Диагностика вульвовагинального кандидоза: сопоставление информативности клинических данных и результатов лабораторных исследований

27.03.2015
1017

1ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва 2ФГБУ Поликлиника № 1 Управления делами Президента Российской Федерации, Москва

Цель исследования. Сравнение диагностических характеристик лабораторных методов и клинических признаков в диагностике вульвовагинального кандидоза (ВВК).
Материал и методы. В исследование были включены 154 пациентки, обратившиеся к гинекологу с жалобами на выделения из половых путей, зуд, жжение, гиперемию в области половых органов. Обследование включало проведение микроскопии, культурального исследования и полимеразной цепной реакции (ПЦР) с количественным определением пяти наиболее значимых видов Candida.
Результаты. ВВК был установлен у 47 (30,5%) пациенток. Диагностическая чувствительность и специфичность микроскопии составила 66 и 98% соответственно, культурального исследования –
98 и 89% соответственно, ПЦР – 100 и 88% соответственно.
Заключение. Метод ПЦР и культуральное исследование продемонстрировали такие преимущества, как высокая чувствительность и специфичность, возможность количественного определения содержания Candida spp. и их видовой идентификации. Сроки получения результата методом ПЦР были сопоставимы с таковыми для микроскопического исследования.

Вульвовагинальный кандидоз (ВВК) – это вторая по частоте выявления причина патологических вагинальных выделений у женщин репродуктивного периода [1]. Примерно у 56–75% женщин развивается как минимум один эпизод ВВК в течение жизни, у 50% из них развивается повторный эпизод, а 8% женщин страдают от рецидивирующего ВВК [2].

Диагностика ВВК основывается на оценке жалоб и клинической картины, а также результатов лабораторных исследований. Клинические признаки ВВК включают зуд, жжение, отечность слизистых оболочек, творожистые выделения, гиперемию слизистой вульвы и/или влагалища. Однако ни один из них не является патогномоничным. Так, например, «классические» творожистые выделения выявляются только у 20–60% пациенток, а зуд у 50–87% [3].

Основными методами лабораторной диагностики ВВК являются микроскопия окрашенного препарата и культуральное исследование – посев на среду Сабуро.

Микроскопия окрашенного препарата позволяет получить результаты исследования в короткие сроки, однако чувствительность данного метода составляет 40–60% [4]. Кроме того, микроскопия не позволяет отличить C. albicans от других видов кандид, хотя известно, что C. glabrata и C. krusei проявляют резистентность или дозозависимую чувствительность к препаратам азолового ряда [5].

Культуральное исследование обладает большей чувствительностью [4], однако длительное время проведения исследования (до 7 дней) ограничивает использование метода, когда при наличии острого процесса необходимо быстрое получение результата.

В последние годы в лабораторную практику активно внедряются молекулярно-биологические методы (в частности, полимеразная цепная реакция (ПЦР) в режиме реального времени), которые, с одной стороны, обладают высокой чувствительностью, а с другой – позволяют получить результаты исследования в кратчайшие сроки [6–8]. Ранее в ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии был разработан набор реагентов «АмплиСенс-Флороценоз/Кандиды-FL», который позволяет проводить определение и количественную оценку наиболее значимых видов Candida (С. albicans, C. glabrata, C. krusei, C. parapsilosis, C. tropicalis) в биоматериале из влагалища.

Целью данного исследования стало сравнение диагностических характеристик лабораторных методов (микроскопия, культуральное исследование, ПЦР) и клинических признаков в диагностике ВВК.

Материал и методы исследования

В исследование были включены образцы биологического материала от 154 пациенток Научно-консультативного клинико-диагностического центра (НККДЦ) ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора. Сбор материала проводили с декабря 2012 по июнь 2013 года. Средний возраст пациенток составил 28±6,3 года (от 17 до 45 лет). Основным критерием включения пациенток в исследование было наличие одного или нескольких симптомов инфекций вульвы/влагалища: жалобы на выделения из половых путей, зуд, жжение, гиперемию в области половых органов. В исследование включали пациенток, не принимавших антимикробные и пробиотические препараты, а также не использовавших антисептические средства в течение 4 недель до посещения врача. Все пациентки подписывали форму информированного согласия на участие в исследовании. Исследование было одобрено этическим комитетом ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора.

Всем пациенткам проводили осмотр влагалища и шейки матки в зеркалах, а также бимануальное исследование. При осмотре получали вагинальные мазки с боковой стенки влагалища ватным тампоном (3 образца от каждой пациентки). Один из образцов помещали в пробирку со средой Amies, второй – в пробирку с транспортной средой ТСМ (производство ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора), третий наносили на стекло для дальнейшей окраски по Граму и проведения микроскопии. Полученные образцы хранили следующим образом: образец для проведения культурального исследования – при температуре 6±2°C не более 24 часов до момента доставки в лабораторию, образцы для проведения ПЦР и микроскопии – при комнатной температуре не более двух суток до момента исследования.

