Анализ полиморфных аллелей гена HLA I класса (G) у беременных Северо-Западного региона Российской Федерации

Актуальность: Система HLA I класса контролирует взаимодействие всех иммунокомпетентных клеток организма и определяет распознавание своих и чужеродных (в том числе измененных собственных) клеток, запуская и реализуя иммунный ответ: при процессе имплантации, трансплантации чужеродных органов и тканей, аутоиммунных заболеваниях, развитии онкологических заболеваний. Так, на основании данных мировой и отечественной литературы была продемонстрирована способность белковых продуктов экспрессии гена HLA-G модулировать пролиферацию клеток иммунной системы, а также силу и специфичность иммунного ответа.
Цель: Провести молекулярно-биологическое исследование 9 полиморфных аллелей гена HLA-G в группе беременных в I триместре гестации в популяции Северо-Западного региона РФ и определить связь с отягощенным акушерским анамнезом.
Материалы и методы: Проведено исследование образцов ДНК 180 жителей Северо-Западного региона РФ на базе ФГБНУ «НИИ АГиР им. Д.О. Отта» г. Санкт-Петербурга за период с 2019 по 2022 гг.: 1-я группа – 33 беременных с репродуктивными нарушениями (один выкидыш и более, неразвивающаяся беременность, неудачи вспомогательных репродуктивных технологий); 2-я (контрольная) группа – 29 беременных без отягощенного акушерского анамнеза; группу сравнения составили 118 человек из популяции Северо-Западного региона РФ, в которой был проведен ассоциативный анализ полиморфных аллелей гена HLA-G (725*С/G, 3741*ins/del 14 п.н) и группы аллелей HLA-G*01:01, G*01:02, G*01:03, G*01:04, G*01:05N, G*01:06 и G*01:07.
Результаты: При анализе полиморфизма 3741*ins/del 14 п.н. частота генотипа Del/Del составила 13/33 (39,40%) у беременных с репродуктивными нарушениями против 5/29 (17,24%) в группе контроля (р=0,052), а аллель Ins был определен в 1,4 раза чаще в группе без отягощенного акушерского анамнеза (20/33 (60,6%) и 24/29 (82,8%) соответственно, р=0,056). Согласно рассчитанному коэффициенту, отношения шансов носителя сочетанного генотипа Del/Del и C/C определяются в 9 раз чаще среди пациенток с репродуктивными нарушениями в анамнезе по сравнению с контролем (OR=8,96; 95% ДИ l,05–76,74). Отмечено, что в 1-й группе аллель HLA-G*01:05N был определен в 3,5 раза чаще, чем в популяционной выборке.
Выводы: Полученные данные позволяют судить об ассоциации аллелей гена HLA-G с отягощенным акушерским анамнезом и могут быть важны для оценки риска ранних репродуктивных потерь, а также для разработки новых стратегий профилактики и лечения данного осложнения беременности.

Вклад авторов: Беспалова О.Н., Иващенко Т.Э. – концепция и дизайн исследования; Шенгелия М.О., Франк Н.И., Султанов И.Ю. – сбор и обработка материала; Шенгелия М.О. – статистическая обработка данных; Беспалова О.Н., Шенгелия М.О. – написание текста; Беспалова О.Н., Насыхова Ю.А., Глотов А.С. – редактирование.
Конфликт интересов: Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Финансирование: Статья подготовлена к публикации в рамках выполнения государственного задания Министерства науки и высшего образования Российской Федерации №АААА-А20-120041390025-9 «Разработка диагностических критериев прогнозирования ранних репродуктивных потерь на основании экспрессии антигенов главного комплекса гистосовместимости I класса G, E, C».
Одобрение Этического комитета: Исследование было одобрено локальным Этическим комитетом ФГБНУ «НИИ АГиР им. Д.О. Отта».
Согласие пациентов на публикацию: От каждого из включенных в исследование участников было получено информированное добровольное согласие.
Обмен исследовательскими данными: Данные, подтверждающие выводы этого исследования, доступны по запросу у автора, ответственного за переписку, после одобрения ведущим исследователем.
Для цитирования: Шенгелия М.О., Беспалова О.Н., Иващенко Т.Э., Франк Н.И., Султанов И.Ю., Насыхова Ю.А., Глотов А.С. Анализ полиморфных аллелей гена HLA I класса (G) у беременных Северо-Западного региона Российской Федерации.
Акушерство и гинекология. 2023; 3: 99-108
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2022.270

