Возможности использования внеклеточных везикул мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток в подготовке к программам экстракорпорального оплодотворения у пациенток со сниженным овариальным резервом

Цель: Оценить клиническую эффективность интраовариального введения внеклеточных везикул, выделенных из мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток плаценты, у пациенток со сниженным овариальным резервом в рамках программ экстракорпорального оплодотворения (ЭКО).
Материалы и методы: Проведено проспективное рандомизированное контролируемое испытание (открытый дизайн), включившее 100 женщин с признаками сниженного овариального резерва. Пациентки были рандомизированы в основную группу (n=50, интраовариальное введение внеклеточных везикул перед стимуляцией) и контрольную группу (n=50, стандартная стимуляция). Основным исходом являлась частота наступления клинической беременности; вторичными исходами – число полученных и зрелых ооцитов, количество зигот 2PN, бластоцист, частота бластуляции и живорождение. 
Результаты: В основной группе отмечено статистически значимое увеличение числа зрелых ооцитов (4,1 (1,3) против 1,5 (1,0), p<0,001), числа бластоцист (1,4 (0,6) против 0,8 (0,4), p<0,001) и частоты бластуляции (58,2% против 31,1%, p=0,008). Частота клинической беременности составила 24% в основной группе и 6% – в контрольной (ОР=4,0; 95% ДИ 1,2–13,3), а живорождения – 18% и 2% соответственно (ОР=9,0; 95% ДИ 1,2–68,4).
Заключение: Интраовариальное введение внеклеточных везикул мезенхимальных стромальных клеток у пациенток со сниженным овариальным резервом способствует улучшению овариального ответа, повышению качества эмбрионов и увеличению частоты клинической беременности и живорождения в программах ЭКО. Методика обладает высоким потенциалом, но требует подтверждения в более масштабных исследованиях.

Вклад авторов: Сухих Г.Т.  – разработка дизайна исследования; Силачев Д.Н., Попов К.В. – обзор публикаций по теме статьи; Назаренко Т.А. – анализ полученных данных; Мартиросян Я.О., Бирюкова А.М. – написание текста рукописи. 
Конфликт интересов: Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. 
Финансирование: НИР 121040600410-7 Назаренко Т.А. Решение проблемы бесплодия в современных условиях путем разработки клинико-диагностической модели бесплодного брака и использования инновационных технологий в программах вспомогательной репродукции.
Одобрение этического комитета: Исследование одобрено локальным этическим комитетом ФГБУ «НМИЦ АГП
им. В.И. Кулакова» Минздрава России.
Согласие пациентов на публикацию: Пациенты подписали информированное согласие на публикацию своих данных.
Обмен исследовательскими данными: Данные, подтверждающие выводы этого исследования, доступны по запросу у автора, ответственного за переписку, после одобрения ведущим исследователем.
Для цитирования: Мартиросян Я.О., Бирюкова А.М., Силачев Д.Н., Попов К.В., Назаренко Т.А., Сухих Г.Т. Возможности использования внеклеточных везикул мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток в подготовке к программам экстракорпорального оплодотворения у 
пациенток со сниженным овариальным резервом.
Акушерство и гинекология. 2025; 9: 117-125
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2025.228

Эффективность программ вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), включая экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО), во многом определяется функциональным состоянием яичников. У пациенток со сниженным овариальным резервом наблюдается уменьшение числа антральных фолликулов, снижение уровней антимюллерова гормона (АМГ), повышение уровня фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), а также снижение ответа яичников на гонадотропную стимуляцию [1–3]. Наиболее выраженной формой снижения овариального резерва является преждевременное истощение яичников (ПИЯ), сопровождающееся аменореей и стойкой гипергонадотропной недостаточностью у женщин в возрасте до 40 лет [4, 5].

По данным литературы, от 9 до 24% женщин, вступивших в программы ЭКО, демонстрируют признаки «бедного» ответа на стимуляцию [6]. Такая категория пациенток традиционно считается прогностически неблагоприятной с точки зрения получения зрелых ооцитов, формирования бластоцист и наступления беременности [7]. В связи с этим разработка методов активации функционального потенциала яичников, не связанных с использованием донорского материла, приобретает первостепенное значение [8].

