Андрогенный профиль у женщин с бесплодием в программах вспомогательных репродуктивных технологий в зависимости от овариального ответа

Цель: Оценить андрогенный профиль у женщин с бесплодием в программах ВРТ в зависимости от овариального ответа. Материалы и методы: В исследование вошли 150 женщин, обратившихся в ФГБУ «НМИЦ АГиП им. В.И. Кулакова» Минздрава России для достижения беременности в программе ЭКО/ИКСИ и подходящих под критерии включения. Группы были стратифицированы в зависимости от овариального резерва в соответствии со стратификацией по POSEIDON и овариального ответа на стимуляцию в соответствии с Болонскими критериями: 1-я группа – 50 пациенток со сниженным овариальным резервом (АМГ<1,2 нг/мл, КАФ<5) и бедным овариальным ответом на стимуляцию (≤3 ооцитов во время трансвагинальной пункции), 2-я группа – 100 пациенток с нормальным овариальным резервом (АМГ≥1,2 нг/мл, КАФ≥5), из них 50 пациенток с нормальным овариальным ответом (>9 ооцитов) и 50 пациенток со сниженным овариальным ответом (<9 ооцитов). Исследование андрогенного профиля как в сыворотке крови, так и фолликулярной жидкости проведено методом масс-спектрометрии. Результаты: Обнаружено статистически значимое снижение концентраций общего тестостерона и андростендиона в крови в зависимости от снижения овариального резерва и овариального ответа. У женщин со сниженным овариальным ответом статистически значимо было отмечено снижение в крови показателей общего тестостерона и андростендиона по сравнению с женщинами с нормальным овариальным резервом и нормальным ответом. Также наблюдалось снижение концентрации ДГЭА-С в фолликулярной жидкости со снижением овариального резерва и ответа яичников. Для андростендиона в фолликулярной жидкости отмечена обратная тенденция – с более низкими его показателями у женщин с нормальным овариальным ответом и нормальным овариальным резервом. Заключение: В работе впервые проведена сравнительная оценка андрогенного профиля у пациенток с бесплодием по данным «золотого стандарта» – масс-спектрометрии, свидетельствующая об изменениях уровней андрогенов и подтверждающая их роль при формирующемся дефиците андрогенов. Проведенное нами исследование подтверждает гипотезу о влиянии андрогенов на процессы фолликулогенеза и определяющем их вкладе в овариальный ответ. Полученные результаты позволяют патогенетически обосновать целесообразность проведения исследований по влиянию гормонального прайминга у женщин с бесплодием и сниженным овариальным резервом для блокирования апоптоза фолликулов и увеличения чувствительности к ФСГ.

Андрогены – это половые гормоны, которые имеют важное значение в функционировании как мужской, так и женской репродуктивных систем. У женщин андрогены играют доминирующую роль в процессах фолликулогенеза, что ярко демонстрирует синдром поликистозных яичников (СПЯ) [1]. В сыворотке крови у женщин в порядке убывания концентрации основными циркулирующими андрогенами являются дегидроэпиандростерон-сульфат (ДГЭА-С), дегидроэпиандростерон (ДГЭА), андростендион (А), тестостерон (Т) и дигидротестостерон (ДГТ) [2]. Андрогены реализуют эффекты через связывание с андрогенными рецепторами (АР), которые относятся к суперсемейству ядерных рецепторов [3]. Непосредственно с АР связываются только биоактивные андрогены, тестостерон и ДГТ, в то время как проандрогены, ДГЭА и А, для реализации андрогенных эффектов, требуют преобразования [4].

