Диагностика плоскоклеточных интраэпителиальных поражений и рака шейки матки на основании количественной оценки экспрессии микроРНК.

DOI: https://dx.doi.org/10.18565/aig.2017.9.78-84

04.10.2017
440

1ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, Москва 2ГБОУ Первый московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова, Россия

Цель исследования. Оценить возможность дифференциальной диагностики степени тяжести плоскоклеточных интраэпителиальных поражений шейки матки на основании количественной оценки экспрессии микроРНК: has-mir-22-3р, has-mir-25*-3р и has-mir-92а-5р в соскобах шеечного эпителия.
Материал и методы. В исследование были включены 95 женщин в возрасте от 18 до 49 лет (средний возраст 32,7±0,5 года), которые были разделены на 4 группы: без патологии шейки матки – 32 пациентки, с LSIL – 31 пациентка, с HSIL – 26 пациенток и с раком шейки матки – 6 пациенток. Для постановки клинического диагноза использовали цитологический и гистологический методы исследования, расширенную кольпоскопию, тестирование на вирус папилломы человека и измерение уровня экспрессии микроРНК и методом количественной полимеразной цепной реакции в реальном времени.
Результаты исследования. При плоскоклеточных интраэпителиальных поражениях шейки матки значительно снижается синтез mir-22, и наоборот, повышается экспрессия mir-92а. Экспрессия mir-25 повысилась не значительно. Проведение логистического регрессионного анализа позволило выявить пороговые уровни экспрессии mir-22 и mir-92а, позволяющие с диагностической точностью более 80% дифференцировать рак шейки матки как среди пациенток без видимых патологий, так и у пациенток с плоскоклеточными интраэпителиальными поражениями.
Заключение. Проведенное исследование позволяет наряду с традиционными методами рассматривать уровень экспрессии микроРНК mir-22 и mir-92а как информативный молекулярный маркер прогнозирования степени поражения цервикального эпителия при предраке и раке шейки матки.

Рак шейки матки является одним из наиболее распространенных заболеваний женщин со смертельным исходом [1]. В мире ежегодно диагностируется более 500 000 случаев рака шейки матки, которые в половине случаев заканчиваются летально [2, 3]. Рак шейки матки – многостадийный процесс, развитию которого предшествуют предраковые процессы в шейке матки, инициированные вирусом папилломы человека (ВПЧ) [4, 5].

В настоящее время используется классификация предраковых поражений, предложенная в 1988 г. в США в г. Бетесда (Terminology Bethesda System, TBS) которая была пересмотрена в 1991, 2001 и 2014 гг. и на сегодняшний день рекомендована Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) как наиболее оптимальная для интерпретации цитологических заключений.

К ее основным терминологическим характеристикам относятся: NILM (Negative for intraepithelial lesion or malignancy) – негативные в отношении интраэпителиального поражения или злокачественности; ASC (Atypicals squamous cells) – атипичные клетки плоского эпителия; ASC-US (Atypicals squamous cells undertermined significance) – атипичные клетки плоского эпителия неясного значения; ASC-H (Atypicals squamous cells cannot exclude HSIL – атипичные клетки плоского эпителия, не позволяющие исключить поражение эпителия тяжелой степени; LSIL (Low grade squamous cells intraepithelial lesion) – низкая степень плоскоклеточного интраэпителиального поражения; HSIL (High grade squamous cells intraepithelial lesion) – высокая степень плоскоклеточного интраэпителиального поражения; CIS (Carcinoma in situ) – рак in situ.

На сегодняшний день имеются убедительные доказательства, что основной причиной заболевания является инфицированность высокоонкогенными типами ВПЧ базальных эпителиальных клеток шейки матки, сопровождающаяся репликацией вирусной ДНК и синтезом ранних вирусных онкопротеинов Е5, Е6 и Е7, способных подавить клеточную дифференцировку, нарушить нормальные процессы апоптоза и пролиферации, вызвать повреждения хромосом и инициировать гиперпластические процессы в пораженной ткани вплоть до рака шейки матки [6].

В то же время известно, что наличия одной только папилломавирусной инфекции недостаточно для инициации злокачественной трансформации, необходимы другие факторы, как внутренние, так и внешние, которые играют важную роль в развитии рака шейки матки.