Для проведения микроскопии образцы окрашивали по Граму, далее проводили исследование с применением объективов х10 и х100. Во всех образцах регистрировали соотношение полиморфноядерных лейкоцитов (ПМЯЛ) и эпителиальных клеток (ЭК) как маркера воспалительной реакции слизистой влагалища, состав и соотношение разных морфотипов, наличие дрожжеподобных грибов.

Культуральное исследование включало посев материала, выделение чистой культуры, идентификацию выделенного гриба рода Candida. Посев производили на чашки Петри со средой Сабуро с левомицетином методом истощающего штриха. Чашки помещали в термостат при темпера...

Список литературы

  1. Anderson M.R., Klink K., Cohrssen A. Evaluation of vaginal complaints. JAMA. 2004; 291: 1368-79.
  2. Sobel J.D., Faro S., Force R.W., Foxman B., Ledger W.J., Nyirjesy P.R. et al. Vulvovaginal candidiasis: epidemiologic, diagnostic, and therapeutic considerations. Am. J. Obstet. Gynecol. 1998; 178(2): 203-11.
  3. Biggs W.S., Williams R.M. Common gynecologic infections. Prim. Care. 2009; 36(1): 33-51.
  4. Sherrard J., Donders G., White D., Jensen J.S.; European IUSTI. European (IUSTI/WHO) guideline on the management of vaginal discharge, 2011. Int. J. STD AIDS. 2011; 22(8): 421-9.
  5. Анкирская А.С., Муравьева В.В., Фурсова С.А., Миронова Т.Г., Королева Т.Е. Мониторинг видового состава и чувствительности к антимикотикам дрожжеподобных грибов, выделенных из влагалища женщин репродуктивного возраста. Клиническая микробиолология и антимикробная химиотерапия. 2006; 8(1): 87-95.
  6. Weissenbacher T., Witkin S.S., Ledger W.J., Tolbert V., Gingelmaier A., Scholz C. et al. Relationship between clinical diagnosis of recurrent vulvovaginal candidiasis and detection of Candida species by culture and polymerase chain reaction. Arch. Gynecol. Obstet. 2009; 279(2): 125-9.
  7. Cartwright C.P., Lembke B.D., Ramachandran K., Body B.A., Nye M.B., Rivers C.A., Schwebke J.R. Comparison of nucleic acid amplification assays with BD affirm VPIII for diagnosis of vaginitis in symptomatic women. J. Clin. Microbiol. 2013; 51(11): 3694-9.
  8. Avni T., Leibovici L., Paul M. PCR diagnosis of invasive candidiasis: systematic review and meta-analysis. J. Clin. Microbiol. 2011; 49(2): 665-70.
  9. Engberts M.K., Korporaal H., Vinkers M., van Belkum A., van Binsbergen J., Lagro-Janssen T. et al. Vulvovaginal candidiasis: diagnostic and therapeutic approaches used by Dutch general practitioners. Eur. J. Gen. Pract. 2008; 14(1): 30-3. doi: 10.1080/13814780701814929.
  10. Emmerson J., Gunputrao A., Hawkswell J., Dexter A., Sykes R., Searle S. et al. Sampling for vaginal candidiasis: how good is it? Int. J. STD AIDS. 1994; 5(5): 356-8.
  11. Sonnex C., Lefort W. Microscopic features of vaginal candidiasis and their relation to symptomatology. Sex. Transm. Infect. 1999; 75(6): 417-9.
  12. Mårdh P.A., Rodrigues A.G., Genç M., Novikova N., Martinez-de-Oliveira J., Guaschino S. Facts and myths on recurrent vulvovaginal candidosis—a review on epidemiology, clinical manifestations, diagnosis, pathogenesis and therapy. Int J. STD AIDS. 2002; 13(8): 522-39.
  13. Sudbery P., Gow N., Berman J. The distinct morphogenic states of Candida albicans. Trends Microbiol. 2004; 12(7): 317-24.
  14. Sudbery P.E. Growth of Candida albicans hyphae. Nat. Rev. Microbiol. 2011; 9(10): 737-48. doi: 10.1038/nrmicro2636.
  15. McClelland R.S., Richardson B.A., Hassan W.M., Graham S.M., Kiarie J., Baeten J.M. et al. Prospective study of vaginal bacterial flora and other risk factors for vulvovaginal candidiasis. J. Infect. Dis. 2009; 199(12): 1883-90. doi: 10.1086/599213.
  16. Odds F.C., Webster C.E., Mayuranathan P., Simmons P.D. Candida concentrations in the vagina and their association with signs and symptoms of vaginal candidosis. J. Med. Vet. Mycol. 1988; 26(5): 277-83.
  17. Albuquerque P., Casadevall A. Quorum sensing in fungi—a review. Med. Mycol. 2012; 50(4): 337-45. doi: 10.3109/13693786.2011.652201.
  18. Bertholf M.E. Symptom diagnosis of candida vaginitis. J. Fam. Pract. 1983; 17(5): 775, 777.
  19. Thompson D.S., Carlisle P.L., Kadosh D. Coevolution of morphology and virulence in Candida species. Eukaryot. Cell. 2011; 10(9): 1173-82. doi: 10.1128/EC.05085-11.
  20. Beigi R.H., Meyn L.A., Moore D.M., Krohn M.A., Hillier S.L. Vaginal yeast colonization in nonpregnant women: a longitudinal study. Obstet. Gynecol. 2004; 104(5, Pt 1): 926-30.
  21. Geiger A.M., Foxman B., Sobel J.D. Chronic vulvovaginal candidiasis: characteristics of women with Candida albicans, C glabrata and no candida. Genitourin. Med. 1995; 71(5): 304-7.
  22. Merson-Davies L.A., Odds F.C., Malet R., Young S., Riley V., Schober P., Fisk P.G. Quantification of Candida albicans morphology in vaginal smears. Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol. 1991; 42(1): 49-52.
  23. Fujita S.I., Senda Y., Nakaguchi S., Hashimoto T. Multiplex PCR using internal transcribed spacer 1 and 2 regions for rapid detection and identification of yeast strains. J. Clin. Microbiol. 2001; 39(10): 3617-22.
  24. Goldacre M.J., Watt B., Loudon N., Milne L.J., Loudon J.D., Vessey M.P. Vaginal microbial flora in normal young women. Br. Med. J. 1979; 1(6176): 1450-3.
  25. Spinillo A., Capuzzo E., Acciano S., De Santolo A., Zara F. Effect of antibiotic use on the prevalence of symptomatic vulvovaginal candidiasis. Am. J. Obstet. Gynecol. 1999; 180(1, Pt1): 14-7.
  26. Wilton L., Kollarova M., Heeley E., Shakir S. Relative risk of vaginal candidiasis after use of antibiotics compared with antidepressants in women: postmarketing surveillance data in England. Drug Saf. 2003; 26(8): 589-97.
  27. Pirotta M.V., Garland S.M. Genital Candida species detected in samples from women in Melbourne, Australia, before and after treatment with antibiotics. J. Clin. Microbiol. 2006; 44(9): 3213-7.

