Формирование биопленок условно-патогенными микроорганизмами, выделенными из вагинального биотопа

Цель. Оценка способности изолятов условно-патогенных микроорганизмов, выделенных из вагинального биотопа, формировать моновидовые биопленки in vitro. 
Материалы и методы. В исследование были включены 142 изолята микроорганизмов, выделенных из вагинального биотопа: Lactobacillus crispatus (n=9), Lactobacillus jensenii (n=6), Lactobacillus iners (n=1), Lactobacillus rhamnosus(n=1), Lactobacillus reuteri (n=1), Gardnerella vaginalis (n=13), Escherichia coli (n=23), Streptococcus agalactiae (n=39), Enterococcus faecalis (n=29) и дрожжеподобных грибов рода Candida (n=20). Образование биопленок оценивали в 96-луночном стерильном плоскодонном полистироловом планшете. 
Результаты. Формирование биопленок in vitro было отмечено у 108/142 (76,1%) изолятов микроорганизмов. Большинство клинических изолятов Lactobacillus spp. (17/18; 94,4%) образовывали биопленки разной степени выраженности: L. crispatus (9/9; 100%) и большинство L. jensenii (5/6; 83,3%) – слабые или умеренные биопленки; L. rhamnosus, L. reuteri и один изолят L. jensenii – выраженную биопленку. Все исследуемые изоляты G. vaginalis характеризовались способностью формировать биопленки: слабые – 2/13 (15,4%), умеренные – 3/13 (23,1%) и выраженные – 8/13 (61,5%). Среди изолятов Candida spp. биопленки in vitro формировали 18/20 (90%), при этом ни один из них не относился к категории слабо образующих биопленки. Способность образовывать биопленки разной степени плотности была выявлена у 26/39 (66,7%) изолятов S. agalactiae, 15/29 (51,7%) изолятов Enterococcus faecalis, 19/23 (82,6%) изолятов E. coli. 
Заключение. Изоляты условно-патогенных микроорганизмов, выделенные из вагинального биотопа, способны образовывать моновидовые биопленки in vitro. Необходимо проводить дальнейшие исследования для создания условий образования «смешанных» или полимикробных биопленок in vitro.

Вклад авторов. Хуснутдинова Т.А. – обзор литературы, микробиологические исследования, анализ полученных данных, написание текста, редактирование; Шалепо К.В. – микробиологические исследования, анализ полученных данных, написание текста, редактирование; Будиловская О.В., Крысанова А.А. – обработка и анализ полученных данных, редактирование текста; Савичева А.М., Беспалова О.Н. – концепция и дизайн исследования, редактирование текста, одобрение окончательной версии статьи. Все авторы внесли существенный вклад в разработку концепции, проведение исследования и подготовку статьи, прочитали  и одобрили финальную версию перед публикацией. 
Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.
Финансирование. Исследование выполнено в рамках ФНИ «Создание биологических моделей нарушений репродуктивной функции для разработки индивидуальных подходов к фармакологической коррекции»
(FGWN-2026-00014). Номер темы: 1025102300010-7-3.2.2.
Одобрение этического комитета. Протокол исследования был одобрен локальным этическим комитетом ФГБНУ «НИИ АГиР им. Д.О. Отта» № 147 от 05.03.2026 г.
Генеративный искусственный интеллект. При подготовке статьи технологии генеративного искусственного интеллекта не использовали.
Обмен исследовательскими данными. Данные, подтверждающие выводы этого исследования, доступны по запросу у автора, ответственного за переписку, после одобрения ведущим исследователем.
Для цитирования: Хуснутдинова Т.А., Шалепо К.В., Будиловская О.В., Крысанова А.А., Савичева А.М., Беспалова О.Н. Формирование биопленок условно-патогенными микроорганизмами, 
выделенными из вагинального биотопа.
Акушерство и гинекология. 2026; 9: 117-125
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2026.109

