Матриксная металлопротеиназа-11 как потенциальный опухолевый маркер лейомиомы матки

Цель. Оценка специфической активности иммуноглобулинов сывороток крови в отношении белка матриксная металлопротеиназа-11 (matrix metalloproteinase-11, MMP11) в группах многодетных матерей и пациенток с миомой матки.
Материалы и методы. Клонирован фрагмент кДНК, содержащий ген MMP11 из клеточной линии с повышенной экспрессией данного белка, получен продуцент белка MMP11 в E. coli, проведена очистка рекомбинантного белка, после чего он был использован для исследования предельного титра антител в сыворотках крови пациентов с применением непрямого иммуноферментного анализа. Сыворотки доноров крови (100 образцов) отбирали среди пациентов, проходивших лечение в НМИЦ АГП
им. В.И. Кулакова МЗ РФ, давших информированное согласие на участие в исследовании. Для исследования иммунологической активности сывороток в отношении белка MMP11 было сформировано четыре группы пациентов: контрольная группа мужчин; группа женщин без диагностированных миом, у которых в анамнезе имелось пять или более успешно завершившихся беременностей; группа женщин с миомами, также с пятью или более успешно завершившимися беременностями, а также женщины с рецидивирующими миомами. Экспрессионная конструкция, содержащая ген MMP11, была встроена в геном E. coli, в результате чего данный белок был получен в препаративных количествах, достаточных для изучения его реакции с антителами из сывороток крови различных групп пациенток.
Результаты. Анализ данных, полученных с помощью иммуноблоттинга, показал, что в сыворотках крови многодетных женщин без миом содержатся антитела на белок MMP11, что дало основания для более широкого исследования иммунологической реактивности сывороток крови различных групп пациентов в отношении данного белка. Наиболее высокую реактивность в отношении MMP11 показали сыворотки многодетных женщин в целом (при этом среднее значение для подгруппы многодетных женщин с миомами было выше, но статистически не значимо); у пациенток с миомами реактивность была ниже, чем в первой подгруппе, у контрольной группы (мужчины) – самой низкой. При этом статистический анализ выявил значимые различия между группами при всех разведениях, то есть имеет место дозозависимость иммунологической реакции.
Полученные результаты подтверждают наличие статистически значимых различий в реактивности сывороток между исследованными группами; при этом выявленная дозозависимая динамика соответствует ожидаемым иммунологическим закономерностям.
Заключение. Согласно полученным данным, белок MMP11 вступает в реакции с антителами из сывороток различных групп пациентов, при этом в группе многодетных матерей был выявлен более высокий уровень иммунного ответа на данный белок. Белок ММP11 может в дальнейшем быть полезен в процессе разработки и тестирования новой таргетной профилактической терапии миомы матки. 

Вклад авторов. Кузнецова М.В. – обзор литературы, концепция и дизайн исследования; Позднякова Н.В. – клонирование белка; Карягина В.Е. – идентификация белков, блот-анализ; Тоноян Н.С – сбор биоматериала; Быкова Д.В. – проведение иммуноферментного анализа; Трубникова Е.В. – статистическая обработка данных; Кузнецова М.В., Трубникова Е.В. – написание и редактирование текста. 
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии возможных конфликтов интересов.
Финансирование. Проект РНФ 23-15-00069 «Разработка профилактической вакцины для предотвращения развития лейомиомы матки у пациенток, планирующих беременность».
Одобрение этического комитета. Исследование было одобрено Комиссией по этике биомедицинских исследований при ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России (протокол от 23.05.2024).
Генеративный искусственный интеллект. При создании данной статьи технологии генеративного искусственного интеллекта не использовали.
Согласие пациентов на публикацию. Все пациенты подписали добровольное информированное согласие на публикацию полученных данных.
Обмен исследовательскими данными. Данные, подтверждающие выводы этого исследования, доступны по запросу у автора, ответственного за переписку, после одобрения ведущим исследователем.
Для цитирования: Кузнецова М.В., Позднякова Н.В., Быкова Д.В., Карягина В.Е., Тоноян Н.М., Трубникова Е.В. Матриксная металлопротеиназа-11 как потенциальный опухолевый маркер лейомиомы матки.
Акушерство и гинекология. 2026; 6: 125-134
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2025.322

Наиболее распространенная доброкачественная опухоль женской репродуктивной системы – миома матки – чаще всего встречается у женщин в возрасте 35–50 лет (частота 30–35%). Однако в последнее время наблюдается тенденция к появлению опухолей в более раннем возрасте – 25 лет и даже младше. При этом за последние 40 лет частота возникновения миомы матки у женщин в возрасте до 30 лет увеличилась с 2 до 12,5%, а пик заболеваемости приходится именно на репродуктивный период [1–3].

