Прогнозирование преждевременных родов путем комбинированного определения цитокинов и внеклеточной ДНК

Цель исследования. Определение прогностической значимости комбинированного определения уровней общей и плодовой внеклеточной ДНК и цитокинов при преждевременных родах.
Материал и методы. Исследование проведено у 80 женщин. Основную группу составили 47 пациенток со спонтанными преждевременными родами, разделенные по срокам: 22–27 недель 6 дней (10), 28–33 недели 6 дней (13) и 34–36 недель 6 дней гестации (24). Группу контроля – 33 женщины с физиологически протекающей беременностью, родившие в срок. Уровень общей и плодовой внеклеточной ДНК в плазме крови оценен количественным ПЦР-анализом, путем определения концентрации промотора гена RASSF1A и его гиперметилированной части. Определение содержания цитокинов IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, GM-CSF, IFNγ и TNFα проведено мультиплексным методом. Прогностическая ценность была определена методом логистической регрессии.
Результаты. В основной группе уровень IL-6 был повышен на 22–27 неделе 6 дней беременности, при этом в 60% (p=0,003) случаев были обнаружены признаки внутриутробной инфекции. Уровень IL-8 был значительно увеличен в основной группе на 28–33 неделе 6 дней и 34–36 неделе 6 дней беременности. Различий между группами в частоте внутриутробной инфекции на 28–33 неделе 6 дней не наблюдалось. В основной группе на 34–36 неделе 6 дней в 37,5% случаев диагностирована внутриутробная инфекция (p=0,01). Концентрация плодовой внеклеточной ДНК была увеличена на 28–33 неделе 6 дней беременности. Для прогнозирования преждевременных родов при сроке 22–27 недель 6 дней наиболее точным было одновременное определение IL-6 и общей внеклеточной ДНК – AUС: 0,925 (95% CI, 0,83–1); при сроке 28–33 недели 6 дней одновременное определение IL-8 и плодовой внеклеточной ДНК – AUС: 0,92 (95% CI, 0,85–1); при сроке 34–36 недель 6 дней одновременное использование IL-8, общей и плодовой внеклеточной ДНК – AUС=0,92 (95% CI, 0,85–1).
Заключение. Комбинированное определение внеклеточной ДНК и цитокинов является перспективным подходом для прогнозирования преждевременных родов.

Несмотря на сохраняющуюся высокую частоту преждевременных родов (ПР), до настоящего времени нет единой концепции этиологии данного осложнения беременности. Ряд исследователей уделяет внимание изучению роли провоспалительных цитокинов в активации системного воспалительного ответа, и как следствие, в развитии родовой деятельности. Так, например, показано, что интерлейкин (IL)-8, активирующий миграцию нейтрофилов и высвобождение протеиназ может играть ключевую роль в развитии ПР [1–5]. Известно, что ПР, не ассоциированные с инфекцией, коррелируют с повышением уровня в плазме крови IL-8, а также IL-1, IL-6. Вместе с тем повышенные концентрации фактора некроза опухоли (TNF)α, IL-1, IL-6 были выявлены при ПР, которые были сопряжены с инфекцией [6, 7]. Кроме того, исследование амниотической жидкости также выявило повышение IL-6 при ПР при наличии внутриутробной инфекции [8, 9]. В настоящее время появились новые данные о том, что общая внеклеточная ДНК (овДНК) может индуцировать воспалительный ответ, который ассоциирован с ПР. В работах S. Illanes и соавт. [10] и M.S. Quezada [11] продемонстрировано, что циркулирующая плодовая внеклеточная ДНК (пвДНК) вызывает воспалительную реакцию, которая приводит к развитию спонтанной родовой деятельности. При этом наблюдалась активация Толл-подобных рецепторов-9 (TLR-9) и повышение уровня IL-6. В литературе представлено значительное количество исследований, указывающих на связь между высоким уровнем пвДНК и риском развития ПР [12, 13]. Установлено, что основной мишенью для внеклеточной ДНК являются TLR-9, которые взаимодействуют с неметилированными CpG последовательностями. Известно также, что TLR-9 нейтрофилов способны взаимодействовать с бактериальной ДНК, с последующей секрецией IL-8 и, в меньшей степени, IL-6 и TNFα [14]. Как отмечалось выше, уровень указанных цитокинов повышается у женщин с высоким риском ПР [6]. ПвДНК составляет 0,3 – 40% от овДНК [15], однако способность внеклеточной ДНК не фетального происхождения вызывать ПР изучена недостаточно.

Цель исследования: определение прогностической значимости комбинированного определения уровней общей и плодовой внеклеточной ДНК и цитокинов при ПР.

Материал и методы исследования

В исследование было включено 80 пациенток: из них I (основную) группу составили 47 пациенток с ПР; II группу (сравнения) – 33 пациентки со своевременными родами. Исследование было одобрено этическим комитетом ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова» Минздрава Р...

Красный А.М., Кан Н.Е., Тютюнник В.Л., Садекова А.А., Сарибекова А.Г., Кокоева Д.Н., Салпагарова З.Х., Меджидова М.К., Вторушина В.В., Кречетова Л.В.