В последние годы открытие нетранслируемых низкомолекулярных РНК – микроРНК, регулирующих экспрессию генов на транскрипционном и посттранскрипционном уровне, кардинально изменило современную концепцию канцерогенеза шейки матки [7]. МикроРНК – короткие одноцепочечные молекулы длиной 20–25 нуклеотидов, осуществляющие регуляцию экспрессии генов на постранскрипционном уровне. Они участвуют в регуляции практически всех фундаментальных биологических процессов развития организма: делении клеток, апоптозе, дифференциации, клеточной миграции и инвазии, ангиогенезе, формировании иммунного ответа [8]. Многочисленные исследования свидетельствуют о значительной роли микроРНК в развитии онкологических заболеваний, в том числе и рака шейки матки [9, 10].

В настоящее время известно более 50 микроРНК, экспрессия которых меняется при неопластической трансформации эпителия шейки матки в процессе перехода от нормы к плоскоклеточным интраэпителиальным поражениями и цервикальному раку [11]. Развитие как предраковых, так и злокачественных процессов сопровождается повышением экспрессии проонкогенных микроРНК, усиливающих пролиферативную активность клеток, способствующих их метастазированию и инвазии, активирующих локальный ангиогенез. Одновременно снижается синтез противоопухолевых микроРНК, обеспечивающих функцию апоптоза, тормозящих процессы пролиферации, миграции, инвазии и ангиогенеза. Изучение динамики изменения экспрессии микроРНК на разных стадиях развития плоскоклеточных интраэпителиальных поражений, предоставляют новые возможности для разработки тканевых онкомаркеров с целью ранней диагностики, а также возможность использования микроРНК в качестве мишеней для противоопухолевой терапии.

В связи с этим целью настоящей работы было оценить возможность дифференциальной диагностики степени тяжести интраэпителиальных плоскоклеточных поражений шейки матки на основании количественной оценки экспрессии про- и противоо...

Список литературы

1. Torre L.A., Bray F., Siegel R.L., Ferlay J., Lortet-Tieulent J., Jemal A. Global cancer statistics, 2012. CA: Cancer J. Clin. 2015; 65(2): 87-108.

2. Bernard E., Pons-Salort M., Favre M., Heard I., Delarocque-Astagneau E., Guillemot D., Thiébaut A.C. Comparing human papillomavirus prevalences in women with normal cytology or invasive cervical cancer to rank genotypes according to their oncogenic potential: A meta-analysis of observational studies. BMC Infect. Dis. 2013; 13: 373.

3. Давыдов М.И., Аксель Е.М. ред. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ в 2012 г. М.: Издательская группа РОНЦ; 2014: 47.

4. DiGiuseppe S., Keiffer T.R., Bienkowska-Haba M., Luszczek W., Guion L.G., Müller M., Sapp M. Topography of the human papillomavirus minor capsid protein L2 during vesicular trafficking of infectious entry. J. Virol. 2015; 89(20): 10442-52.

5. Richart R.M. Cervical intraepithelial neoplasia. Pathol. Ann. 1973; 8: 301.

6. World Health Organization. Human papillomavirus (HPV) and cervical cancer. Available at: http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs380/en/Accessed 24 February 2016

7. Stahlhut C., Slack F.J. MicroRNAs and the cancer phenotype: profiling, signatures and clinical implications. Genome Med. 2013; 5(12): 111.

8. Frixa T., Donzelli S., Blandino G. Oncogenic MicroRNAs: Key players in malignant transformation. Cancers (Basel). 2015; 7(4): 2466-85.

9. Galamb Á., Benczik M., Zinner B., Vígh E., Baghy K., Jeney C. et al. Dysregulation of microRNA expression in human cervical preneoplastic and neoplastic lesions. Pathol. Oncol. Res. 2015; 21(3): 503-8.

10. Коган Е.А., Файзуллина Н.М., Ли Ц., Демура Т.А., Жарков Н.В., Козаченко А.В., Чернова В.Ф., Байрамова Г.Р., Прилепская В.Н. Ранняя диагностика ВПЧ-ассоциированной патологии шейки матки у женщин до 30 лет и старше. Акушерство и гинекология. 2015; 9: 62-7.

11. Zhu X.L., Wen S.Y., Ai Z.H., Wang J., Xu Y.L., Teng Y.C. Screening for characteristic microRNAs between pre-invasive and invasive stages of cervical cancer. Mol. Med. Rep. 2015; 12(1): 55-62.

12. Chen C., Ridzon D.A., Broomer A.J., Zhou Z., Lee D.H., Nguyen J.T. et al. Realtime quantification of microRNAs by stem-loop RT-PCR. Nucleic Acids Res. 2005; 33(20): e179.

