (гл. врач – д.м.н. А. Г. Пулин) г. Череповец, Россия

Введение: Серологическая диагностика вирус-ассоциированных опухолей привлекает внимание многих специалистов. Доказано изменение уровня противовирусных антител при опухолях различных локализаций. В ряде случаев авторы предлагают использовать эти данные с целью как скрининга возникновения неоплазм, так и контроля излеченности.
Цель: оценить прогностическую значимость уровня противовирусных антител в развитии рецидива рака мочевого пузыря.
Материалы и методы. Проведено пилотное исследование определения уровня противовирусных антител (IgG, M) к вирусу Эпштейна–Барр (ВЭБ), вирусу простого герпеса (ВПГ) 1-го и 2-го типов, цитомегаловирусу (ЦМВ) у 100 пациентов, страдавших раком мочевого пузыря (72 мужчины и 28 женщин) в возрасте от 38 до 90 лет (средний возраст – 65±10 лет). Выполнен многофакторный анализ, статистический анализ с построением дерева классификаций. В качестве зависимой переменной был взят показатель наличия рецидива опухолевого процесса.
Результаты. У пациентов с рецидивным характером опухоли имело место повышение уровня анти-ЦМВ IgG (616,5±501,46 ЕД/мл против 339,06±306,61; p=0,0017) и анти-ВЭБ IgG-EBNA (246,7±207 ЕД/мл против 141,5±163,7; p=0,0118). В результате построения дерева классификаций были отобраны показатели анти-ЦМВ IgG, анти-ВЭБ IgG-EBNA, стадия процесса и наличие ДНК ЦМВ в опухолевой ткани, при которых были правильно классифицированы 20 из 24 с рецидивом, 58 из 72 без рецидива. Наиболее значимыми показателями оказались уровни анти-ЦМВ IgG (100%), анти-ВЭБ IgG-EBNA (78%) и стадия процесса (50%). Чувствительность метода составила 83,33%, специфичность – 80,56%, положительное прогностическое значение (вероятность обнаружения болезни у лиц с положительным результатом теста) – 58,82%, отрицательное прогностическое значение (вероятность отсутствия болезни у лиц с отрицательным результатом теста) – 93,55%, точность – 81,25%. Проведен многофакторный анализ (бинарная логистическая регрессия) и получена достоверная модель (χ2=22,438, p=0,00043), в которую вошли следующие параметры: анти-ЦМВ IgG более 670 ЕД/мл, анти-ВЭБ IgG-EBNA более 130, степень анаплазии, наличие ДНК ЦМВ и ВЭБ в опухолевой ткани. На основании полученного регрессионного уравнения проведена проверка точности прогнозирования рецидива опухолевого процесса, в результате которой получены достаточно высокие предсказательные результаты: специфичность – 95,2%, чувствительность – 33,3%.
Заключение. Уровень анти-ЦМВ IgG более 670 ЕД/мл, анти-ВЭБ IgG-EBNA. И более 130 ЕД/мл служат достоверным прогностическим критерием развития рецидива рака мочевого пузыря.

