Диагностическая значимость определения провоспалительных цитокинов для оценки риска реализации внутриутробной инфекции у глубоконедоношенных новорожденных

Цель исследования. Разработка критериев диагностики развития внутриутробной инфекции (ВУИ) у новорожденных с экстремально низкой (ЭНМТ) и очень низкой массой тела (ОНМТ) при рождении на основании комплексного клинико-иммунологического обследования беременных. Материал и методы. Было проведено проспективное исследование 108 пар мать – новорожденный. Критерии включения: преждевременные роды на сроке гестации от 23 до 32 недель. Критерии исключения: многоплодная беременность, тяжелая экстрагенитальная патология, пороки развития плода. Все пациентки, вошедшие в исследование, были осмотрены врачом акушером-гинекологом и сдали венозную кровь и мазок отделяемого заднего свода влагалища на 17–19-й неделе гестации. В I группу были включены 52 пациентки с ВУИ у новорожденных, развившейся в раннем неонатальном периоде и подтвержденной при клинико-лабораторном обследовании, во II – 56 пациенток без реализации ВУИ у новорожденного. У всех беременных и новорожденных было проведено микробиологическое исследование (отделяемого влагалища у матери, отделяемого носоглотки и кала у ребенка). Определение содержания цитокинов (ИЛ-1β, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-10, ФНОα) в сыворотке крови и отделяемом заднего свода влагалища беременных, белков острой фазы (СРБ, ПКТ) в венозной крови беременных до начала регулярной родовой деятельности и новорожденных на 3 сутки жизни проводили методом твердофазного иммуноферментного анализа (ELIZA) с использованием наборов «Cytimmune» (CША). Результаты исследования. Получены данные о достоверном увеличении уровня ИЛ-8 (19,78 пг/мл, p=0,022) и ИЛ-6 (42,99 пг/мл, p=0,038) в сыворотке крови беременных, родивших детей с последующей реализацией ВУИ. При количественной оценке уровня про- и противовоспалительных цитокинов в отделяемом заднего свода влагалища было выявлено достоверное увеличение уровня ИЛ-6 (92,37 пг/мл) и ИЛ-1β (159,55 пг/мл) у беременных I группы (р<0,05). При анализе результатов исследования уровня белков острой фазы в сыворотке крови беременных было выявлено достоверное увеличение уровня СРБ в I группе, составившее 22,6 мг/л (р=0,018), тогда как во II группе он не превышал возрастную норму (4,6 мг/л). При оценке результатов исследования белков острой фазы в сыворотке крови новорожденных, проводившееся на 3-и сутки жизни, выявлено достоверное увеличение в I группе уровня СРБ (11,3 мг/л, р=0,0057) и ПКТ (14,3 нг/мл, р=0,0004). Во II группе уровень СРБ (2,1 мг/л) и ПКТ (1,5 нг/мл) не превышал возрастную норму (5 мг/л и 2 нг/мл соответственно). Заключение. Полученные данные позволяют использовать скрининг беременных, входящих в группу высокого риска реализации ВУИ, и их новорожденных детей.

Внутриутробные инфекции (ВУИ) остаются одними из наиболее серьезных заболеваний плода и новорожденного. В связи с увеличением числа новорожденных с экстремально низкой (ЭНМТ) и очень низкой массой тела при рождении (ОНМТ) инфекция у данного контингента пациентов остается одной из главных причин заболеваемости и смертности. По данным Национального института здоровья детей и Общества исследования неонатального развития (США) возникновение инфекции в первые трое суток коррелировало с весом при рождении и гестационным возрастом [1].

В результате исследования 9500 родов K. Seo и соавт. подтвердили связь между наличием хориоамнионита, эндометрита, неонатальной инфекции и недоношенности [2]. Данные наблюдения предполагают, что субклиническое течение инфекции приводит к преждевременным родам, а клинические проявления инфекционного процесса проявляются после рождения. Ряд исследователей связывает более частое развитие врожденной инфекции у недоношенных новорожденных с незрелостью иммунного ответа [3, 4]. ВУИ также могут быть обусловлены наличием специфической флоры в родовых путях матери [5–7]. Согласно современным представлениям, хроническая персистирующая инфекция в организме матери способствует постоянному поддержанию высокого уровня врожденных факторов иммунной защиты в активном состоянии [7, 8] посредством воздействия на Толл-рецепторный аппарат клеток. Результатом активации рецепторов является запуск цитокинового каскада и реализация воспалительного ответа [9, 10]. Учитывая продолжающийся рост частоты ВУИ у новорожденных с ЭНМТ и ОНМТ, необходимость прогнозирования и совершенствование диагностики данной патологии, актуальным является поиск точных диагностических маркеров как у беременной, так и у новорожденного в первые часы жизни.

Цель исследования: разработка критериев диагностики ВУИ у новорожденных с ЭНМТ и ОНМТ на основании комплексного клинико-иммунологического обследования беременных.

Материал и методы исследования

Было проведено проспективное исследование 108 пар мать – новорожденный, выполненное в акушерском обсервационном отделении ФГБУ НЦАГиП им. В.И. Кулакова Минздрава России. Все пациентки были ознакомлены с целью и методами, дали письменное согласие на их включение в научное исследование. Критерии включения: преждевременные роды на сроке гестации от 23 до 32 недель. Критерии исключения: многоплодная беременность, тяжелая экстрагенитальная патология, пороки развития плода.

Все пациентки, вошедшие в исследование, были осмотрены акушером-гинекологом и сдали венозную кровь и мазок отделяемого заднего свода влагалища на 17–19-й неделе гестации. В I группу были включены 52 пациентки с ВУИ у новорожденных, развившейся в раннем неонатальном периоде и подтвержденной при клинико-лабораторном обследовании, во II – 56 пациенток без реализации ВУИ у новорожденного.

У всех беременных и новорожденных было проведено микробиологическое исследование (отделяемого влагалища у матери, отделяемого носоглотки и ануса у ребенка). Определение содержания цитокинов (интерлейкина (ИЛ)-1β, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-10, фактора некроза опухоли (ФНО)-α) в сыворотке крови и отделяемом заднего свода влагалища беременных, белков острой фазы (С-реактивный белок (СРБ), прокальцитонин (ПКТ)) в венозной крови беременных до начала регулярной родовой деятельности и новорожденных на 3-и сутки жизни проводили методом твердофазного иммуноферментного анализа (ELIZA) с использованием наборов «Cytimmune» (CША). Оценку оптической плотности осуществляли на фотометре «Microplate reader Model 550» («Bio Rad», США) при длине волны 495 нм. Для забора отделяемого заднего свода влагалища применяли стандартную схему. Среднее количество отделяемого составило 50 мкг. Количество цитокинов рассчитывалось на 1 г б...

Ломова Н.А., Милая О.В., Кан Н.Е., Подрез Л.А., Зубков В.В., Тютюнник В.Л.