Акушерство и Гинекология №4 / 2015
Диагностическая роль клинических и молекулярно-генетических предикторов внутриутробной инфекции
1ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, Москва; 2ФГБУ ГНЦ Институт Иммунологии ФМБА России, Москва
Цель исследования. Создание модели прогнозирования внутриутробной инфекции (ВУИ) у новорожденных на основании изучения ассоциации клинических и молекулярно-генетических факторов.
Материал и методы. Было проведено проспективное обследование 357 беременных, включающее анализ клинической характеристики и изучение распределения аллелей и генотипов полиморфных локусов генов цитокинов.
Результаты исследования. Установлена взаимосвязь между носительством аллеля –31T гена интерлейкина (IL)1β у матери с реализацией ВУИ (p=0,002). Также была выявлена статистически значимая ассоциация генотипа G/G полиморфизма гена IL6: -174 C>G (р=0,02) и генотипа T/T полиморфизма гена IL8: -251 A>T (р=0,04) у матерей с реализацией ВУИ.
На основании многофакторного анализа клинико-анамнестических и молекулярно-генетических данных была получена математическая модель, позволяющая предсказывать развитие ВУИ. Модель включает генотипы по локусам IL8: -251 A>T и IL1Β: -31 T>C, многоводие во II триместре, угрожающие преждевременные роды, задержку роста плода и/или плацентарную недостаточность в
III триместре. Чувствительность модели составила 60%, специфичность – 79%.
Заключение. Полученные данные позволяют использовать выявленные клинические и молекулярно-генетические факторы у беременных в качестве предикторов ВУИ.
До настоящего времени одной из актуальных проблем перинатологии продолжает оставаться внутриутробная инфекция (ВУИ) [1, 2]. Известно, что инфекционно-воспалительные заболевания женщины в течение беременности являются факторами риска возникновения патологических состояний у плода, развивающегося в условиях тесного взаимоотношения с организмом матери [3, 4]. Острые инфекции могут приводить к потере беременности и/или рождению детей с пороками развития вследствие непосредственного инфицирования плода и плаценты и развития синдрома системного воспалительного ответа [5–8]. Хронические (латентные) инфекции, длительно персистирующие в организме матери, часто прогрессируют на фоне беременности и также могут приводить к внутриутробному инфицированию, плацентарной недостаточности, задержке роста плода и др. [1, 4, 9]. Кроме того, изменения в системе иммунитета вследствие персистенции вирусов могут приводить вторично к активации бактериальной флоры, развитию аутоиммунных нарушений и выступать причиной развития целого каскада патологических воспалительных реакций [3, 7, 10–12]. Следует отметить, что ранняя диагностика ВУИ не всегда возможна, так как симптомы инфекции часто не являются специфичными, а лабораторные тесты занимают немало времени. Вместе с тем прогнозирование, своевременная диагностика и адекватное лечение могут снижать риск развития тяжелых заболеваний у новоpожденных [6, 7, 13].
В последние годы показана роль однонуклеотидных полиморфизмов (SNP) генов иммунного ответа в формировании генетически обусловленных различий в инфекционной резистентности и клиническом течении инфекционных заболеваний [5, 8, 14, 15]. Выше изложенное обосновывает поиск генетически обусловленных особенностей иммунной системы матери, влияющих на риск реализации ВУИ у плода и новорожденного [2, 5, 7].
Целью исследования стало создание модели прогнозирования ВУИ у новорожденных на основании изучения ассоциации клинических и молекулярно-генетических факторов.
Материал и методы исследования
Выполнено проспективное исследование случай-контроль. Проведен анализ особенностей клинической характеристики, течения беременности и ее исходов для матери, плода и новорожденного у 357 женщин. Все пациентки были разделены на две группы в зависимости от реализации ВУИ у новорожденного. Группу 1 (основную) составили 158 пациенток с реализацией ВУИ, группу 2 (группа контроля) – 199 женщин без реализации ВУИ.
Критериями включения явились: одноплодная доношенная беременность, критериями исключения: тяжелая экстрагенитальная патология, многоплодная беременность, пороки развития плода.
Всем беременным, включенным в исследование, был выполнен стандартный набор обследования. Они были ознакомлены с целью и методами исследования, дали письменное согласие на их участие в научном исследовании.
У пациенток изучено распределение аллелей и генотипов функционально значимых полиморфных локусов генов врожденного иммунитета: интерлейкин (IL) 6R: 1510 (1073) A>C (Asp358Ala), IL6: -174 C>G, IL10 -592 A>C, TLR9: -1486 T>C, IL8: -251 A>T, IL1A: -889 C>T, IL1β: -31 T>C, фактор некроза опухоли (TNF): -308 G>A, TNFA: -238 G>A, IL4: -590 C>T, IL10: -592 A>C, IL4R: 1902 A>G (Gln576Arg).
Генотипирование проводили методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с анализом кривых плавления модифицированным методом «примыкающих проб» (adjacent probes, kissing probes с помощью коммерческих тест-систем производства ООО «НПО ДНК-Технология», Россия. ДНК для генотипирования выделяли из образцов периферической и пуповинной крови взятой с ЭДТА в качестве антикоагулянта с помощью комплекта реагентов «Проба-ГС-генетика» производства ООО «НПО ДНК-Технология», Россия.
Статистическая обработка полученных результатов была проведена на персональном компьютере при помощи программного пакета SPSS Statistics 17.0 for Windows.
При построени...