Об авторах / Для корреспонденции

Румянцева Т.А., научный сотрудник лаборатории молекулярной диагностики и эпидемиологии инфекций органов репродукции ФБУН ЦНИИ эпидемиологии.
Адрес: 111123, Россия, Москва, ул. Новогиреевская, д. 3а. E-mail: ivanovatatiana86@yandex.ru
Савочкина Ю.А., к.б.н., с.н.с. лаборатории молекулярной диагностики и эпидемиологии инфекций органов репродукции ФБУН ЦНИИ эпидемиологии.
Адрес: 111123, Россия, Москва, ул. Новогиреевская, д. 3а. E-mail: savochkina@pcr.ru
Долгова Т.И., м.н.с. лаборатории молекулярной диагностики и эпидемиологии инфекций органов репродукции ФБУН ЦНИИ эпидемиологии.
Адрес: 111123, Россия, Москва, ул. Новогиреевская, д. 3а. E-mail: tamara.dolgova89@gmail.com
Зайцева С.В., врач-лаборант КДЛ и ИЦП ФГБУ Поликлиника № 1 УД Президента РФ. Адрес: 119002, Россия, Москва, пер. Сивцев Вражек, д. 26/28.
E-mail: s.zaytseva@vipmed.ru
Кахерская М.А., врач-лаборант КДЛ и ИЦП ФГБУ Поликлиника № 1 УД Президента РФ. Адрес: 119002, Россия, Москва, пер. Сивцев Вражек, д. 26/28.
E-mail: m.kaherskaya@vipmed.ru
Кудрявцева Л.В., д.м.н., профессор, зам/ главного врача по лечебной работе, зав. КДЛ и ИЦП ФГБУ Поликлиника № 1 УД Президента РФ.
Адрес: 119002, Россия, Москва, пер. Сивцев Вражек, д. 26/28. E-mail: L.Kudryavceva@vipmed.ru
Гущин А.Е., к.б.н., зав. лабораторией молекулярной диагностики и эпидемиологии инфекций органов репродукции ФБУН ЦНИИ эпидемиологии.
Адрес: 111123, Россия, Москва, ул. Новогиреевская, д. 3а. E-mail: aguschin@pcr.ru

Полный текст публикаций доступен только подписчикам

Нет комментариев

Комментариев: 0

Вы не можете оставлять комментарии
Пожалуйста, авторизуйтесь