Прогнозирование преждевременных родов путем комбинированного определения цитокинов и внеклеточной ДНК

DOI: https://dx.doi.org/10.18565/aig.2019.1.86-91

04.02.2019
50

1 ФГБУ национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, Москва 2 ФГБУН институт биологии развития им. Н.К. Кольцова РАН

Цель исследования. Определение прогностической значимости комбинированного определения уровней общей и плодовой внеклеточной ДНК и цитокинов при преждевременных родах.
Материал и методы. Исследование проведено у 80 женщин. Основную группу составили 47 пациенток со спонтанными преждевременными родами, разделенные по срокам: 22–27 недель 6 дней (10), 28–33 недели 6 дней (13) и 34–36 недель 6 дней гестации (24). Группу контроля – 33 женщины с физиологически протекающей беременностью, родившие в срок. Уровень общей и плодовой внеклеточной ДНК в плазме крови оценен количественным ПЦР-анализом, путем определения концентрации промотора гена RASSF1A и его гиперметилированной части. Определение содержания цитокинов IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, GM-CSF, IFNγ и TNFα проведено мультиплексным методом. Прогностическая ценность была определена методом логистической регрессии.
Результаты. В основной группе уровень IL-6 был повышен на 22–27 неделе 6 дней беременности, при этом в 60% (p=0,003) случаев были обнаружены признаки внутриутробной инфекции. Уровень IL-8 был значительно увеличен в основной группе на 28–33 неделе 6 дней и 34–36 неделе 6 дней беременности. Различий между группами в частоте внутриутробной инфекции на 28–33 неделе 6 дней не наблюдалось. В основной группе на 34–36 неделе 6 дней в 37,5% случаев диагностирована внутриутробная инфекция (p=0,01). Концентрация плодовой внеклеточной ДНК была увеличена на 28–33 неделе 6 дней беременности. Для прогнозирования преждевременных родов при сроке 22–27 недель 6 дней наиболее точным было одновременное определение IL-6 и общей внеклеточной ДНК – AUС: 0,925 (95% CI, 0,83–1); при сроке 28–33 недели 6 дней одновременное определение IL-8 и плодовой внеклеточной ДНК – AUС: 0,92 (95% CI, 0,85–1); при сроке 34–36 недель 6 дней одновременное использование IL-8, общей и плодовой внеклеточной ДНК – AUС=0,92 (95% CI, 0,85–1).
Заключение. Комбинированное определение внеклеточной ДНК и цитокинов является перспективным подходом для прогнозирования преждевременных родов.

Несмотря на сохраняющуюся высокую частоту преждевременных родов (ПР), до настоящего времени нет единой концепции этиологии данного осложнения беременности. Ряд исследователей уделяет внимание изучению роли провоспалительных цитокинов в активации системного воспалительного ответа, и как следствие, в развитии родовой деятельности. Так, например, показано, что интерлейкин (IL)-8, активирующий миграцию нейтрофилов и высвобождение протеиназ может играть ключевую роль в развитии ПР [1–5]. Известно, что ПР, не ассоциированные с инфекцией, коррелируют с повышением уровня в плазме крови IL-8, а также IL-1, IL-6. Вместе с тем повышенные концентрации фактора некроза опухоли (TNF)α, IL-1, IL-6 были выявлены при ПР, которые были сопряжены с инфекцией [6, 7]. Кроме того, исследование амниотической жидкости также выявило повышение IL-6 при ПР при наличии внутриутробной инфекции [8, 9]. В настоящее время появились новые данные о том, что общая внеклеточная ДНК (овДНК) может индуцировать воспалительный ответ, который ассоциирован с ПР. В работах S. Illanes и соавт. [10] и M.S. Quezada [11] продемонстрировано, что циркулирующая плодовая внеклеточная ДНК (пвДНК) вызывает воспалительную реакцию, которая приводит к развитию спонтанной родовой деятельности. При этом наблюдалась активация Толл-подобных рецепторов-9 (TLR-9) и повышение уровня IL-6. В литературе представлено значительное количество исследований, указывающих на связь между высоким уровнем пвДНК и риском развития ПР [12, 13]. Установлено, что основной мишенью для внеклеточной ДНК являются TLR-9, которые взаимодействуют с неметилированными CpG последовательностями. Известно также, что TLR-9 нейтрофилов способны взаимодействовать с бактериальной ДНК, с последующей секрецией IL-8 и, в меньшей степени, IL-6 и TNFα [14]. Как отмечалось выше, уровень указанных цитокинов повышается у женщин с высоким риском ПР [6]. ПвДНК составляет 0,3 – 40% от овДНК [15], однако способность внеклеточной ДНК не фетального происхождения вызывать ПР изучена недостаточно.