Одним из перспективных направлений регенеративной медицины в области репродуктологии является применение мезенхимальных стромальных клеток (МСК), обладающих способностью к миграции в ткани, парциальной дифференцировке и паракринной секреции биологически активных молекул [9]. Однако в последние годы внимание исследователей сосредоточено на использовании не самих клеток, а продуктов их секреции – гетерогенной популяции внеклеточных везикул (ВВ), включающей экзосомы и микровезикулы [10, 11].

Несмотря на общий термин «внеклеточные везикулы», экзосомы и микровезикулы представляют собой различные субпопуляции, отличающиеся механизмом биогенеза, размером и молекулярным составом. Экзосомы (30–150 нм) формируются во внутриклеточных мультивезикулярных тельцах и содержат богатый набор нуклеиновых кислот (микроРНК, мРНК), цитокинов и сигнальных белков. Микровезикулы (100–1000 нм) отшнуровываются непосредственно от плазматической мембраны и часто несут на своей поверхности мембранные рецепторы и адгезивные молекулы родительской клетки [12]. Предполагается, что эти различия определяют и различный механизм взаимодействия с клетками-мишенями, а также потенциально синергический терапевтический эффект. В исследованиях на животных моделях введение экзосом МСК способствовало снижению апоптоза гранулезных клеток, активации пролиферации, восстановлению ангиогенеза и секреции стероидов в ткани яичника [13, 14].

В доклинических условиях показано, что терапия экзосомами обеспечивает эффекты, сопоставимые с трансплантацией МСК, но обладает рядом преимуществ: сниженный иммуногенный риск, отсутствие ядра и ДНК, возможность стандартизации, длительного хранения и транспортировки [8, 10]. Более того, экзосомы являются идеальными носителями микроРНК и регуляторных белков, действующих на сигнальные пути PIЗК/АКТ и Hippo, играющие ключевую роль в регуляции оогенеза [13, 15].

Несмотря на значительный объем доклинических данных, клинические исследования применения внеклеточных везикул МСК в программах ЭКО крайне ограничены. Отдельные пилотные работы показали потенциальную эффективность подобного подхода при ПИЯ и резистентности к стандартной стимуляции [16]. Однако систематизированных данных о влиянии экзосом МСК на исходы ЭКО, такие как частота получения зрелых ооцитов и наступления беременности, на сегодняшний день недостаточно.

Таким образом, целью настоящего исследования явилось восполнение пробела в клинической доказательной базе и оценка терапевтической эффективности интраовариального введения ВВ, полученных из плацентарных МСК, у женщин со сниженным овариальным резервом и «бедным» ответом в программах ЭКО.

Мы выдвинули гипотезу, что интраовариальное введение ВВ-МСК статистические значимо улучшит показатели овариального ответа и частоту наступления беременности, по сравнению со стандартным ведением таких пациенток.

Материалы и методы

Дизайн исследования

Настоящее проспективное рандомизированное контролируемое испытание (1:1) проводилось на базе отделения вспомогательных репродуктивных технологий ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России с января 2022 г. по март 2024 г. Исследование имело открытый (неослепленный) дизайн. Оценивалось влияние интраовариального введения ВВ, полученных из МСК плаценты, на показатели овариального ответа, параметры эмбриогенеза и частоту наступления беременности у женщин со сниженным овариальным резервом в программе ЭКО/ИКСИ. Основным исходом (primary outcome) являлась частота наступления клинической беременности (наличие гестационного мешка по данным ультразвукового исследования). Вторичными исходами (secondary outcomes) были количественные показатели овариального ответа и эмбриогенеза (число полученных ооцитов, число зрелых (MII) ооцитов, число зигот с двумя пронуклеусами (2PN), число полученных бластоцист,...

Мартиросян Я.О., Бирюкова А.М., Силачев Д.Н., Попов К.В., Назаренко Т.А., Сухих Г.Т.