Аутоантитела к антигенам эндотелия при преэклампсии

Цель исследования. Определить спектр аутоантител к эндотелиальным клеткам и компонентам гликокаликса в сыворотке крови пациенток с преэклампсией и исследовать взаимосвязь между ними.
Материал и методы. Проведено проспективное исследование случай-контроль. Активность связывания антител с эндотелиальными клетками линии EA.hy926 и содержание антител к гиалуроновой кислоте в периферической крови определяли у 28 пациенток с преэклампсией и 30 условно здоровых беременных в III триместре беременности.
Результаты исследования. При преэклампсии выявлена повышенная активность связывания антител G класса с антигенами эндотелиальных клеток, а также повышенный уровень антител G класса к гиалуроновой кислоте [-4GlcAβ1-3GlcNAcβ1-]n и дисахридному повторяющемуся звену гиалуроновой кислоты GlcAβ1-3GlcNAcβ. Выявлена отрицательная корреляционная связь между активностью связывания антител с клетками эндотелия и антигиалуроновыми антителами.
Заключение. Полученные данные могут способствовать расширению знаний о патогенезе преэклампсии, а также иметь практическую реализацию в диагностике и прогнозе заболевания.

Несмотря на многочисленные теории развития преэклампсии, исследователи почти единогласно сходятся во мнении, что патогенез заболевания связан с гиперактивацией иммунной системы при беременности, в том числе и ее гуморального звена [1].

Гиперактивация является следствием чрезмерного системного воспалительного ответа (СВО) и эндотелиальной дисфункции, признаки которой наблюдаются у всех пациенток с преэклампсией [2, 3]. Под эндотелиальной дисфункцией понимают стадию, следующую за активацией эндотелия и проявляющуюся в изменении функциональной активности клеток, что ведет к изменению/потере способности эндотелия как органа выполнять свою функцию и дисбалансу факторов, обеспечивающих нормальное функционирование всех эндотелий-опосредованных процессов [4, 5]. Эндотелиальная дисфункция является следствием хронической эндотелиальной активации и может вести к необратимому поражению эндотелиальных клеток, апоптозу, некрозу [4].

В крови пациенток с преэклампсией обнаруживается комплекс гуморальных факторов, свидетельствующих об активации эндотелия (цитокины, хемокины растворимые формы молекул клеточной адгезии, компоненты эндотелиального гликокаликса, прокоагулянтные факторы), снижается концентрация молекул с антитромботическими свойствами, повышается число свободно циркулирующих эндотелиальных клеток [5, 6]. Однако относительно гуморальных факторов адаптивного иммунитета, отражающих активированное состояние эндотелия при преэклампсии, существуют лишь единичные данные.

Провоспалительные воздействия на эндотелиальные клетки с неизбежностью должны затронуть молекулярную архитектуру гликокаликса, что проявляется в изменении представленности функциональных углеводных остатков гликокаликса, а также в шеддинге его компонентов и появлении их в крови [7]. Структурные изменения гликокаликса могут привести к формированию DAMP (Danger Associated Molecular Patterns) [1, 8], то есть неоантигенов, к которым могут появиться ауто-антитела, что может сдвигать гомеостатический баланс в пуле естественных антител, существующий в норме. Значительная часть естественных антител человека направлена к гликанам поверхности клетки [9], при патологических состояниях спектр этих антител меняется, что справедливо и по отношению к антителам, мишенями которых являются гликаны гликокаликса. Известно, что мишенями антиэндотелиальных антител (АЭАТ), которые могут как выполнять регуляторную функцию [10], так и выступать в качестве ключевого звена в гуморальном аутоиммунном ответе против эндотелия при патологиях, являются также и углеводные молекулы, в частности гепарин [11].

Цель исследования: определить спектр аутоантител к эндотелиальным клеткам и компонентам гликокаликса в сыворотке крови пациенток с преэклампсией и исследовать взаимосвязь между ними.

Материал и методы исследования

Проводилось проспективное исследование случай-контроль. Основную группу составили 28 пациенток с преэклампсией в III триместре беременности. В группу сравнения были включены 30 условно здоровых беременных. Критериями исключения были: тяжелая экстрагенитальная патология, острые воспалительные заболевания, гемотрансфузия и трансплантация органов в анамнезе, иммуноглобулинотерапия, применение препаратов, влияющих на выработку антител. Клиническая характеристика пациенток, включенных, в исследование представлена в табл. 1.

Для определения антигликановых антител (АГАТ) в периферической крови использовали микрочипы, содержащие 374 гликана, напечатанных как описано ранее [12], в том числе гиалуроновая кислота (ГК) степени полимеризации ~12. Чипы инкубировали с исследуемыми сыворотками как описано в [13], после чего связавшиеся с гликанами антитела проявляли вторичными антителами против IgG или IgM, флуоресцентно мечеными Alexa555 и Alexa647 соответственно (Invitrogen, США). Сигналы считывали с помощью флуоресцентного сканера ScanArray Gx (Perkin Elmer, США). Полученные данные обрабатывали с помощью программного обеспечения ScanArrayExpress 4.0, используя метод фиксированных колец диаметром 70 мкм. Значимыми считались величины флуоресценции, превышающие фоновое значение (то есть величину сигнала от поверхности, не содержащей лиганд) в 5 раз. Уровень АГАТ (отражающий аффи...

Зиганшина М.М., Шилова Н.В., Хасбиуллина Н.Р., Новаковский М.Е., Николаева М.А., Кан Н.Е., Вавина О.В., Николаева А.В., Тютюнник Н.В., Сергунина О.А., Бот И., Тютюнник В.Л., Бовин Н.В., Сухих Г.Т.