Характеристика патогенного потенциала штаммов Staphylococcus aureus, выделенных из секрета простаты при хроническом бактериальном простатите

Цель исследования. Провести анализ генов, детерминирующих факторы патогенности у штаммов стафилококков, выделенных из секрета простаты при хроническом бактериальном простатите.
Материалы и методы. Из секрета простаты мужчин репродуктивного возраста (20–45 лет) с хроническим бактериальным простатитом выделяли стафилококки общепринятым бактериологическим методом. Вид стафилококков определяли методом MALDI-TOF масс-спектрометрии. Гены вирулентности стафилококков – ПЦР и секвенированием.
Результаты. У выделенных штаммов установлено широкое распространение генетических детерминант патогенности, а именно адгезии, колонизации, инвазии, иммунорезистентности. Показано, что большинство генов связано с уклонением от иммунного ответа хозяина во время инфекции, что способствует хроническому течению бактериального простатита.
Заключение. Целесообразно дальнейшее изучение генетических детерминант патогенности/вирулентности золотистых стафилококков для оценки тяжести и длительности течения хронического бактериального простатита.

Введение. Хронический бактериальный простатит (ХБП) представляет актуальную проблему современной урологии и андрологии, поскольку затрагивает многие звенья репродуктивного здоровья мужчин. Заболевание является ведущей нозологией в структуре заболеваний мужской репродуктивной системы и значительно снижает качество жизни мужской популяции [1]. ХБП – хроническое рецидивирующее инфекционно-воспалительное заболевание предстательной железы, преимущественно бактериальной этиологии.

Способность микроорганизмов вызывать ту или иную патологию зависит от набора патогенных признаков штамма-возбудителя и реакции иммунной системы организма-хозяина. В последние годы в фокусе исследований причин развития хронического бактериального простатита находятся различные звенья системы иммунитета [2, 3], изучается микробиоценоз секрета простаты [4–6], однако патогенные свойства микроорганизмов, в частности стафилококков, выделенных при хроническом бактериальном простатите, изучены недостаточно [7, 8], хотя и отмечается, что рецидивы инфекционного воспалительного ХП могут быть следствием персистенции микроорганизмов в железе [9].

Известно, что стафилококки способствуют развитию инфекционно-воспалительных осложнений, а также рецидиву заболевания, что обусловлено наличием у них широкого спектра факторов патогенности, которые детерминируются определенными генами [10].

Цель исследования. Проведение анализа генов, детерминирующих факторы патогенности у штаммов стафилококков, выделенных из секрета простаты при хроническом бактериальном простатите.

Материалы и методы. В исследование были включены 26 мужчин репродуктивного возраста с ХБП, находящихся на амбулаторном лечении у уролога отделения охраны репродуктивного здоровья Оренбургского областного перинатального центра. Алгоритм исследования пациентов включал сбор анамнеза, оценку жалоб, физикальные методы, в т.ч. трансректальное ультразвуковое исследование предстательной железы (ПЖ). Также проводили анкетирование с помощью шкалы оценки симптомов ХБП Национального института здоровья США (NIH-CPSI) [11] и Международного индекса эректильной функции (IIEF-5) [12].

Критерии постановки диагноза ХБП и включения пациентов в исследование: 1. Клинические признаки (один или несколько); боль различной локализации (в промежности, мошонке, крестце, паховой области и т.д.); расстройства мочеиспускания (учащенное мочеиспускание, вялая или прерывистая струя мочи, чувство неполного опорожнения мочевого пузыря, боль во время мочеиспускания); нарушение эякуляции (преждевременная эякуляция, боли при и после эякуляции, гипоспермия). 2. Увеличение числа лейкоцитов в секрете ПЖ (более 10–15 в поле зрения) или в моче, полученной после массажа ПЖ. 3. Культуральное подтверждение возбудителя ХБП. 4. Длительность заболевания не менее года. 5. Возраст – 20–45 лет.

Пациенты с инфекциями, передаваемыми половым путем, исключены из исследования. При обследовании пациентов соблюдены акты национального стандарта РФ ГОСТ З 52379-2005 о надлежащей клинической практике [13]. Забор и исследование биологического материала от людей одобрены Локальным этическим комитетом (протокол № 2 заседания ЛЭК ИКВС УрО РАН от 27.04.2021 г.).

Секрет простаты после массажа ПЖ собирали в стерильные емкости и доставляли в лабораторию в течение 15 минут. Выделение стафилококков из исследуемого материала проводили общепринятыми методами бактериологического исследования. Исследуемый материал засевали на селективную среду для стафилококков – желточно-солевой агар. Видовую принадлежность оценивали с помощью времяпролетной масс-спектрометрии (MALDI-TOF MS) экстрагированных матриксом белков суточной культуры на анализаторе MALDI-TOF серии Microflex (Bruker Daltonics, Германия), идентификацию микроорганизмов с расчетом коэффициента достоверности проводили с использованием программного обеспечения Maldi BioTyper 3,0.

Бактериальную дезоксирибонуклеиновую кислоту экстрагировали с помощью реактивов «ДНК-экспресс» («Литех», Россия). Циклический синтез фрагментов ДНК осуществляли с использованием амплификатора «Терцик МС-2» («ДНК-технология», Россия). Гены вирулентности стафилококков определяли полимеразной цепной реакцией (ПЦР) при помощи соответствующих тест-систем производства ЦНИИЭ РПН и секвенированием в ЦНИИ эпидемиологии РПН (Москва).

Всего изучено шесть изолятов S.aureus.

Результаты. Спектр генов, детерминирующих факторы вирулентности Staphylococcus aureus, выделенных из секрета простаты при хроническом бактериальном простатите, представлен в таблице.

Характерной особе...

Кузьмин М.Д., Карташова О.Л., Капустина О.А., Пашкова Т.М., Попова Л.П., Гриценко В.А.