Фарматека №11 (205) / 2010
Содержание фолатов и липоевой кислоты в гепатопротекторе Прогепар
ГОУ ВПО “Российский государственный медицинский университет”, Москва. Российский сотрудничающий центр института микроэлементов ЮНЕСКО, Москва.
Препарат Прогепар – гепатопротектор, базирующийся на гидролизате печени молодых телят. Обогащение экстракта печени стандартизированными количествами цианкобаламина, цистеина, холина и инозитола способствует усилению гепатопротекторных свойств препарата.Поскольку гидролизат печени – сложная и многокомпонентная композиция, для понимания основ гепатопротекторного эффекта препарата представляет особый интерес экспериментальное изучение его состава. В настоящей работе изучалось содержание витаминов в составе препарата. Было установлено, что препарат содержит значительные количества липоевой кислоты и тетрагидрофолата – эндогенной и безопасной формы фолатов. Липоевая кислота, равно как тетрагидрофолат и образующийся из тетрагидрофолата S-аденозилметионин, обладает ярко выраженными гепатопротекторными свойствами. Исследования подтверждают наличие в составе препарата цианкобаламина в количествах, указанных производителем. Присутствие в составе препарата незначительных количеств других витаминов (прежде всего С, Е, В6 и В1) указывает на щадящие условия производства, которые позволяют сохранять биологическую активность не только пептидов, но и липоевой кислоты, а также тетрагидрофолата в составе препарата Прогепар.
Введение
Гепатопротекторы растительного, животного или синтетического происхождения отличаются составом и спектром физиологического воздействия. Прогепар – синергидная гепатопротекторная комбинация на основе гидролизата печени молодых бычков, обогащенная цианкобаламином, холином, миоинозитолом и цистеином. Состав Прогепара представлен следующими действующими компонентами: в табл. 1 находится 70 мг гидролизата печени молодых бычков, 21,5 мг цистеина гидрохлорида, что соответствует 16,57 мг L-цистеина, 100 мг холина гидротартрата, 25,0 мг миоинозитола и 1,5 мкг цианоколамина. Препарат применяется в Японии, Таиланде и других странах для лечения пациентов, страдающих хроническими заболеваниями печени (цирроз, печеночная недостаточность, воспаление желчных протоков, дискинезии желчно-выводящих путей и т. д.).
Самым важным компонентом препарата Прогепар принято считать гидролизат печени, основными компоненты которого являются незаменимые аминокислоты, олигопептиды, витамины, нуклеозиды и эссенциальные микроэлементы. Поскольку гидролизат печени представляет собой многокомпонентный биосубстрат, исследования состава препарата вызывают особый интерес для понимания механизмов его терапевтической эффективности. Подобного рода исследования обычно начинаются с анализов микроэлементного и витаминного состава, которые не только указывают на важнейшие особенности технологии производства, но и позволяют судить о фундаментальных основах терапевтического действия исследуемых препаратов. Изучение микроэлементного состава Прогепара показало крайне низкое содержание в нем всех токсических элементов, что свидетельствует о высокой степени экологической чистоты этого препарата [1]. Кроме того, в гидролизате печени, входящем в состав препарата, были найдены значительные количества микроэлементов, которые могут оказывать гепатопротекторное воздействие: элементы, поддерживающие функцию печени (Al, Cr, Fe, Mg, Se, Zn, Mn, V, Cu, Co), элементы, способствующие восстановлению кроветворения (Ni, Zn, Cu, Mn, Mo, Co, Fe), элементы, поддерживающие обмен углеводов (V, Mg, Br, Cr, Zn, Mn, Se), и др. Особо следует отметить, что Прогепар – источник хорошо усвояемого “органического” хрома и позволяет покрывать более 50 % суточной потребности в этом микроэлементе. В целом микроэлементный состав Прогепара –важная составляющая терапевтического воздействия препарата [1].
Печень –концентратор не только эссенциальных микроэлементов, но и ряда витаминов (прежде всего цианкобаламина, фолатов и витамина С), поэтому в настоящем исследовании был изучен витаминный состав Прогепара. Изучение витаминного состава препарата проводилось с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) и различных методов детекции витаминов на выходе хроматографической колонки.
Материал и методы
Исследовалось 10 образцов препарата Прогепар (таблетки, покрытые оболочкой; производитель – Нордмарк Арцнаймиттель ГмбХ & Ko. KГ; регистрационный номер ЛСР-005848/08 от 23.07.2008, серия № 803111 от 09.2009; срок годности до 08.2012). Предварительно с поверхности таблетки Прогепара удалили защитный слой и очищенную таблетку растворяли в 10 мл метанола при интенсивном перемешивании. Количественное определение витаминов производилось на жидкостных хроматографах Agilent 1100 и Agilent 1200 (фирма Agilent Technologies, США).
Процесс анализа пробы препарата Прогепар делился на два этапа:
- разделение пробы препарата Прогепар на составляющие компоненты;
- детектирование и измерение содержания каждого компонента.
Для анализа витаминов в препарате Прогепар использовали бинарную ВЭЖХ-систему, инжектор, программированный флуоресцентный детектор. Объем вкола сэмплера составил 25– 50 мкл, температура колонки – 25°С, параметры флуоресцентного детектора: старт – EX 320 нм, EM 415 нм, через 4 минуты – EX 367 нм, EM 435 нм.
Идентификация витаминных соединений в Прогепаре осуществлялась по их времени удерживания. Количественное определение каждого из компонентов рассчитывалось исходя из величины аналитического сигнала, измеренного с помощью детектора, подключенного к выходу хроматографической колонки. Применение флуориметрического детектора позволяет не только снизить пределы обнаружения, но и селективно выделить анализируемые вещества на фоне матричных и сопутствующих компонентов пробы.
Исследование концентраций витаминов А, Е, D, С и липоевой кислоты (ЛК) производилось методом ВЭЖХ с УФ-спектрометрическим детектированием [2–5]; витаминов В1 и В6 – с флуориметрическим детектированием [6, 7]. Содержание ...