Введение. Семейство герпесвирусов (Herpesviridae) объединяет пантропность к органам и тканям, пожизненная персистентность и способность вызывать многообразные манифестные формы заболевания. После внедрения вирусы герпеса персистируют в организме человека пожизненно в виде латентной инфекции и могут под влиянием ослабляющих факторов (грипп, СПИД и др.) реактивироваться с образованием новых вирусов, вызывая клинически выраженные формы болезни с развитием вторичной иммунологической недостаточности [1]. В процессе репликации вируса Эпштейна–Барр (ВЭБ) или вируса герпеса 4-го типа экспрессируется свыше 70 различных вирусспецифических белков, при этом к настоящему времени выделены группы иммуногенных белков, определение антител к которым дает возможность дифференцировать стадию инфекции: EA (еarly antigen) – ранний антиген, включает белки p54, p138; EBNA-1 (Epstein–Barr nuclear antigen) – ядерный антиген, белок p72; VCA (Viral capsid antigen) – капсидный антиген, включает комплекс белков p150, p18, p23; к настоящему времени показано, что иммунодоминантными белками в этом комплексе являются p18 и p23; LMP (Latent membrane protein) – латентный мембранный белок gp 125 [2–4]. Серологическая диагностика вирус-ассоциированных опухолей привлекает внимание многих специалистов [5–7]. Изначально первичная причинно-следственная связь между вирусом Эпштейна–Барр (ВЭБ) и лимфомой Беркитта подтверждена именно повышенным уровнем антител к антигенам ВЭБ, присутствующим у пациентов с лимфомой Беркитта [7]. Возможность ранней диагностики онкологических заболеваний, способность прогнозирования риска прогрессирования и рецидива опухолевого процесса, а также контроля излеченности по уровню противовирусных антител открывают перспективы использования неинвазивных и экономически выгодных методов как диагностики, так и контроля лечения вирус-ассоциированных неоплазм. Ранее в наших работах мы уже говорили о повышении уровня противовирусных антител у больных раком мочевого пузыря [9–11].

Цель исследования: оценить прогностическую значимость уровня противовирусных антител в развитии рецидива рака мочевого пузыря.

Материалы и методы. В пилотном исследовании проведено обследование и лечение 100 больных, страдающих раком мочевого пузыря (72 мужчины и 28 женщин) в возрасте от 38 до 90 лет (средний возраст – 65±10 лет). Интраоперационно выполнен забор ткани опухоли мочевого пузыря с целью выявления вирусов ВПГ 1-го и 2-го типов, вируса папилломы человека (ВПЧ) высокого онкогенного риска, цитомегалловируса (ЦМВ), ВЭБ. Определение вирусных ДНК осуществлено методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме реального времени. Исследование проведено полуавтоматическим способом с использованием ПЦР-детекторов CFX-96, Bio-Rad (США) и реактивов Вектор-Бест (Россия), верхний предел определения (с разведением) – 100 копий в пробе. Следует отметить, что из всех проанализированных в работе вирусов только ВПЧ высокого онкогенного риска и ВЭБ онкогенные. У всех пациентов определен уровень противовирусных антител иммуноферментным методом к ВПГ 1-го и 2-го типов, ЦМВ, ВЭБ. Материалом для иммуногистохимического исследования послужил биопсийный и операционный материалы от 32 пациентов с верифицированной опухолью мочевого пузыря. Из них у 21 больного выявлено наличие вирусных ДНК (ЦМВ, ВЭБ, ВПГ 1-го и 2-го типов, ВПЧ высокого онкогенного риска) в опухолевой ткани, в 11 случаях вирусных ДНК выявлено не было.

Операционный материал фиксировали в 1%-ном растворе нейтрального формалина и заливали в парафин. Срезы толщиной 5 мкм, окрашенные гематоксилином и эозином, были подвергнуты обзорному морфологическому анализу, при котором стадию рака определяли в соответствии с классификацией TNM, степень дифференцировки опухолевых клеток оценивали в соответствии с рекомендациями ВОЗ от 1973 г. Микроскопическое изучение препаратов проведено с применением бинокулярного микроскопа с фотоприставкой Axio Zeis при 400-кратном увеличении. Иммуногистохимическое исследование выполнено на серийных парафиновых срезах 5 мкм путем стрептавидинбиотинового метода. В качестве детекционной системы использовано 6 маркеров. Определены следующие показатели: маркер пролиферативной активности Ki67 (sp6), маркер супрессора опухолевого роста Bcl-2 (D07), p53 (124), маркер ангиогенеза CD31 (sp164), маркер адгезии CD44 (spm521), ростовой фактор EGFR (sp84) (Spring Bioscience).

Интенсивность реакций с антигенами, локализованными на мембранах клеток и внутриклеточных мембранах (CD44, CD31, EFGR и Bcl-2), оценена полуколичественным способом по балльной шкале от 0 до 3 с учетом выраженности реакции и ее локализации: 0 – отсутствие реакции, 1 – слабая реакция, 2 – умеренная реакция, 3 – сильная реакция. Результаты реакции с антигенами, имевшими ядерную локализацию (Кi67, р63), оценивали по системе подсчета histochemical score, включающей интенсивность иммуногистохимической окраски по 3-балльной шкале и долю (%) окрашенных клеток и представляющей сумму произведений процентов, о...

