Кардиология №3 / 2011
Ассоциация полиморфизма С677Т гена метилентетрагидрофолатредуктазы с инсулинорезистентностью у этнических киргизов
Национальный центр кардиологии и терапии им. акад. М.М. Миррахимова, Бишкек, Киргизия; Киргизская государственная медицинская академия, Бишкек; Научно-исследовательский институт молекулярной биологии и медицины, Бишкек, Киргизия; Киргизско-Российский славянский университет, Бишкек; Museum National d’Histore Naturelle, Departement Homme, natures, societes Париж, Франция
Цель исследования — изучить связь между полиморфизмом С677Т метилентетрагидрофолатредуктазы (МТГФР) и наличием инсулинорезистентности (ИР) у этнических киргизов. В исследование были включены 132 пациента киргизской национальности с ИР и 132 сопоставимых по полу и возрасту пациента без ИР, сахарного диабета (СД) 2-го типа и метаболического синдрома (МС) — контрольная группа. У всех пациентов определяли антропометрические показатели, артериальное давление (АД), уровень глюкозы в крови, липидный состав крови, инсулин сыворотки крови натощак и полиморфизм С677Т гена МТГФР. В группе с ИР генотипы СТ и ТТ встречались статистически значимо чаще, чем в группе контроля (р=0,027). Носительство аллеля Т677 также ассоциировалось с наличием ожирения, гипертриглицеридемии и снижением уровня холестерина липопротеинов высокой плотности (ХС ЛВП). Носительство аллеля Т677 полиморфизма гена МТГФР ассоциируется с наличием ИР, абдоминального ожирения, гипертриглицеридемии и снижением уровня ХС ЛВП.
Повышение уровня гомоцистеина (ГЦ) в сыворотке крови признано одним из факторов риска атеросклеротического поражения сосудистой стенки [1, 2]. Гипергомоцистеинемия (ГГЦ), широко распространенная у пациентов с сахарным диабетом (СД) 2-го типа, в несколько раз увеличивает риск развития коронарной болезни сердца (КБС), инсульта и микрососудистых осложнений у этих больных [3, 4]. Фермент метилентетрагидрофолатредуктаза (МТГФР) участвует в процессах трансметилирования ГЦ и образования метионина [2]. Функциональная мутация аллеля Т677 гена МТГФР приводит к образованию термолабильного фермента, нарушению процессов метилирования ГЦ и повышению его концентрации в крови [5]. Так, в экспериментальных и клинических исследованиях было показано, что при наличии аллеля 677Т отмечается увеличение концентрации ГЦ в крови [5, 6].
Взаимосвязь полиморфизма С677Т гена МТГФР и инсулинорезистентности (ИР) в настоящее время недостаточно изучена. В популяции киргизов изучение роли данного полиморфизма в развитии СД 2-го типа и метаболического синдрома (МС) ранее не проводилось. Цель настоящего исследования: изучить ассоциацию между полиморфизмом С677Т гена МТГФР и наличием ИР у киргизов.
Материал и методы
В исследование включены 132 пациента киргизской национальности с ИР (57 женщин, 75 мужчин) в возрасте от 35 до 75 лет (средний возраст 52,3±8,1 года), из которых 74 страдали СД 2-го типа. Группу контроля составили 132 сопоставимых по полу и возрасту пациента без ИР, СД 2-го типа и МС.
Всем пациентам было проведено клиническое обследование для уточнения диагноза, включающее сбор жалоб, анамнеза, измерение систолического (САД) и диастолического (ДАД) артериального давления и антропометрических показателей: масса тела, рост, окружность талии (ОТ) и бедер (ОБ). В последующем вычисляли индекс массы тела (ИМТ) по формуле: ИМТ=масса тела (кг)/рост (м)2; отношение ОТ/ОБ. Ожирение констатировали при ИМТ≥30 кг/м2.
Кровь для определения биохимических показателей и генетического анализа брали из локтевой вены натощак после 12-часового голодания. В последующем выделяли плазму и сыворотку крови, которые замораживали в жидком азоте. В данных образцах определяли глюкозу, инсулин, общий холестерин (ОХС), триглицериды (ТГ), холестерин липопротеинов высокой плотности (ХС ЛВП) по стандартной методике. Содержание холестерина липопротеинов низкой плотности (ХС ЛНП) вычисляли по формуле Фридвальда [7]. Индекс ИР НОМА высчитывали по формуле: НОМА=(инсулин сыворотки крови (мкМЕ/мл) × глюкоза плазмы (ммоль/л))/22,5. ИР констатировали при индексе НОМА 2,77 и более. Диагноз МС устанавливали согласно модифицированным критериям AHA (2006) [8], диагноз КБС — согласно общепринятым клинико-инструментальным критериям [9].
Выделение ДНК и генетический анализ. ДНК выделяли из клеток крови с использованием набора для экстракции ДНК Nucleon BACC3 (Amersham Pharmacia Biotech, Швеция). Полиморфизм С677Т гена MTГФР определяли с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) на амплификаторе Hy...
