Ассоциация между частотами встречаемости однонуклеотидных полиморфизмов в генах ZNF366 и VEZT и риском развития наружного генитального эндометриоза: данные по российской популяции

Цель исследования. Определить частоту встречаемости rs10859871 и rs4703908 среди женщин с различными формами наружного генитального эндометриоза (НГЭ) (эндометриоидные кисты яичников, глубокий инфильтративный эндометриоз и эндометриоз брюшины малого таза) в российской популяции. Материал и методы. Коллекция: образцы периферической крови от 143 пациенток с НГЭ и 75 пациенток без этого заболевания. Сбор образцов производился непосредственно во время операции. ДНК всех образцов была амплифицирована с праймерами на участки генома rs10859871 и rs4703908. Последовательности фрагментов были определены путем секвенирования методом Сенгера. Генотипирование аллельных состояний каждого однонуклеотидного полиморфизма проводилось визуально по хроматограммам с помощью программы BioEdit. Результаты. Выявлена положительная ассоциация гетерозиготного генотипа C/G локуса rs4703908 и риска развития эндометриоидных кист яичников (OR=1,78; 95%CI: 0,88-3,62; p>0,05) и глубокого инфильтративного эндометриоза (OR=2,02; 95%CI: 0,85-4,73; p>0,05). Выявлена положительная ассоциация C/G локуса rs4703908 и риска развития эндометриоза брюшины малого таза (OR=1,24; 95%CI: 0,49-3,16; p>0,05), однако OR не превышало 1,5. Выявлена положительная ассоциация гомозиготного генотипа СС локуса rs10859871 и риска развития эндометриоидных кист яичников (OR=5,61; 95%CI: 1,8-17,49; р<0,01), глубокого инфильтративного эндометриоза (OR=5,92; 95%CI: 1,68-20,83; p<0,01) и эндометриоза брюшины малого таза (OR=4,44; 95%CI: 1,15-17,07; p<0,05) по сравнению с условно здоровыми женщинами основной группы сравнения. Отмечается отрицательная ассоциация гомозиготного генотипа АА локуса rs10859871 и риска развития эндометриоидных кист яичников (OR=0,77; 95%CI: 0,40-1,45; p>0,05), глубокого инфильтративного эндометриоза (OR=0,44; 95%CI: 0,19-1,00; p<0,05), эндометриоза брюшины малого таза (OR=0,58; 95%CI: 0,25-1,38; p<0,05). Заключение. Гетерозиготный генотип C/G локуса rs4703908, расположенный вблизи ZNF366 гена, связан с повышенным риском развития эндометриоидных кист яичников и глубокого инфильтративного эндометриоза в российской популяции. Гомозиготный генотип СС локуса rs10859871, расположенный вблизи VEZT гена, обеспечивает значительно более высокий риск развития всех форм НГЭ в российской популяции (аутосомно-рецессивная модель наследования). Гомозиготный генотип АА локуса rs10859871 выполняет протективную роль и снижает риск развития эндометриоидных кист яичников, глубокого инфильтративного эндометриоза, эндометриоза брюшины малого таза. Результаты нашего исследования делают rs10859871 вероятным кандидатным маркером, тестирование по которому может выявлять повышенную вероятность развития НГЭ у женщин российской популяции.

Эндометриоз – процесс, при котором за пределами полости матки происходит доброкачественное разрастание ткани, по морфологическим и функциональным свойствам подобной эндометрию [1].

В структуре гинекологической заболеваемости эндометриоз занимает 3-е место после воспалительных заболеваний и миомы матки, приводя к значительным нарушениям репродуктивной функции, стойкому болевому синдрому (71–87%) и бесплодию (21–47%). Эндометриоз поражает 10% женщин репродуктивного возраста и 35–50% женщин с тазовой болью и бесплодием [1–3].

Причины развития эндометриоза до настоящего времени неизвестны, однако предполагается, что важную роль играют многочисленные факторы окружающей среды и наследственные факторы [4, 5].

На основании изучения 3096 близнецов наследуемость эндометриоза (пропорция наличия болезни к наследственным факторам) была оценена в пределах 52% [5].

Проведенные исследования по полногеномному поиску ассоциаций (англ. GWAS, Genome-Wide Association Studies) позволили определить некоторые однонуклеотидные полиморфизмы (SNPs, Single nucleotide polymorphism), связанные с предрасположенностью к развитию заболевания [6].