Список литературы

1. Isakov V.A., Arhipova E.I., Isakov D.V. Human herpesviruses. A guide for clinicians. SpB:. Spetslit, 2013. 2-nd edition, revised and enlarged. 670 p.: il. Russian (Исаков В.А., Архипова Е.И., Исаков Д.В. Герпесвирусные инфекции человека. Руководство для врачей. СПб.: СпецЛит, 2013. 2-е изд., перераб. и доп. 670 c.: ил.).

2. Isakov V.A., Arhipova E.I., Isakov D.V. Human herpesviruses. A guide for clinicians. SpB:. Spetslit, 2006. 303 c. Russian (Исаков В.А., Архипова Е.И.,Исаков Д.В. Герпесвирусные инфекции человека. Руководство для врачей. СПб.: СпецЛит, 2006. 303 c.).

3. Osipova L.S. The features of clinical manifestations and treatment of Epstein-Barr virus. Novosti medicini i farmacii. 2011. N 18(387). Russian (Осипова Л.С. Особенности течения и лечения инфекции, вызванной вирусом Эпштейна–Барр. Новости медицины и фармации. 2011.№ 18(387)).

4. Simoviyan E.N., Deniskova V.B., Bovtalo L.F., Grigoryan A.V. Epstein-Barr virus in childrens: the current approaches for the diagnosis and treatmen. Lechashchyi vrach. 2007;7:36–41. Russian (Симовьян Э.Н., Денискова В.Б., Бовтало Л.Ф., Григорян А.В. Эпштейна–Барр вирусная инфекция у детей: современные подходы к диагностике и лечению. Лечащий врач. 2007;7:36–41).

5. Coghill A.E., Hildesheim A. Epstein-Barr virus antibodies and the risk of associated malignancies: review of the literature. American Journal of Epidemiology. 2014;180:687–695. Doi: 10.1093/aje/kwu176.

6. Coghill A.E., Hsu W.L., Pfeiffer R.M. et al. Epstein-Barr virus serology as a potential screening marker for nasopharyngeal carcinoma among high-risk individuals from multiplex families in Taiwan. Cancer Epidemiology, Biomarkers & Prevention. 2014;23:1213–1219. Doi: 10.1158/1055-9965.EPI-13-1262.

7. Cárdenas-Mondragón M.G., Torres J., Flores-Luna L. et al. Case–control study of Epstein–Barr virus and Helicobacter pylori serology in Latin American patients with gastric disease. Br J Cancer. 2015;112:1866–1873. Doi: 10.1038/bjc.2015.175.

8. Bornkamm G.W. Epstein-Barr virus and its role in the pathogenesis of Burkitt’s lymphoma: an unresolved issue. Semin Cancer Biol. 2009;19:351–365.

9. Loran O.B., Sinyakova L.A., Gundorova L.V., Kosov V.A., Kosova I.V., Kolbasov D.N. Viruses: from asymptomatic carrier to oncologic diseases. Uchenie zapiski Orlovskogo gosudarstvennogo universiteta. 2015;4(67). Russian (Лоран О.Б., Синякова Л.А., Гундорова Л.В., Косов В.А., Косова И.В., Колбасов Д.Н. Вирусы: от бессимптомного носительства до онкологических заболеваний. Ученые записки Орловского государственного университета. 2015;4(67)).

10. Loran O.B., Sinyakova L.A., Gundorova L.V., Kosov V.A., Kosova I.V., Kolbasov D.N., Goncharov A.A., Zernov V.O., Candinova Yu.V. The level of antiviral antibodies against Epstein-Barr virus in patients with bladder cancer. Eksperimental’naya i klinicheskaya urologiia. 2015;2:48–51. Russian (Лоран О.Б., Синякова Л.А., Гундорова Л.В., Косов В.А., Косова И.В.,Колбасов Д.Н., Гончаров А.А, Зернов В.О., Кандинова Ю.В.Уровень противовирусных антител к вирусу Эпштейна–Барр у больных раком мочевого пузыря. Экспериментальная и клиническая урология. 2015;2:48–51).

