Роль фенотипических методов типирования сальмонелл в мониторинге за сальмонеллезами

Изучены биологические свойства штаммов сальмонелл, выделенных в 2009–2010 гг. из разных источников (от людей, сельскохозяйственных животных, из пищевых продуктов и объектов окружающей среды). Проведено фаготипирование и определение лекарственной устойчивости S. enteritidis, изолированных при вспышках и спорадических случаях сальмонеллезов. Выявлено, что на территории страны циркулируют S. enteritidis 12 фаговаров, при этом ведущим является 1 (60,4%). Подавляющее число сальмонелл характеризуется чувствительностью к действию изученных препаратов или устойчивостью по отношению к одному антибиотику. Полирезистентные штаммы сальмонелл чаще всего встречаются среди S. typhimurium и реже всего – среди S. enteritidis. S. infantis занимает промежуточное положение.

Внутривидовое разнообразие некоторых наиболее распространенных сероваров сальмонелл
позволяет провести их типирование. Учитывая тот факт, что такое типирование используется
чаще всего в эпидемиологических целях, его называют «эпидемиологическим маркированием штамма». При выборе таких методов основное внимание уделяется тому, чтобы используемый
метод был стандартным, результаты воспроизводимыми и сравнимыми независимо от места
проведения. В настоящее время при осуществлении мониторинга за сальмонеллезами в системе глобального надзора за этими болезнями используются методы типирования на основе фенотипических и генотипических свойств возбудителей. К методам фенотипирования относятся: биотипирование, фаготипирование, колицинотипирование, определение чувствительности к антибиотикам. Биотипирование сальмонелл основывается на том, что для них характерна определенная вариабельность в ферментации отдельных углеводов, многоатомных спиртов,
определенных аминокислот и др. Среди всех наиболее распространенных сероваров сальмонелл схемы биотипирования разработаны в первую очередь для S. typhimurium. Различные наборы биохимических тестов позволяют выделить внутри этого серовара от 24 до 144 таких биоваров. Подобные схемы разработаны для S. enteritidis, S. dublin, S. montevideo, S. agona и др. [1, 2]. Из всех методов фенотипическо-

го типирования наибольшее применение нашел метод фаготипирования [1]. Коллекции фагов
для типирования чаще всего предназначены для изучения штаммов сальмонелл, преобладающих
в этиологической структуре сальмонеллезов или способных вызывать наиболее тяжелые заболевания (S. typhi, S. typhimurium, S. enteritidis, S. infantis). В качестве одного из методов фенотипического маркирования может использоваться и чувствительность к антибиотикам. В этом случае своеобразным маркером может служить спектр антибиотиков, к действию которых устойчив изучаемый штамм сальмонелл. Обычно у эпидемиологически связанных штаммов спектры резистентности оказываются идентичными. Следует помнить, что в отдельных случаях такие штаммы могут отличаться по 1–2 антибиотикам, входящим в спектр резистентности. Необходимо отметить, что наибольшей результативностью указанный метод обладает при типировании S. typhimurium, так как именно представители этого серовара чаще всего характеризуются выраженной устойчивостью к действию антибиотиков [3–6]. Широкое распространение множественной лекарственной устойчивости, связанной с наличием определенных R-плазмид (утрата или приобретение), может определять некоторые отличия спектров резистентности у эпидемиологически родственных штаммов [7].
Дополнительным методом типирования некоторых сероваров сальмонелл является колицинотипирование. Продукция колицинов оценивается по наличию или отсутствию зоны задержки
роста индикаторных штаммов. Тип продуцируемых колицинов устанавливается по характеру
литического спектра согласно международной схеме. Способность продуцировать колицины связана с наличием в клетках микроорганизмов Соl-плазмид, что позволяет рассматривать наличие или отсутствие этих плазмид (Col+ или Col-) в качестве эпидемиологических маркеров. Однако применительно к сальмонеллам колицинотипирование не получило широкого признания прежде всего потому, что среди них редко встречаются колициногенные штаммы.

Материалы и методы

В течение 2009–2010 гг. в референс-центр по мониторингу за сальмонеллезами поступили 512 штаммов S. enteritidis и 192 штамма сальмонелл других сероваров. Значительное преобладание S. enteritidis связано с ведущей ролью указанных микроорганизмов в этиологической структуре сальмонеллезов у людей и животных, а также в ...

Рожнова С.Ш., Христюхина О.А., Агафонова Е.И.