С возрастом у женщин происходит прогрессивное уменьшение фолликулярного резерва в яичниках, что коррелирует со снижением фертильности, максимально в период от 30 до 40 лет. Наряду с наблюдаемым снижением количества антральных фолликулов (КАФ), также понижается качество ооцитов [5]. Известно, что основным фактором риска бедного овариального ответа (БОО) является возраст [6]. Подобное происходит не только из-за уменьшения пула фолликулов в яичниках [7], но также и в результате понижения чувствительности яичников на фолликулостимулирующий гормон (ФСГ) [8] и снижения уровня предшественников андрогенов (ДГЭАС, ДГЭА, А) и биоактивного андрогена – тестостерона [2, 9].

Можно допустить также, что биодоступность андрогенов в яичниках может сопровождаться активацией овариального ответа. Однако в недавнем исследовании с использованием высокочувствительных и специфичных методов жидкостной хроматографии-масс-спектрометрии показано, что уровни андрогенов в крови или фолликулярной жидкости доминантного фолликула не являются предикторами результатов программ вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) [10]. Последнее инициирует дальнейшую дискуссию о роли андрогенов.

Сложности оценки показателей андрогенов обусловлены целым комплексом проблем, в том числе методом исследования биологических сред, используемым для диагностики различных клинических состояний. Так как молекула тестостерона характеризуется низкой молекулярной массой, то использование рутинных методов иммунохемилюминесцентного анализа (ИХЛА) не всегда в полной мере отражает циркулирующие уровни тестостерона, дополняя сложность тестирования различными реактивами определения и самой методикой исследования. «Золотым стандартом» определения стероидов в различных биологических жидкостях в настоящее время является жидкостная хроматография с масс-спектрометрией [11–13].

Фолликулярная жидкость обеспечивает критическую микросреду для развития ооцитов и представляет собой транссудат компонентов сыворотки и секрета тека-клеток и клеток гранулезы. Изучение ключевых регуляторных факторов в фолликулярной жидкости может предсказать физиологический статус созревающего ооцита, что важно для определения качества ооцита и его последующего потенциала стать жизнеспособной зиготой, адекватно поддерживающей развитие эмбриона.

Поскольку фолликулярная жидкость непосредственно участвует в метаболических процессах фолликулярной среды, а также сопряжена с качеством ооцитов, ее исследование актуально как при гиперандрогенных, так и при гипоандрогенных состояниях для оценки взаимосвязи с развитием сниженного овариального резерва (СОР) и БОО. Анализ корреляции между концентрациями андрогенов в сыворотке и фолликулярной жидкости представляется актуальным особенно в аспекте изучения СОР и БОО и для возможного определения андрогенного профиля в биологической среде и диагностического маркера снижения овариального резерва.

В связи с вышесказанным, целью данного исследования являлась оценка связи андрогенов в сыворотке крови и фолликулярной жидкости по данным ВЭЖХ-МС/МС у женщин с бесплодием в зависимости от овариального ответа в программах ВРТ (ЭКО/ИКСИ).

Материалы и методы

Было проведено одномоментное исследование в параллельных группах. Согласно критериям ESHRE (2011 г.) в исследование включены 150 пациенток с бесплодием, в период с 2019 по 2021 гг., обратившиеся в ФБГУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России для проведения программы ЭКО/ИКСИ и ПЭ. Средний возраст женщин составил 37,3 (2,4) лет. Все пациентки обследованы в соответствии с приказом 803Н Минздрава РФ и подписали информированное согласие для участия в исследовании. Критериями исключения из исследования были хирургическая менопауза, гистерэктомия, надпочечниковая недостаточность, гормонпродуцирующие опухоли, ожирение (ИМТ≥30 кг/м2) и дефицит массы тела (ИМТ≤18,5 кг/м2), ВИЧ-инфекция и другие иммунодефицитные состояния, иммуновоспалительные ревматические заболевания, иммуномодулирующая терапия, онкологические заболевания.

Пациенты были разделены на группы в зависимости от уровня овариального резерва, в соответствии со стратификацией по POSEIDON, и овариального о...

Гависова А.А., Киндышева С.В., Стародубцева Н.Л., Франкевич В.Е., Долгушина Н.В.