11. Loran O.B., Sinyakova L.A., Gundorova L.V., Kosov V.A., Kosova I.V., Kolbasov D.N., Pogodina I.E. Oncomodulating effect in bladder cancer: myth or reality. Farmateka. 2017;3:53–60. Russian (Лоран О.Б., Синякова Л.А., Гундорова Л.В., Косов В.А., Косова И.В., Колбасов Д.Н.,Погодина И.Е. Онкомодулрующий эффект при раке мочевого пузыря: миф или реальность. Фарматека. 2017;3:53–60).

12. De Paschale M., Clerici P. Serological diagnosis of Epstein-Barr virus infection: Problems and solutions. World J Virol. 2012;1(1):31–43. Doi: 10.5501/wjv.v1.i1.31.

13. Miller G., Grogan E., Rowe D., Rooney C., Heston L., Eastman R., Andiman W., Niederman J., Lenoir G.., Henle W. Selective lack of antibody to a component of EB nuclear antigen in patients with chronic active Epstein-Barr virus infection. J Infect Dis. 1987;156:26–35.

14. Luderer R., Kok M.., Niesters H.G., Schuurman R., de Weerdt O.,Thijsen S.F. Real-time Epstein-Barr virus PCR for the diagnosis of primary EBV infections and EBV reactivation. Mol Diagn. 2005;9:195–200.

15. Loran O.B., Sinyakova L.A., Gundorova L.V., Kosov V.A., Kosova I.V., Kolbasov D.N., Korostelkin P.P. The viruses in carcinogenesis of bladder cancer. Materiali XI Kongressa Rossiiskogo obshchestva onkourologov. 29–30 sentyabrya 2016 g. P. 75–76. Russian (Лоран О.Б., Синякова Л.А.,Гундорова Л.В., Косов В.А., Косова И.В., Колбасов Д.Н., Коростелкин П.П. Вирусы в канцерогенезе рака мочевого пузыря. Материалы XI Конгресса Российского общества онкоурологов. 29–30 сентября 2016 г. С. 75–76).

16. Woodburn J.R. The epidermal growth factor receptor and its inhibition in cancer therapy. Pharmacol Ther. 1999;82:241–250.

17. Cui Xia, Kang Zhu, Guoxi Zheng. Expression of EBV antibody EA-IgA, Rta-IgG and VCA-IgA and SA in serum and the implication of combined assay in nasopharyngeal carcinoma diagnosis Int J Clin Exp Pathol. 2015;8(12):16104–16110.

18. Li Y., Wang K., Yin S.K., Zheng H.L., Min D.L. Expression of Epstein-Barr virus antibodies EA-IgG, Rta-IgG, and VCA-IgA in nasopharyngeal carcinoma and their use in a combined diagnostic assay. Genet Mol Res. 2016;15(1). Doi: 10.4238/gmr.15017368.

19. Ronit Sarid, Shou-Jiang Gao. Viruses and Human Cancer: From Detection to Causality. Cancer Lett. 2011;305(2):218–227.

20. Shinkura R., Yamamoto N., Koriyama C., Shinmura Y., Eizuru Y., Tokunaga M.Epstein-Barr virus-specific antibodies in Epstein-Barr virus-positive and -negative gastric carcinoma cases in Japan. J Med Virol. 2000;60:411–416.

21. Tamada A., Makimoto K., Yamabe H., Imai J., Hinuma Y., Oyagi A., Araki T. Titers of Epstein-Barr virus-related antibodies in nasopharyngeal carcinoma in Japan. Cancer. 1984;53(3):430–40.