Вагинальный микробиом является важной составляющей репродуктивного здоровья женщины и представляет собой сложную и динамичную экосистему, играющую значимую роль как в физиологических процессах, так и в развитии патологических состояний. В поддержании гомеостаза вагинальной микроэкосистемы ключевую роль играют лактобациллы, продуцирующие различные антимикробные соединения, такие как молочная кислота, перекись водорода и бактериоцины. Колонизация и доминирование лактобацилл (Lactobacillus crispatus, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus jensenii и Lactobacillus iners) являются важными признаками вагинальной микробиоты здоровых женщин, в то время как нарушение баланса – снижение количества лактобацилл и/или чрезмерное количество условно-патогенных микроорганизмов – приводит к дисбиозу влагалища. Дисбиотическое состояние, характеризующееся замещением нормальной лактобациллярной микрофлоры большим количеством облигатных и факультативных анаэробных микроорганизмов, таких как Gardnerella vaginalis, Fannyhessea vaginae, Prevotella spp., Mobiluncus spp. и др., приводит к развитию бактериального вагиноза. Преобладание аэробной условно патогенной микрофлоры, главным образом Streptococcus spp., Staphylococcus spp., Enterococcus spp., бактерий семейства Еnterobactеriасеае (Escherichia coli, Klebsiella spp. и др.), характерно для аэробного вагинита. Streptococcus agalactiae могут быть причиной тяжелой патологии у беременных женщин, родильниц и новорожденных детей. Дрожжеподобные грибы рода Candida являются в большинстве случаев причиной кандидозного вульвовагинита [1]. Кроме того, вагинальная микрофлора может быть одним из источников контаминации дистальной части уретры, что может приводить к бактериурии, либо бессимптомной, либо клинически выраженной [2]. Присутствие одновременно нескольких возбудителей (аэробные и/или факультативно-анаэробные микроорганизмы и/или грибы) способствует выраженному нарушению вагинальной микробиоты и появлению более сложной клинической картины вульвовагинитов смешанной этиологии [3]. Важной клинической проблемой являются рецидивирующие вульвовагинальные инфекции, одной из причин возникновения которых рассматривается формирование биопленок.

Биопленки представляют собой сложные структуры, состоящие из консорциума микроорганизмов, окруженных внеклеточным полимерным матриксом. В составе биопленок клетки менее восприимчивы к факторам иммунной защиты макроорганизма, проявляют повышенную устойчивость к химиотерапевтическим препаратам по сравнению с планктонными формами. Кроме того, микроорганизмы внутри биопленок могут переходить в состояние покоя или медленного роста, что делает их менее восприимчивыми к действию лекарственных препаратов [4].

Существует достаточно большое количество методов, позволяющих провести оценку способности микроорганизмов формировать биопленки: анализ образования биопленок в микротитровальных планшетах, метод флуоресцентной гибридизации in situ (FISH); для изучения ультраструктуры микробных сообществ – электронная микроскопия и конфокальная лазерная сканирующая микроскопия [5, 6]. Простота выполнения, высокая производительность и низкая стоимость метода определения биопленок в полистироловых плоскодонных планшетах, а также возможность оценки образования биопленки разными штаммами (бактерии, грибы) в различных условиях роста сделали этот анализ основным инструментом в изучении биопленкообразующей способности микроорганизмов. Метод основан на сорбции молекул красителя на структурах биопленки с последующей их отмывкой (десорбцией) в органические растворители. Такой способ индикации наиболее часто используется в статических методах культивирования биопленок и позволяет дать условную количественную характеристику образовавшимся микробным сообществам, т.е. чем больше образуется матрикс биопленки, тем больше красителя сорбируется на его поверхности и тем выше оптическая плотность образца.

Целью данного исследования была оценка способности изолятов условно-патогенных микро­организмов, выделенных из вагинального биотопа, формировать моновидовые биопленки in vitro.

Материалы и методы

Используемые в работе изоляты были получены при анализе клинического материала (отделяемое влагалища) от женщин репродуктивного возраста, проходивших обследование в НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта в 2024–2025 гг. Исследовано 142 изолята микроорганизмов: Lactobacillus crispatus (n=9), Lactobacillus jensenii (n=6), Lactobacillus iners (n=1), Lactobacillus rhamnosus(n=1), Lactobacillus reuteri (n=1), Gardnerella vaginalis (n=13), Escherichia coli (n=23), Streptococcus agalactiae (n=39), Enterococcus faecalis (n=29) и дрожжеподобных грибов рода Candida (n=20). Данное исследование не предполагало проведение корреляционного анализа способности микроорганизмов образовывать биопленки с симптоматикой заболеваний влагалища, их рецидивирующим течением или исходами терапии.

Для культивирования, хранения и дальнейшего исследования использовали плотные и жидки...

Хуснутдинова Т.А., Шалепо К.В., Будиловская О.В., Крысанова А.А., Савичева А.М., Беспалова О.Н.