Цель исследования: определение прогностической значимости комбинированного определения уровней общей и плодовой внеклеточной ДНК и цитокинов при ПР.

Материал и методы исследования

В исследование было включено 80 пациенток: из них I (основную) группу составили 47 пациенток с ПР; II группу (сравнения) – 33 пациентки со своевременными родами. Исследование было одобрено этическим комитетом ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова» Минздрава Р...

Список литературы

  1. Сухих Г.Т., Серов В.Н., Адамян Л.В., Филиппов О.С., Баев О.Р., Клименченко Н.И., Тетруашвили Н.К., Тютюнник В.Л., Ходжаева З.С., Холин А.М.Преждевременные роды. Клинические рекомендации (протокол). М.: Министерство здравоохранения Российской Федерации; 2014. 35с.
  2. Hadži-Lega M., Markova A.D., Stefanovic M., Tanturovski M. Interleukin 6 and fetal fibronectin as a predictors of preterm delivery in symptomatic patients. Bosn. J. Basic Med. Sci. 2015; 15(1): 51-6.
  3. Ковальчук Л.В., Игнатьева Г.А., Ганковская Л.В., ред. Иммунология. Практикум. Учебное пособие. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2012. 176с.
  4. Suryanegara K., Kawilarang S. Difference of maternal serum interleukin-8 in preterm labor and normal pregnancy. Med. J. Obstet. Gynecol. 2017; 5(4): 1108.
  5. Савельева Г.М., Шалина Р.И., Курцер М.А., Клименко П.А., Сичинава Л.Г., Панина О.Б., Плеханова Е.Р., Выхристюк Ю.В., Лебедев Е.В. Преждевременные роды как важнейшая проблема современного акушерства. Акушерство и гинекология. 2012; 8-2: 4-10.
  6. Bogavac M., Brkić S., Celić D., Simin N., Matijasević J., Ilić T. Interferon gamma, interleukin 8 and interleukin 10 in serum of patients with the cervical infection and symptoms of the imminent preterm delivery. Srp. Arh. Celok. Lek. 2013; 141(9-10): 623-8.
  7. Szpecht D., Gadzinowski J., Nowak I., Cygan D., Seremak-Mrozikiewicz A., Kurzawińska G. et al. The significance of IL-1β +3953C>T, IL-6 -174G>C and -596G>A, TNF-α -308G>A gene polymorphisms and 86 bp variable number tandem repeat polymorphism of IL-1RN in bronchopulmonary dysplasia in infants born before 32 weeks of gestation. Cent. Eur. J. Immunol. 2017; 42(3): 287-93.
  8. Chaemsaithong P., Romero R., Korzeniewski S.J., Martinez-Varea A., Dong Z., Yoon B.H. et al. A rapid interleukin-6 bedside test for the identification of intra-amniotic inflammation in preterm labor with intact membranes. J. Matern. Fetal Neonatal Med. 2016; 29(3): 349-59.
  9. Romero R., Grivel J.C., Tarca A.L., Chaemsaithong P., Xu Z., Fitzgerald W. et al. Evidence of perturbations of the cytokine network in preterm labor. Am. J. Obstet. Gynecol. 2015; 213(6): 836. e1-836. e18.
  10. Illanes S., Gomez R., Fornes R., Figueroa-Diesel H., Schepeler M., Searovic P. et al. Free fetal DNA levels in patients at risk of preterm labour. Prenat. Diagn. 2011; 31(11): 1082-5.
  11. Quezada M.S., Francisco C., Dumitrascu-Biris D., Nicolaides K.H., Poon L.C. Fetal fraction of cell-free DNA in maternal plasma in the prediction of spontaneous preterm delivery. Ultrasound Obstet. Gynecol. 2015; 45(1): 101-5.
  12. Jakobsen T.R., Clausen F.B., Rode L., Dziegiel M.H., Tabor A. High levels of fetal DNA are associated with increased risk of spontaneous preterm delivery. Prenat. Diagn. 2012; 32(9): 840-5.
  13. Dugoff L., Barberio A., Whittaker P.G., Schwartz N., Sehdev H., Bastek J.A. Cell-free DNA fetal fraction and preterm birth. Am. J. Obstet. Gynecol. 2016; 215(2): 231. e1-7.
  14. József L., Khreiss T., El Kebir D., Filep J.G. Activation of TLR-9 induces IL-8 secretion through peroxynitrite signaling in human neutrophils. J. Immunol. 2006; 176(2): 1195-202.
  15. Dhallan R., Au W.C., Mattagajasingh S., Emche S., Bayliss P., Damewood M. et al. Methods to increase the percentage of free fetal DNA recovered from the maternal circulation. JAMA. 2004; 291(9): 1114-9.
  16. Chan K.C., Ding C., Gerovassili A., Yeung S.W., Chiu R.W., Leung T.N. et al. Hypermethylated RASSF1A in maternal plasma: A universal fetal DNA marker that improves the reliability of noninvasive prenatal diagnosis. Clin. Chem. 2006; 52(12): 2211-8.
  17. Красный А.М., Грачева М.И., Садекова А.А., Вторушина В.В., Балашов И.С., Кан Н.Е., Боровиков П.И., Кречетова Л.В., Тютюнник В.Л. Комбинированное исследование общей, фетальной ДНК, цитокинов в плазме крови матери при преэклампсии. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2017; 164(12): 686-91.
  18. Arababadi M.K., Aminzadeh F., Hassanshahi G., Khorramdelazad H., Norouzi M., Zarandi E.R. et al. Cytokines in preterm delivery. Lab. Med. 2012; 43(4): 27-30.
  19. Scharfe-Nugent A., Corr S.C., Carpenter S.B., Keogh L., Doyle B., Martin C. et al. TLR9 provokes inflammation in response to fetal DNA: mechanism for fetal loss in preterm birth and preeclampsia. J. Immunol. 2012; 188(11): 5706-12.