22. Chen Y., Xin X., Cui Z., Zheng Y., Guo J., Chen Y., Lin Y., Su G. Diagnostic Value of Serum Epstein-Barr Virus Capsid Antigen-IgA for Nasopharyngeal Carcinoma: a Meta-Analysis Based on 21 Studies. Clin Lab. 2016;62(6):1155–1166.

23. Morshed K., Polz-Dacewicz M., Szymański M., Ziaja M., Gołabek W. Epstein-Barr virus antibodies in blood serum of patients with laryngeal cancer. Otolaryngol Pol. 2002;56(1):45–48.

24. Cárdenas-Mondragón M.G., Carreón-Talavera R., Camorlinga-Ponce M., Gomez-Delgado A., Torres J., Fuentes-Pananá E. M. Epstein Barr virus and Helicobacter pylori co-infection are positively associated with severe gastritis in pediatric patients. PLoS One. 2013;8, article e62850 Doi: 10.1371/annotation/865eaad7-8547-49ac-a42d-47e9d0755bb3.

25. Cárdenas-Mondragón M.G., Torres J., Flores-Luna L. et al. Case–control study of Epstein–Barr virus and Helicobacter pylori serology in Latin American patients with gastric disease. British Journal of Cancer. 2015; 112:1866–1873. Doi: 10.1038/bjc.2015.175.

26. María G. Cárdenas-Mondragón, Javier Torres, Norma Sánchez-Zauco, Alejandro Gómez-Delgado, Margarita Camorlinga-Ponce, Carmen Maldonado-Bernal, and Ezequiel M. Fuentes-Pananácorresponding. Elevated Levels of Interferon-γ Are Associated with High Levels of Epstein-Barr Virus Reactivation in Patients with the Intestinal Type of Gastric Cancer. J Immunol Res. 2017;2017:7069242.

27. Yahia R., Zaoui C., Derbale W., Boudi H., Chebloune Y., Sahraoui, Elkebir F.Z.Epstein Barr virus and invasive mammary carcinomas: EBNA, EBERs and molecular profile in a population of West Algeria. Ann Biol Clin (Paris). 2018;76(1):75–80. Doi: 10.1684/abc.2017.1312.

28. Michaelis M., Doerr H.W., Cinatl J. Jr. The story of Human Cytomegalovirus and Cancer Increasing Evidence and Open Questions. Neoplasia. 2009;11(1):1–9.

29. Fattahi S., Nikbakhsh N., Taheri H., Ghadami E., Kosari-Monfared M., Amirbozorgi G., Asouri M., Pilehchian-Langroudi M., Ranaee M., Samadani A.A., Paryan M., Akhavan-Niaki H. Prevalence of multiple infections and the risk of gastric adenocarcinoma development at earlier age. Diagn Microbiol Infect Dis. 2018 May 11. pii: S0732-8893(18)30142-1.

30. Leila Z., Arabzadeh S.A., Afshar R.M., Afshar A.A., Mollaei H.R. Detection of Epstein-Barr Virus and Cytomegalovirus in Gastric Cancers in Kerman, Iran. Asian Pac J Cancer Prev. 2016;17(5):2423–28.

31. Loran O.B., Sinyakova L.A., Gundorova L.V., Kosov V.A., Kosova I.V., Kolbasov D.N., Pogodina I.E. Correlation of antiviral antibodies and morphological changes in bladder cancer patients. Consilium Medicum. 2017;19(7):28–34. Russian (Лоран О.Б., Синякова Л.А., Гундорова Л.В., Косов В.А., Косова И.В., Колбасов Д.Н, Погодина И.Е. Корреляция данных противовирусных антител и морфологических изменений при раке мочевого пузыря. Consilium Medicum. 2017;19(7):28–34).

Об авторах / Для корреспонденции

А в т о р д л я с в я з и: И. В. Косова – к.м.н., врач-уролог, урологическое отделение ГБУЗ «ГКБ им. В.П. Демихова»
ДЗМ, Москва, Россия; е-mail: kosovainga@mail.ru

Полный текст публикаций доступен только подписчикам

Нет комментариев

Комментариев: 0

Вы не можете оставлять комментарии
Пожалуйста, авторизуйтесь