Проведено четыре GWAS-исследования: два GWAS были опубликованы в 2010 г. на данных по японской популяции [7, 8]; GWAS на женщинах Европы было проведено в 2011 г. Международным Консорциумом EndoGene, в него также вошли данные по населению Австралии и Великобритании с независимым анализом аналогичных данных по американской популяции [9]; американское GWAS было проведено на женщинах европеоидной расы и опубликовано в 2013 г. [10].

В 2014 г. был проведен метаанализ, основанный на четырех GWAS-исследованиях и включивший 11 506 женщин с эндометриозом и 32 678 здоровых женщин как группу контроля; исследование было выполнено на женщинах европейской (Австралия, Бельгия, Италия, Великобритания и США) и японской популяций. Найдено 9 локусов связанных с развитием эндометриоза, из которых шесть (rs7521902, rs1270667, rs13394619, rs7739264, rs1537377 и rs10859871) определялись при заболевании наиболее часто [5, 6]: rs7521902 расположенный вблизи WNT4, rs1270667 на 7p15.2, rs13394619 в эстроген-зависимом регуляторе роста рака груди 1 (GREB1, Growth regulation by estrogen in breast cancer 1), rs7739264 около ингибитора ДНК-связывания 4 (ID4, Inhibitor of DNA binding 4), rs1537377 около антисмысловой РНК ингибитора 2В циклин-зависимой киназы (CDKN2B-AS1, Cyclin-dependent kinase inhibitor 2B antisense RNA) и rs10859871 рядом с vezatin (VEZT). Два других (rs1250248 и rs4141819) показали отчетливую пограничную взаимосвязь с наиболее тяжелыми стадиями заболевания (III-IV стадия) [5, 6]: rs1250248 в фибронектине 1 (FN1, fibronectin1) и rs4141819 на 2p14.

Другие исследования [5, 6, 11] подтвердили статистически значимую взаимосвязь развития эндометриоза и rs10859871, расположенного близко к гену VEZT, в сравнении с общей популяцией с лапароскопически подтвержденным контролем. Подобные достоверные данные по взаимосвязи эндометриоза и rs10859871 были получены для шотландской популяции [6].

По данным других исследований, rs4703908, расположенный близко к гену ZNF366, обеспечил более высокий риск эндометриоидных кист яичников и глубокого инфильтративного эндометриоза, особенно с вовлечением кишечника [12]. Фенотипические различия между формами наружного генитального эндометриоза (эндометриоидные кисты яичников, глубокий инфильтративный эндометриоз и эндометриоз брюшины малого таза) связаны с их откликом на различные половые гормоны.

В настоящее время отсутствуют данные по частоте встречаемости наиболее характерных для эндометриоза SNPs среди женщин с различными формами наружного генитального эндометриоза (НГЭ) в российской популяции. Исследование генетических наследственных факторов, связанных с предрасположенностью к различным формам эндометриоза может помочь сократить время на диагностику, особенно в случаях тяжелых «семейных» форм данного заболевания [12].

Цель исследования: определить частоту встречаемости rs10859871 и rs4703908 среди женщин с различными формами НГЭ (эндометриоидные кисты яичников, глубокий инфильтративный эндометриоз и эндометриоз брюшины малого таза) в российской популяции.

Материал и методы исследования

В исследование включены 218 пациенток репродуктивного возраста находившихся на лечении в отделении оперативной гинекологии ФГБУ НЦАГиП им. В.И. Кулакова Минздрава России в 2015–2016 гг. Перед включением в исследование все женщины ознакомились, датировали и подписали информированное согласие в 2 экземплярах. Протокол исследования был одобрен этическим комитетом.

Всем пациенткам было проведено полное клинико-анамнестическое обследование: сбор анамнеза, общий и гинекологический осмотр, ультразвуковое исследование (УЗИ) органов малого таза, клинико-лабораторное обследование. Эндоскопическую операцию проводили по стандартизированной методике с помощью эндовидеохирургического оборудования фирмы Karl Storz (Германия). Во время операции осматривали орга...

Пшеничнюк Е.Ю., Кузнецова М.В., Бурменская О.В., Кочеткова Т.О., Непша О.С., Трофимов Д.Ю., Адамян Л.В.