В работах, посвященных метатранскриптомным и метаметиломным исследованиям лейомиом [4, 5], приводятся данные, согласно которым в клетках лейомиом наблюдается экспрессия ряда специфических генов, которые не функционируют ни в одном из типов нормальных тканей взрослого организма, но экспрессируются при развитии эмбриона. Среди таких генов, в частности, встречаются гены матриксных металлопротеиназ – MMP11 и MMP16.

Матриксные металлопротеиназы – это внеклеточные ферменты, которые расщепляют внеклеточный матрикс, а также регулируют активность цитокинов и факторов роста [6].

Металлопротеиназа-11 (matrix metalloproteinase-11, MMP11), также известная как стромелизин-3, относится к подгруппе стромелизинов, входящей в суперсемейства металлопротеиназ. Белок MMP11 участвует в ремоделировании тканей во время эмбриогенеза, инволюции тканей, заживлении ран и метаморфозе [7–9]. В нормальных тканях взрослого организма этот ген не экспрессируется, и впервые белок MMP11 был выделен и описан из опухоли рака молочной железы – инвазивной карциномы [10].

Кроме того, известно, что высокая экспрессия ММР11 обнаруживается в тканях опухолей при самых различных видах рака, включая рак мочевого пузыря [11], полости рта [12], десмоидную фиброму [13], рак легких [14], карциному пищевода и поджелудочной железы [15, 16], агрессивную менингиому [17], карциному яичников [18], рак толстой кишки [19].

Согласно нашим данным [20], у человека ген MMP11 является важным специфическим маркером узлов лейомиомы MED12-зависимого типа, то есть миом, которые составляют 50% и более от всех узлов [21].

Предполагается, что по мере развития беременности у женщины некоторые белки, присутствующие в организме плодов, проникают в организм матери и могут вызывать иммунизацию. В нашей ранее опубликованной работе высказывалась гипотеза о том, что резкое сокращение риска развития лейомиом у женщин с пятью и более удачными беременностями в анамнезе обусловлено выработкой антител к эмбриональным белкам плода, которые одновременно могут являться опухолевыми маркерами, характерными для лейомиом [22]. На этом основании было выдвинуто предположение о возможности создания профилактической вакцины на основе таких опухолевых маркеров, которая предотвращала бы риск рецидивирования лейомиом за счет распознавания антителами и уничтожения клеток миометрия, прошедших опухолевую трансформацию и переродившихся в клетки-предшественники миоматозного узла.

Сама возможность создания профилактических противоопухолевых вакцин именно с использованием гена MMP11 подтверждается экспериментальными данными. Так, в статье Peruzzi D. et al. (2009) на мышиной модели в качестве основы противоопухолевой вакцины была использована MMP11 мыши. При этом была достигнута эффективная защита животных от развития рака толстой кишки [23].

Целью данного исследования являлась оценка специфической активности иммуноглобулинов сывороток крови в отношении белка MMP11 в группах многодетных матерей и пациенток с миомой матки.

Материалы и методы

Клинические материалы

В рамках проводимого исследования в 2023–2025 гг. отбирались сыворотки доноров крови среди пациентов, проходивших лечение в ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова» и добровольцев.

Критерии включения: возраст 18–60 лет; подтвержденный лабораторно и инструментально диагноз лейомиомы для группы пациенток с лейомиомами.

Критерии исключения: возраст менее 18 лет; злокачественные заболевания в активной фазе; отсутствие данных, подтверждающих рассматриваемый диагноз; отказ пациента от включения в исследование.

Схема исследования была утверждена этическим комитетом ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России, и все участники предоставили письменное информированное согласие. Благодаря этому был доступен клинический анамнез всех доноров. Было собрано 38 образцов крови многодетных женщин, имевших пять или более успешно завершившихся беременностей (среди них была выделена подгруппа пациенток, у которых были небольшие миомы, 14 человек); 50 образцов от женщин с миомами; в качестве контроля были собраны образцы от мужчин в количестве 12 человек.

Венозную кровь каждого донора объемом 5–7 мл отбирали в вакутейнеры, инкубировали при комнатной температуре 15 минут и центрифугировали при 3000 g в течение 10 минут. После этого образовавшуюся сыворотку отбирали со сгустка в чистую пробирку, распределяли на аликвоты по 0,5 ...

Кузнецова М.В., Позднякова Н.В., Быкова Д.В., Карягина В.Е., Тоноян Н.М., Трубникова Е.В.