Диагностика мужского бесплодия, ассоциированного с микроделециями в локусе AZF хромосомы Y

Цель исследования. Оценка обоснованности применения в клинической практике расширенной панели STS-маркеров локуса AZF хромосомы Y – sY84, sY86, sY615, sY127, sY134, sY254, sY255, sY1192, sY1291, sY242, sY1125, sY1197, sY1206 и sY142 – для диагностики мужского бесплодия.
Материал и методы. По результатам спермиологического анализа эякулята, который проводился двукратно в соответствии с рекомендациями ВОЗ от 2010 г., в исследование были включены 272 мужчины – 146 пациентов с патозооспермией, которым проводилось лечение бесплодия в программе ЭКО/ИКСИ (основная группа), и 126 фертильных мужчин с нормозооспермией (контрольная группа). Всем мужчинам проводился молекулярно-генетический анализ для выявления делеций в локусе AZF хромосомы Y. ДНК-типирование методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени проводилось с применением 14 STS-маркеров – sY84, sY86, sY615, sY127, sY134, sY254, sY255, sY1192, sY1291, sY242, sY1125, sY1197, sY1206 и sY142. В качестве внешнего отрицательного контроля были использованы 83 образца крови женщин.
Результаты исследования. Общая распространенность делеций в локусе AZF хромосомы Y у мужчин с патозооспермией и бесплодием составила 19,2%, у фертильных мужчин с нормозооспермией – 15,9%. В обеих группах мужчин наиболее часто выявлялись делеции STS-маркера sY1192, на их долю приходилось 13,7 и 14,3% случаев соответственно. В основной группе доля делеций маркера sY1291 составила 8,2%, доли делеций маркеров sY242, sY254, sY255, sY1206 – по 3,4% , доля делеций маркера sY1197 – 2,1%, доли делеций маркеров sY134, sY142, sY615, sY1125, sY84, sY86, sY127 – по 0,7%. В контрольной группе также были определены делеции маркеров sY1291 и sY1197, их доли составили 2,4 и 1,6%, соответственно.
Заключение. По результатам проведенного исследования не представляет прогностической значимости исследование STS-маркера sY1192, так как он с одинаковой частотой обнаруживается как у пациентов с патозооспермией, так и у фертильных мужчин.

Работа частично поддержана Государственным контрактом Министерства образования и науки РФ № 16.522.12.2009 от 29.09.2011.

Проблема бесплодного брака была и остается весьма актуальной в наше время. По данным статистики примерно 15% супружеских пар в популяции бесплодны, и тенденции к снижению этого показателя не наблюдается. Следует подчеркнуть, что меняется сама структура бесплодия. Если 20 лет назад в структуре бесплодия мужской фактор составлял примерно 30%, то в настоящее время на его долю приходится уже 50% случаев [1–3].

Репродуктивное здоровье мужчин – вопрос, на изучение которого в последнее время направлены многие исследования из-за явного ухудшения показателей спермограммы в современных условиях [4–6]. К факторам, влияющим на количественные и морфофункциональные параметры эякулята, относят: социальные, экологические, а также генетические особенности тех или иных популяций. Кроме того, важно отметить, что некоторые этиологические аспекты мужского бесплодия остаются неизвестными и в современных условиях [3, 7]. Все это позволяет представить масштаб проблемы мужского бесплодия и определяет актуальность данного вопроса не только для врачей репродуктологов, андрологов, но и для здравоохранения и общества в целом.

В настоящее время разработка и активное внедрение в клиническую практику таких методик, как биопсия яичка и интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида в ооцит (ИКСИ), подарили реальные шансы мужчинам с тяжелой патозооспермией/азооспермией иметь собственных детей.

Анализ литературных данных выявил ряд нерешенных вопросов, связанных с тактикой обследования супружеских пар с бесплодием. Так, современные методы обследования не позволяют выявить причину мужского бесплодия примерно в 25% случаев [8]. В этом случае устанавливается диагноз идиопатического бесплодия. Предполагается, что данная форма нарушений фертильности является результатом комплексного воздействия неблагоприятных факторов образа жизни и экологии, которые не всегда учитываются клиницистами, а также наличием неизвестных в настоящее время заболеваний. Соответственно, более глубокий клинический и генетический анализ с применением современных возможностей медицины потенциально уменьшил бы долю пациентов с идиопатическим бесплодием, а также определил прогностические маркеры эффективности лечения пациентов с данной патологией.

Патогенез мужского бесплодия продолжает оставаться недостаточно изученным. На сегодняшний день принято считать, что различные, в том числе неизвестные этиологические факторы запускают в целом схожие патогенетические процессы, конечным итогом которых является патозооспермия (снижение количества и/или качества сперматозоидов) [9].

Одной из основных генетических причин сопряженного c патозооспермией мужского бесплодия являются делеции в локусе (регионе) AZF хромосомы Y [10]. Данный локус находится на длинном плече хромосомы Y в регионе Yq11 и содержит около половины ее генов, большинство из которых вовлечены в сперматогенез. Роль делеций данного хромосомного региона в бесплодии была впервые установлена в 1976 г. цитогенетически с помощью метода дифференциальной окраски хромосом [11]. Стандартными цитогенетическими методами выявляют макроскопические делеции Y-хромосомы. С помощью молекулярно-генетических или молекулярно-цитогенетических методов обнаруживают микроделеции [12].

В настоящее время в AZF локусе хромосомы Y, как правило, различают три области – AZFa субрегион, расположенный в проксимальной части длинного плеча хромосомы Y, AZFb субрегион, расположенный в промежуточной части, и AZFс субрегион, расположенный в дистальной части длинного плеча хромосомы Y [13]. Все субрегионы содержат гены или семейства генов, участвующие в сперматогенезе [3].

Помимо деления региона AZF на субрегионы AZFa, AZFb и AZFc, некоторые исследователи предложили выделить четвертый субрегион AZFd, расположенный в проксимальной части AZFc субрегиона [14, 15]. Также рассматривается вопрос о переименовании субрегиона AZFa в субрегион AZF1 и объединении субрегионов AZFb и AZFc в единый субрегион AZF2 в связи с тем, что они частично перекрываются на хромосоме Y [16].

Среди делеций AZF локуса...

Барков И.Ю., Сорока Н.Е., Попова А.Ю., Гамидов С.И., Беляева Н.А., Глинкина Ж.И., Калинина Е.А., Трофимов Д.Ю., Сухих Г.Т.