Поступила 13.04.2018

Принята в печать 20.04.2018

Об авторах / Для корреспонденции

Красный Алексей Михайлович, к.б.н., заведующий лабораторией цитологии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова» Минздрава России. Адрес:
117997, г. Москва, ул. Академика Опарина, дом 4. Телефон: 8 (495) 438-22-72. E-mail: alexred@list.ru
Кан Наталья Енкыновна, д.м.н., заведующая акушерским отделением ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова» Минздрава России. Адрес: 117997, г. Москва ул. Академика Опарина, дом 4. Телефон: 8 (926) 220-86-55.
E-mail: kan-med@mail.ru. Номер Researcher ID B-2370-2015. ORCID ID 0000-0001-5087-5946
Тютюнник Виктор Леонидович, д.м.н., заведующий 1-ым акушерским физиологическим отделением ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова» Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, дом 4. Телефон: 8 (903) 969-50-41.
E-mail: tioutiounnik@mail.ru. Номер Researcher ID B-2364-2015.ORCID ID 0000-0002-5830-5099
Садекова Алсу Амировна, научный сотрудник лаборатории цитологии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова» Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, дом 4. Телефон: 8 (495) 438-22-72. E-mail: a_sadekova@oparina4.ru
Сарибекова Алена Гарриевна, аспирант ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика
В.И. Кулакова» Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, дом 4. Телефон: 8 (926) 551-78-24. E-mail: arushanovaa@mail.ru
Кокоева Диана Николаевна, аспирант ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика
В.И. Кулакова» Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, дом 4. Телефон: 8 (937) 267-44-40. E-mail: dikokoeva@mail.ru
Салпагарова Залина Хусеевна, аспирант ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика
В.И. Кулакова» Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, дом 4. Телефон: 8 (925) 853-96-22. E-mail: z.salpagarova1990@yandex.ru
Меджидова Маржанат Капуровна, докторант ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова» Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, дом 4. Телефон: 8 (926) 381-17-10. E-mail: marzhana-m@yandex.ru
Вторушина Валентина Валентиновна, к.м.н., врач клинической лабораторной диагностики лаборатории иммунологии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова» Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, дом 4. Телефон: 8 (495) 438-11-83. E-mail: v_vtorushina@oparina4.ru
Кречетова Любовь Валентиновна, к.м.н., заведующая лабораторией иммунологии ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова» Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, дом 4. Телефон: 8 (495) 438-11-83. E-mail: l_krechetova@oparina4.ru

Для цитирования: Красный А.М., Кан Н.Е., Тютюнник В.Л., Садекова А.А., Сарибекова А.Г., Кокоева Д.Н., Салпагарова З.Х., Меджидова М.К., Вторушина В.В., Кречетова Л.В. Прогнозирование преждевременных родов путем комбинированного определения цитокинов и внеклеточной ДНК. Акушерство и гинекология. 2019; 1: 86-91.
http: // dx.doi.org/10.18565/aig.2019.1.86-91

Полный текст публикаций доступен только подписчикам

Нет комментариев

Комментариев: 0

Вы не можете оставлять комментарии
Пожалуйста, авторизуйтесь