Известно, что под контролем системы человеческих лейкоцитарных антигенов (Human Leukocyte Antigens, HLA) I класса находится взаимодействие иммунной системы в целом и всех иммунокомпетентных клеток организма в частности [1]. На всех сроках гестации как на вневорсинчатых клетках трофобласта (EVT), так и на материнских лейкоцитах в децидуальной ткани на границе системы «мать–плацента–плод» существует уникальная комбинация экспрессии HLA. Известно, что на вневорсинчатом трофобласте экспрессируются полиморфные неклассические антигены HLA I класса (HLA-E, HLA-F, HLA-G), а также происходит продукция небольшого количества классического полиморфного HLA-C, который может служить источником полного распознавания материнскими иммунными клетками [2]. Эти гены высокополиморфны, и их белковые продукты экспрессии обладают рядом функций, таких как процессинг и представление антигенов, индукция смещения от провоспалительного к клеточноопосредованному ответу, ингибирование рецепторов натуральных киллеров (NK-клеток) с последующим снижением иммунного ответа на границе системы «мать–плацента–плод» с обеспечением иммунной толерантности к плоду [3]. Молекулы HLA класса Ib, наиболее изученной из которых является HLA-G, обладают другими функциями, по сравнению с классическими молекулами HLA класса I, являясь иммуномодулирующими, толерогенными и противовоспалительными [4].

Известно, что ген HLA-G экспрессируется в тканях, ограниченных в первую очередь иммуно-привилегированными участками, такими как плацента [5, 6]. Так, его экспрессия напрямую оказывает влияние на ремоделирование тканей и сосудов, а секретируемые молекулы sHLA-G (растворимой формы HLA-G) клеток вневорсинчатого трофобласта регулируют эндоваскулярную и децидуальную инвазию, что в последующем защищает эмбрион от атаки материнскими клетками иммунной системы [4, 7, 8]. Таким образом, при нарушении данного процесса возникает риск прерывания беременности на ранних сроках, часто клинически проявляющийся симптомокомплексом угрожающего выкидыша или неразвивающейся беременностью.

Причины ранних репродуктивных потерь крайне разнообразны. Установлено, что генетический фактор является одной из ведущих причин невынашивания беременности на ранних сроках. Генетические причины невынашивания беременности включают в себя не только хромосомные перестройки, но и наличие наследственной предрасположенности [9]. Невынашивание беременности является мультифакториальным заболеванием – результатом действия «функционально ослабленных» аллелей множества генов на фоне неблагоприятных внешних и внутренних факторов [10].

Полиморфизм гена, или полиморфные аллели гена, представляет собой многообразие нуклеотидных последовательностей гена [11]. В настоящее время в мировой и отечественной литературе хорошо изучен аллельный полиморфизм более 100 генов, относящихся к «генной сети невынашивания беременности», которые затрагивают различные системы при функционировании организма. Данные полиморфные варианты генов могут являться как триггерами развития патологического процесса, так и предрасполагающими факторами для его формирования.

В мировой и отечественной литературе описаны ассоциации гена HLA-G с акушерскими патологиями, такими как бесплодие, невынашивание беременности и неудачи вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), прямая связь с повышенным риском развития преэклампсии и синдрома задержки роста плода [6, 12, 13]. Известно, что полиморфные варианта гена могут затрагивать как его кодирующие, так и некодирующие области. Широко изученным полиморфизмом в некодирующей области была инсерция/делеция 14 пар нуклеотидов (п.н.) в экзоне 8 в положении 3741 (rs66554220), которая определяет альтернативный сплайсинг HLA-G, оказывая влияние на стабильность матричной РНК (мРНК) гена HLA-G [14]. По сравнению с генотипами 3741*ins/del 14 п.н. и 3741*del/del 14 п.н. гомозиготный генотип (+14 п.н./+14 п.н.) был связан с более низкими уровнями мРНК и растворимой формы HLA-G [15]. Было заключено, что полиморфизм HLA-G 3741*ins/del 14 п.н. может играть важную роль в модуляции экспрессии HLA-G, и женщины с привычными потерями плода и повторными неудачами имплантации при ВРТ могут иметь более высокую частоту пациенток со вставкой размером 14 п.н. В ряде эпидемиологических исследований изучалась связь между полиморфизмом 3741*ins/del 14 п.н. HLA-G и повторными неудачами имплантации [16–18]. Аллель с 3741*Ins/Ins и Ins/Del ассоциирован с пониженным количеством мРНК HLA-G с более низкими концентрациями мембран-ассоциированных и растворимых форм продуктов экспрессии гена HLA-G. По данным мировой и отечественной литературы установлена ассоциация аллеля 3741*ins/-14 п.н. с развитием синдрома привычной потери плода [19].

Доказано, что нулевая аллель HLA-G*01:05N встречается в 25% случаев у пациенток с угрожающим выкидышем среди населения Восточного Азербайджана, по сравнению с группой контроля (25 и 3,2% соответственно, p<0,001). Также результаты Naghavian E. et al. в своем исследовании продемонстрировали,...

Шенгелия М.О., Беспалова О.Н., Иващенко Т.Э., Франк Н.И., Султанов И.Ю., Насыхова Ю.А., Глотов А.С.