13. López A.Y., López J.A. Multistep model of cervical cancer: participation of miRNAs and coding genes. Int. J. Mol. Sci. 2014; 15(9): 15700-33.

14. Байрамова Г.Р., Файзуллин Л.З., Королькова А.И., Полозников А.А., Киселев В.И. Скрининг рака шейки матки: что нового в мировой практике? Акушерство и гинекология. 2016; 7: 17-21. http://dx.doi.org/10.18565/aig.2016.7.17-21

15. Tian Q., Li Y., Wang F., Li Y., Xu J., Shen Y. et al. MicroRNA Detection in cervical exfoliated cells as a triage for human papillomavirus – positive women. J. Natl. Cancer Inst. 2014; 106(9): pii: dju241.

16. Malta M., Ribeiro J., Monteiro P., Loureiro J., Medeiros R., Sousa H. Let-7c is a candidate biomarker for cervical intraepithelial lesions: a pilot study. Mol. Diagn. Ther. 2015; 19(3): 191-6.

17. Xin M., Qiao Z., Li J., Liu J., Song S., Zhao X. et al. miR-22 inhibits tumor growth and metastasis by targeting ATP citrate lyase: evidence in osteosarcoma, prostate cancer, cervical cancer and lung cancer. Oncotarget. 2016; 7(28):44252-65.

18. Song S.J., Pandolfi P.P. miR-22 in tumorigenesis. Cell Cycle. 2014; 13(1): 11-2.

19. Zhang H., Cao H., Xu D., Zhu K. MicroRNA-92a promotes metastasis of nasopharyngeal carcinoma by targeting the PTEN/AKT pathway. Onco Targets Ther. 2016; 9: 3579-88.

20. Caiazza C., Mallardo M. The roles of miR-25 and its targeted genes in development of human cancer. Microna. 2016; 5(2): 113-9.

Поступила 10.04.2017

Принята в печать 28.04.2017

Об авторах / Для корреспонденции

Чернова Виктория Федоровна, аспирант ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4
Карнаухов Виталий Николаевич, младший научный сотрудник лаборатории молекулярно-генетических методов ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова
Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (916) 710-67-89. E-mail: v_karnauhov@oparina4.ru
Файзуллин Леонид Закиевич, к.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории молекулярно-генетических методов ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (916) 710-67-89. E-mail: l_faizullin@oparina4.ru
Байрамова Гульдана Рауфовна, д.м.н., зав. по клинической работе научно-поликлинического отделения ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (909) 994-77-00. Е-mail: g_bairamova@oparina4.ru
Коган Евгения Александровна, д.м.н., профессор, зав. кафедрой патологической анатомии ГБОУ 1-й МГМУ им. И.М. Сеченова. Телефон: 8 (926) 533-12-71. Е-mail:koganevg@gmail.com
Мзарелуа Гуранда Мерабовна, аспирант ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-14-03. E-mail: mzareluag@mail.ru
Назарова Нисо Мирзоевна, д.м.н., ведущий научный сотрудник научно-поликлинического отделения ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-14-03. E-mail: n_nazarova@oparina4.ru
Козаченко Андрей Владимирович, ведущий научный сотрудник гинекологического отделения ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-77-83. E-mail: a_kozachenko@oparina4.ru
Трофимов Дмитрий Юрьевич, д.б.н., зав. лабораторией молекулярно-генетических методов ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (916) 614-49-22. E-mail: d_trofimov@oparina4.ru
Прилепская Вера Николаевна, д.м.н., зам. директора по науке ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-69-34
Сухих Геннадий Тихонович, д.м.н., академик РАН, директор ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-18-00. E-mail: g_sukhikh@oparina4.ru

Для цитирования: Чернова В.Ф., Карнаухов В.Н., Файзуллин Л.З., Байрамова Г.Р.,
Коган Е.А., Мзарелуа Г.М., Назарова Н.М., Козаченко А.В., Трофимов Д.Ю.,
Прилепская В.Н., Сухих Г.Т. Диагностика плоскоклеточных
интраэпителиальных поражений и рака шейки матки на основании
количественной оценки экспрессии микроРНК.
Акушерство и гинекология. 2017; 9: 78-84.
http://dx.doi.org/10.18565/aig.2017.9.78-84

Полный текст публикаций доступен только подписчикам

Нет комментариев

Комментариев: 0

Вы не можете оставлять комментарии
Пожалуйста, авторизуйтесь